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高中生物专题5课题3血红蛋白的提取与分离课件新人教版选修1 高中生物专题5课题3血红蛋白的提取与分离课件新人教版选修1

格式:PPT 上传:2022-06-24 20:09:24

《高中生物专题5课题3血红蛋白的提取与分离课件新人教版选修1》修改意见稿

1、“.....纯度鉴定在鉴定的方法中,使用最多的是。聚丙烯酰胺凝胶电泳五操作提示红细胞的洗涤与十分重要。洗涤次数过少,无法除去离心速度和时间会使等同沉淀,达不到分离效果。色谱柱填料的处理商品凝胶使用前需直接放在中膨胀,可以将加入其中的湿凝胶用,加速膨胀。凝胶色谱柱的装填在装填凝胶柱时,不能有存在。因其能搅乱洗脱液中蛋白质的,降低分离效果。蛋白质的分离如果,说明色谱柱制作成功。洗涤次数离心速度离心时间血浆蛋白过高过长白细胞洗脱液沸水浴加热气泡洗脱次序红色区带均匀致地移动红细胞破碎后混合液中含有什么成分红细胞破碎混合液中不仅含有血红蛋白,而且还含有细胞破碎物脂质甲苯等。教材“旁栏思考题”凝胶实际上是些微小的多孔球体,小球体内部有许多贯穿的通道。相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部,只能分布在颗粒之间,通过的路程较短,移动速度较快相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进入凝胶内的通道,通过的路程较长,移动速度较慢。因此......”

2、“.....相对分子质量中等的分子后流出,相对分子质量最小的分子最后流出,从而使各种相对分子质量不同的分子得以分离。如果凝胶装填得不够紧密均匀,就会在色谱柱内形成无效的空隙,使本该进入凝胶内部的样品分子从这些空隙中通过,搅乱洗脱液的流动次序,从而影响分离的效果。课堂合作探究依据蛋白质的特性的差异蛋白质的理化性质如形状大小电荷性质和多少溶解度吸附性质亲和力等千差万别,由此可提取和分离各种蛋白质。血红蛋白提取和分离的方法二蛋白质的分离方法凝胶色谱法概念凝胶色谱法也称做分配色谱法,是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法。原理大多数凝胶由糖类化合物构成的小球体,内部有许多贯穿的通道,当不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长移动速度较慢而相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。三缓冲溶液作用在定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液的影响......”

3、“.....配制通常由种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同范围内使用的缓冲液。四电泳概念带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。原理许多重要的生物大分子,如多肽核酸等都具有可解离的基团,在定下,这些基团会带上正电或负电。在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离。电泳利用了除哪些性质外使样品中各种分子分离带电性质差异分子的大小分子的形状分子的变性温度解析电泳是指带电粒子在电场作用下发生迁移的过程,带电性质不同分子的大小和形状不同都会影响带电粒子在电场中的迁移速度。答案利用凝胶色谱法,什么样的蛋白质先洗脱出来相对分子质量大的溶解度高的相对分子质量小的所带电荷多的答案解析等千差万别,由此可提取和分离各种蛋白质......”

4、“.....是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法。原理大多数凝胶由糖类化合物构成的小球体,内部有许多贯穿的通道,当不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长移动速度较慢而相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。三缓冲溶液作用在定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液的影响,维持基本不变。配制通常由种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同范围内使用的缓冲液。四电泳概念带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。原理许多重要的生物大分子,如多肽核酸等都具有可解离的基团,在定下,这些基团会带上正电或负电。在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离......”

5、“.....带电性质不同分子的大小和形状不同都会影响带电粒子在电场中的迁移速度。答案利用凝胶色谱法,什么样的蛋白质先洗脱出来相对分子质量大的溶解度高的相对分子质量小的所带电荷多的答案解析凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道,路程较长,移动速度较慢相对分子质量大的蛋白质,路程较短,移动速度较快,首先洗脱出来。蛋白质的提取和分离般分为四步样品处理粗分离纯化和纯度鉴定。提取和分离血红蛋白的实验操作样品处理的过程红细胞洗涤目的去除杂蛋白方法低速短时间离心血红蛋白释放将洗涤好的红细胞倒入烧杯中,加蒸馏水到原血液的体积,再加体积的甲苯置于磁力搅拌器上充分搅拌分离血红蛋白溶液第层无色透明的甲苯层第二层脂溶性物质的沉淀层,白色薄层固体第三层血红蛋白的水溶液......”

