1、“.....不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是。解析分子经限制酶切割产生的片段末端通常有两种黏性末端和平末端。为了保证目的基因与运载体相连，用另种限制酶切割后形成的黏性末端必须与Ⅰ切割形成的黏性末端相同。连接酶有大肠杆菌连接酶和连接酶两类。逆转录的模板是，产物是。大量扩增逆转录产物常采用技术。在基因工程中使用的运载体除质粒外，还有噬菌体动植物病毒等。经处理后处于感受态的大肠杆菌才易吸收周围环境中的分子。答案黏性末端平末端切割产生的片段末端与Ⅰ切割产生的相同大肠杆菌或或噬菌体动植物病毒未处理的大肠杆菌吸收质粒外源的能力极弱江苏高考如图表示含有目的基因的片段长度即碱基对和部分碱基序列，图表示种质粒的结构和部分碱基序列。现有ⅠⅠⅠⅠ种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为。请回答下列问题图的条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由连接。若用限制酶Ⅰ完全切割图中片段，产生的末端是末端，其产物长度为。若图中虚线方框内的碱基对被碱基对替换，那么基因就突变为基因......”。

2、“.....用限制酶Ⅰ完全切割，产物中共有种不同长度的片段。若将图中质粒和目的基因通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，般需要用添加的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因不能正确表达，其最可能的原因是。解析条脱氧核苷酸链中相邻的两个碱基之间是通过“脱氧核糖磷酸脱氧核糖”相连的。从Ⅰ的识别序列和酶切位点可知，其切割后产生的是平末端，图中片段有两个Ⅰ的识别序列，故切割后产生的产物长度为和的三个片段。图示方框内发生碱基对的替换后，形成的基因失去了个Ⅰ的识别序列，故基因基因用Ⅰ完全切割所得产物中除原有基因切割后的种长度的片段外，还增加种基因被切割后出现的长度为的片段。目的基因的两端都有Ⅰ的识别序列，质粒的启动子后面抗生素抗性基因上也有Ⅰ的识别序列，故应选用的限制酶是Ⅰ，此时将抗生素抗性基因作为标记基因，故筛选时培养基中要添加抗生素。经过同种限制酶切割后会产生相同的末端......”。

3、“.....答案脱氧核糖磷酸脱氧核糖平Ⅰ抗生素同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因与质粒反向连接限制酶选择的注意事项根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择Ⅰ。不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择Ⅰ。为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，可使用两种不同的限制酶分别切割目的基因和质粒，如图甲可选择用Ⅰ和Ⅰ两种限制酶但要确保质粒上也有这两种限制酶的切点。根据质粒的特点确定限制酶的种类所选限制酶要与切割目的基因的限制酶致，以确保具有相同的黏性末端。插入的目的基因的表达需要调控序列，用作载体的质粒的插入基因部位之前需有启动子，之后需有终止子，所以所选限制酶的切点应该“前有启动子，后有终止子”。质粒作为载体必须具备标记基因启动子和终止子等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶Ⅰ会破坏标记基因如果所选限制酶的切点不是个，则切割重组后可能丢失些片段，若丢失的片段含复制起点区......”。

4、“.....即在田间试验中检测植株的耐旱性是否得到提高。用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱和不耐旱植株的数量比为∶，符合基因的分离定律，可知得到的二倍体转基因耐旱植株为杂合子，因此可推测该耐旱基因整合到了同源染色体的条上。答案全部部分筛选乙表达产物耐旱性同源染色体的条上天津高考节选嗜热土壤芽孢杆菌产生的葡萄糖苷酶是种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了利用大肠杆菌表达酶的实验。扩增基因时，选用基因组作模板。如图为质粒限制酶酶切图谱。基因不含图中限制酶识别序列。为使扩增的基因重组进该质粒，扩增的基因两端需分别引入和不同限制酶的识别序列。大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述构建好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为。解析酶是嗜热土壤芽孢杆菌产生的种耐热纤维素酶，因此在该菌体内存在相应的基因，利用扩增基因时，应选用嗜热土壤芽孢杆菌的基因组作模板。要使目的基因插入在启动子和终止子之间......”。

