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(终稿)致病菌细胞的近红外光谱鉴别方法研究.doc(最终版) (终稿)致病菌细胞的近红外光谱鉴别方法研究.doc(最终版)

格式:word 上传:2022-06-25 08:31:06

《(终稿)致病菌细胞的近红外光谱鉴别方法研究.doc(最终版)》修改意见稿

1、“.....人畜感染后可呈无症状带菌状态,也可表现为有临床症状的致死疾,它可能加重病态或死亡率,或者降低动物的繁殖生产力。自世纪后期,沙门氏菌首次被鉴定为人类的种病原以来,检测方法都是建立在采取感染病人的粪便或血液作为临床病料的基上。此后的年间,用于从食品中分离沙门氏菌的方法实质上与那些用于临床病料的方法是相同的。虽然这些方法本身证明是可靠的,但却很费力耗时,需要天才能完成。单核细胞增生李斯特菌也是种人畜共患病的病原菌。感染后主要表现为败血症脑膜炎和单核细胞增多。单增李斯特菌在各年龄段人群中均可发病,尤其免疫机能低下者和新生儿孕妇老年人等,病死率高达。应用常规方法检验耗时费力,程序复杂。采用聚合酶链反应法检测......”

2、“.....仍然满足不了实时检测的需要。进入年代,近红外分析技术逐步受到分析化学家的重视,应用逐步扩展到石油化工医药生物化学烟草纺织品等领域,现已发展成为种独立的分析技术活跃在光谱分析领域。傅立叶变换近红外光谱分辨率高,不仅能提供分子基团特征的振动吸收谱带,而且能敏锐地探测分子基团及周围环境的变化。细胞的近红外光谱能够反映核酸蛋白质糖蛋白和生物膜等分子在细胞内的含量构型构象及其所发生的变化。通过建立其近红外光吸收模型,找到食品中对数期的沙门氏菌单增李斯特菌的近红外特征吸收光谱,使得不同致病菌能够区分开来。因此,通过不同浓度梯度的沙门氏菌单增李斯特菌细胞的红外光谱来获得沙门氏菌单增李斯特菌的近红外光谱信息,继而研究沙门氏菌单增李斯特菌的近红外光谱的鉴别方法......”

3、“.....具有较好的应用前景单增李斯特菌全细胞细胞壁细胞质的光谱图由得到不同浓度的单增李斯特菌全细胞细胞壁和细胞质的近红外光谱叠加图如图图图所示。摘要致病菌细胞的近红外光谱鉴别方法研究摘要致病菌,即能够导致人类疾病或危害人类健康的细菌。致病菌污染食品可导致食物中毒与食源性感染,是食品安全的重大隐患。近红外光谱技术是种高效快速的现代分析技术,是近年来发展最快的检测技术之,具有无损快速高效方便和环保的特点。本文以沙门氏菌和单增李斯特菌为代表,采用平板划线法对沙门氏菌和单增李斯特菌的分离培养进行研究。结果表明,用亚硫酸铋琼脂培养基改良的琼脂培养基可将沙门氏菌单增李斯特菌从杂菌中很好的分离开来用光电比浊法,对沙门氏菌的对数生长期进行研究。通过比较沙门氏菌的生长曲线图,研究其生长趋势,确定了沙门氏菌的对数生长期......”

4、“.....考察近红外光对致病菌细胞的作用,根据不同浓度梯度的沙门氏菌单增李斯特菌的全细胞细胞壁和细胞质的近红外光谱图谱,利用基于主成分分析技术的投影判别分析,研究两种菌的近红外光谱鉴别方法。结果表明,不论是利用全细胞细胞壁还是细胞质的近红外光谱分析,都可以将大肠杆菌和单增李斯特菌区分开来。关键词近红外光谱,沙门氏菌,单增李斯特菌,主成分投影分析,鉴别方法摘要......”

5、“.....浓度梯度值呈比差为的等差序列,备用。用超声波细胞粉碎仪破碎沙门氏菌的全细胞,破碎参数选为破碎间隔实际破碎总时间进行沙门氏菌细胞破碎,之后离心分离,沉淀部分为细胞质上清液为细胞质。将细胞质悬液第章材料与方法充分震荡摇匀,用移液枪移取菌液于大试管中,加入无菌水,充分振匀形成倍稀释菌悬液,然后逐级进行次倍稀释过程,制成组浓度梯度的沙门氏菌细胞质悬液,个浓度梯度值呈比差为的等差序列......”