6、“.....透析取的血红蛋白溶液装入透析袋中,将透析袋放入盛有的物质的量浓度为的磷酸缓冲液中为,透析。二凝胶色谱操作的主要步骤纯度鉴定聚丙烯酰胺凝胶电泳判断纯化的蛋白质是否达到要求,需要进行蛋白质纯度的鉴定。鉴定的方法中,使用最多的是聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果分析与评价项目分析血液样品的处理分层明显样品处理完成凝胶色谱柱的装填放支与凝胶柱垂直的日光灯直接检查凝胶是否装填得均匀加入大分子有色物质如蓝色葡聚糖或红色葡聚糖,若色带均匀狭窄平整装填成功血红蛋白的分离血红蛋白的红色区带均匀狭窄平整,随洗脱液缓慢流出分离成功血红蛋白的红色区带歪曲散乱变宽分离效果不好,可能与凝胶色谱柱的装填有关蛋白质提取和分离分为哪几步样品处理凝胶色谱操作聚丙烯酰胺凝胶电泳样品处理凝胶色谱操作纯化样品处理粗分离纯化纯度鉴定样品处理纯化粗分离纯度鉴定解析蛋白质的提取和分离分为样品处理粗分离纯化纯度鉴定四步......”

7、“.....答案相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程,可表示为下图中哪个答案解析本题考查对凝胶色谱法分离蛋白质原理的理解,蛋白质相对分子质量越大,越容易通过凝胶间隙而先被洗脱,蛋白质相对分子质量越小则易进入凝胶内部而后被洗脱。思维创新升华蛋白质分子在凝胶中的运动情况分析特别提示凝胶色谱的原理是相对分子质量小的蛋白质进入凝胶孔道,路程长,移动速度慢而相对分子质量大的蛋白质在凝胶外部移动,路程短,移动快,这种现象又称分子筛效应。相对分子质量大相对分子质量小直径大小大于凝胶颗粒空隙直径小于凝胶颗粒空隙直径运动方式垂直向下运动无规则的扩散运动运动速度较快较慢运动路程较短较长洗脱次序先从凝胶柱中洗脱出来后从凝胶柱中洗脱出来二样品处理分离与纯化的目的不同目的红细胞洗涤去除杂质,如血浆蛋白血红蛋白释放使红细胞破裂......”

8、“.....重点理解凝胶色谱法电泳法等分离生物大分子的基本原理。重难点尝试对血液中的血红蛋白进行提取和分离。凝胶色谱法概念也称做,是根据分离蛋白质的有效方法。原理当不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程,移动速度,而相对分子质量的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在移动,路程,移动速度,从而使不同的蛋白质分子得以分离。分配色谱法相对分子质量大小相对分子质量较小较大较慢较大凝胶外部短快相对分子质量二缓冲溶液作用在定范围内,抵制的对溶液的影响,维持。配制由种缓冲剂溶解于中配制而成,通过调节缓冲剂的就可以得到不同范围内使用的缓冲液......”

9、“.....原理在定的下,等生物大分子的可解离基团会带上或,在的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷的电极移动。带电粒子迁移多肽核酸正电负电电场相反作用电泳利用了待分离样品中各种分子的差异及分子本身的的不同,使带电分子产生不同的,从而实现样品中的分离。方法常用的电泳方法有和。测定蛋白质分子量时通常使用。带电性质大小形状迁移速度各种分子琼脂糖凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胺电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳四实验操作蛋白质的提取和分离般分为四步和。样品处理红细胞的洗涤目的是。采用离心,吸取血浆后加洗涤,直至上清液中没有,表明红细胞已洗涤干净。血红蛋白的释放在和的作用下,红细胞破裂,释放出血红蛋白。样品处理粗分离纯化纯度鉴定去除杂蛋白低速短时间生理盐水黄色蒸馏水甲苯分离血红蛋白溶液把混合液离心后,将试管中的液体用滤纸过滤,除去,于分液漏斗中静置片刻后,分离出下层的。透析透析袋能使小分子自由进出,而将大分子物质保留在袋内......”

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