5、“.....只能选用Ⅰ和Ⅰ限制酶切割质粒和目的基因，因此在扩增的基因的两端需分别引入Ⅰ和Ⅰ限制酶的识别序列。基因能够编码酶种纤维素酶，酶能分解纤维素。大肠杆菌不能降解纤维素，但转入基因的大肠杆菌能分泌有活性的酶，获得了降解纤维素的能力。答案嗜热土壤芽孢杆菌ⅠⅠ转基因的大肠杆菌分泌出有活性的酶天津高考稍改动生物分子间特异性结合的性质广泛用于生命科学研究。以下实例为体外处理“蛋白质复合体”获得片段信息的过程图。据图回答过程酶作用的部位是键，此过程只发生在非结合区。过程酶作用的部位是键。两过程利用了酶的特性。若将得到的片段用于构建重组质粒，需要将过程的测序结果与酶的识别序列进行比对，以确定选用何种酶。如果复合体中的蛋白质为聚合酶，则其识别结合的序列区为基因的。解析连接片段的化学键是磷酸二酯键氨基酸通过肽键连接形成肽链。酶催化的水解，蛋白酶催化蛋白质的水解，这体现了酶的专性。目的基因上应该具有限制酶的识别序列。聚合酶和基因上的启动子发生特异性结合，启动并进行转录过程......”。

6、“.....乙种昆虫食用种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡。因此，可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内，使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力。回答下列问题为了获得丙种蛋白质的基因，在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上，推测出丙种蛋白质的序列，据此可利用方法合成目的基因。获得丙中蛋白质的基因还可用方法。在利用上述丙种蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中，常需使用酶和酶。将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共同培养，筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织，由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗的危害。若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，则该植株的种子选填“含有”或“不含”丙种蛋白质的基因。解析在已知蛋白质的氨基酸序列的情况下，可根据氨基酸和碱基的对应关系，推出合成该蛋白质的基因序列，然后用合成仪通过化学方法来合成目的基因。此外也可以通过从基因文库中和技术这两种方法获取目的基因。构建重组质粒时......”。

7、“.....并用连接酶将目的基因连接到载体上，从而构建基因表达载体。愈伤组织中含有丙种蛋白质，说明丙种蛋白质的基因在甲种农作物体内得到了表达，而乙种昆虫食用丙种蛋白质后会死亡，故该植株可抵抗乙种昆虫的危害。用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，仅仅在该叶片内部分细胞中能合成丙种蛋白质，该植株的种子和其他的营养器官均不含有重组质粒，也就不含有丙种蛋白质的基因。答案基因化学基因文库合理即可限制连接乙种昆虫不含选修现代生物科技专题考纲考频基因工程的诞生Ⅰ年考基因工程的原理及技术Ⅱ年考基因工程的应用Ⅱ年考蛋白质工程Ⅰ年考限制性核酸内切酶来源主要从生物中分离纯化而来。作用识别特定的并切开相应两个核苷酸之间的。结果产生或平末端......”。

8、“.....动植物病毒限制性核酸内切酶识别序列的特点呈现碱基互补对称，无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到条中心轴线，如图，中轴线两侧的双链上的碱基是反向对称重复排列的。如以中心线为轴，两侧碱基互补对称以为轴，两侧碱基互补对称。切割后产生末端的种类黏性末端和平末端。当限制酶在它识别序列的中轴线两侧将的两条链分别切开时，产生的是黏性末端，而当限制酶在它识别序列的中轴线处切开时，产生的是平末端。限制酶与连接酶的关系限制酶和连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。限制酶不切割自身的原因原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。连接酶起作用时不需要模板。作为载体的条件条件适应性稳定并能复制目的基因稳定存在且数量可扩大有个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因具有特殊的标记基因便于重组的鉴定和选择限制酶是类酶，而不是种酶。限制酶的成分为蛋白质，其作用的发挥需要适宜的理化条件，高温强酸或强碱均易使之变性失活。在切割目的基因和载体时要求用同种限制酶......”。

9、“.....将个基因从分子上切割下来，需要切两处，同时产生个黏性末端。不同分子用同种限制酶切割产生的黏性末端都相同，同个分子用不同的限制酶切割，产生的黏性末端般不相同。限制酶切割位点应位于标记基因之外，不能破坏标记基因，以便进行检测。基因工程中的载体与细胞膜上物质运输的载体不同。基因工程中的载体是分子，能将目的基因导入受体细胞内膜载体是蛋白质，与细胞膜的通透性有关。基因工程中有种工具，但工具酶只有种。角度以基础判断的形式，考查对基本工具的理解判断正误江苏卷切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别个核苷酸序列。江苏卷载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因。四川卷将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传。浙江卷利用聚合酶将控制蓝色色素合成的基因与质粒连接后导入玫瑰细胞。浙江卷每个重组质粒至少含个限制性核酸内切酶识别位点。浙江卷用限制性核酸内切酶可以切割烟草花叶病毒的核酸......”。