6、“.....组个浓度梯度的沙门氏菌细胞壁悬液的制备同细胞质悬液制备过程。单增李斯特菌全细胞细胞壁细胞质的制备单增李斯特氏菌样品的制备对单增李斯特氏菌进行细胞的活化和分离纯化,选进行单增李斯特氏菌种子液的制备,之后离心分离湿菌体,以定体积无菌水分三次洗涤沉淀部分,充分震荡摇匀使菌体分散开来,平板菌落计数法进行菌落计数结果为亿。选择超声波破碎参数为破碎间隔实际破碎总时间进行单增李斯特氏菌细胞破碎,之后离心分离,沉淀部分为细胞壁上清液为细胞质。三组倍稀释浓度梯度的单增李斯特氏菌细胞壁细胞质悬液的制备同沙门氏菌。沙门氏菌全细胞细胞壁细胞质的光谱采集主成分分析方法介绍主成分分析,是多元统计中的种数据压缩技术,该方法广泛用于化学实验数据的统计分析,是化学计量学中的基础方法。是对多变量数据进行统计处理的种数据线性投影方法......”

7、“.....通过分析原始数据的相互关系,采用坐标变换的方法对数据进行正交变换,消除数据间的相关关系,具有分析多变量主次关系的功能。近红外光谱带严重重叠,可造成分析的困难,而在不丢失主要光谱信息的前提下选择为数较少的新变量来代替原来较多的变量,可有效解决光谱重叠的问题,从而提取所需的化学信息。试验参数选择分辨率仪器的分辨率影响近红外光谱的分析,而且对不同组分的影响是不同的,对于光谱重叠严重的部分,提高分辨率有利于光谱的分析,但过高会大大增加试验和数据处理工测定的吸光度比浊法是用分光光度计测定培养液中微生物的数量。由于细菌悬液的浓度与吸光度值成正比,因此可利用值来推知菌液的浓度,并将测得的值与其对应的培养时间作图......”

8、“.....选用波长进行比浊测定,按编号从小到大的顺序依次进行测定。沙门氏菌比浊测定结果吸光度值见表。第章结果与分析表沙门氏菌菌液值培养时间吸光度值空白对照生长曲线的绘制由表沙门氏菌菌液值,以沙门氏菌培养时间为横坐标以菌液光密度值为纵坐标,绘制沙门氏菌生长曲线图。第章结果与分析图沙门氏菌生长曲线图培养时间吸光度值由图可知,沙门氏菌在特征表现为生长迟缓,生长迅速呈对数生长趋势,以后逐渐进入稳定期和衰亡期。此沙门氏菌生长曲线与典型生长曲线有所不同,对数期很长,长达个小时,但基本符合典型生长曲线延缓期对数期稳定期和衰亡期四个时期的划分。为沙门氏菌的对数生长期。比浊法测定的是活菌数和死菌数之和,所绘制的生长曲线可能会有定的误差,但这并不影响生长曲线所反映的沙门氏菌的生长情况......”

9、“.....光电比浊法所测生长曲线基本符合典型的沙门氏菌生长曲线图。图分析可知为沙门氏菌的对数生长期,本实验选择可选为沙门氏菌的培养时间,从而进行下步的试验。沙门氏菌单增李斯特菌的鉴别方法研究沙门氏菌全细胞细胞壁细胞质的光谱图由得到不同浓度的沙门氏菌全细胞细胞壁和细胞质的近红外光谱叠加图如图图图所示。第章结果与分析图沙门氏菌全细胞的原始光谱图沙门氏菌细胞壁的原始光谱图沙门氏菌细胞质的原始光谱作量。有研究表明,当分辨率大于时,部分样品信息损失,较低的分辨率可以保证信噪比,综上本试验设分辨率为。扫描次数扫描次数是在次测量过程中对光谱的累加,累加后的光谱除以扫描次数即为每个样本的平均光谱。由于噪音在测量过程中是随机第章材料与方法变化的,随着累加次数的增加,噪音相互抵消,影响变小,本实验设扫描次数为次......”

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