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高中生物专题5课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段课件新人教版选修1 高中生物专题5课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段课件新人教版选修1

格式:PPT 上传:2022-06-24 20:09:24

《高中生物专题5课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段课件新人教版选修1》修改意见稿

1、“.....另条链不连续合成分别从两条链的引物端开始,都是连续合成,控制温度体内复制反应不同点特点边解旋边复制,半保留复制体外迅速扩增聚合酶不需要需要循环次数受生物体自身控制多次温度体内温和条件高温可变相同点需提供复制的模板四种脱氧核苷酸为原料都需要定的缓冲溶液子链延伸的方向都是从端到端二的反应过程变性当温度上升到以上时,双链解聚为单链。复性温度下降到左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链结合。延伸温度上升到左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的链。般要经历三十多次循环,每次循环可以分为变性复性和延伸三步。从第二轮循环开始,上次循环的产物也作为模板参与反应,并且由引物Ⅰ延伸而成的单链会与引物Ⅱ结合......”

2、“.....这样聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的序列,使这段固定长度的序列呈指数扩增。如下图所示过程与细胞内复制过程相比,主要有两点不同,它们是过程需要的引物是人工合成的单链或过程不需要聚合酶过程中,的解旋不依靠解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的过程中,不需要解旋,直接以双链为模板进行复制解析过程与细胞内的复制过程相比较,主要有两点不同过程需要的引物是人工合成的单链或,长度通常为个核苷酸。过程中,解旋不依靠解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的。答案为答案下列操作过程的叙述中错误的是反应中使用的微量离心管枪头缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌所用的缓冲液和酶应分装成小份,并在储存所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后......”

3、“.....每吸取种试剂后,移液器上的吸液枪头都必须更换答案解析为了防止外源等因素的污染,反应中所用的微量离心管枪头缓冲液及蒸馏水等,在使用前要进行高压灭菌还要将所用的缓冲液和酶分装成小份并且使用次性吸液枪头,故项都正确。在使用前,将所需试剂从冰箱内拿出来,放在冰块上缓慢融化,则项错误。答案为。要将所用的缓冲液和酶分装成小份并且使用次性吸液枪头,故项都正确。在使用前,将所需试剂从冰箱内拿出来,放在冰块上缓慢融化,则项错误。答案为。理论上呈指数方式扩增。若开始只有个提供模板,则循环次后有个若开始有个提供模板,则循环次后获得的子代数目为个。含量的测定在的紫外线波段有强烈的吸收峰,峰值的大小与含量有关......”

4、“.....具体方法如下扩增的计算与含量的测定温馨提示扩增过程中的易错点过程中无解旋酶,破坏氢键需要升高温度才能打开氢键,但此时的温度还不能破坏磷酸二酯键,因此,热变性后是单链,并未分解成单体。复性时只是在引物和单链之间形成氢键,两条单链之间并未形成氢键,因此复性后,无双链分子形成。多聚酶链式反应是种体外迅速扩增片段的技术。请回答下列问题的两条链是反向平行的,通常将的末端称为端,当引物与母链通过碱基互补配对结合后,聚合酶就能从引物的开始延伸链。利用了的热变性原理解决了打开双链的问题,但又导致了聚合酶失活的问题。到世纪年代,科学家从种细菌中分离到,它的发现和应用解决了上述问题要将细菌从其他普通的微生物中分离出来,所用的培养基叫......”

5、“.....假设在反应中,只有个片段作为模板,请计算在次循环后,反应物中大约有个这样的片段。简述技术的主要应用。要求项以上。解析聚合酶作用时必须要有个引物,它只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的羟基上,与母链结合的引物就提供这个羟基。因利用了的热变性原理解决了打开双链的问题,所以用于催化复制过程的聚合酶要具有耐高温的特性。用选择培养基可将细菌从其他普通的微生物中分离出来。复制的两条链均作为模板,进行半保留复制,所以复制次后得到的子代分子数为个。技术可以对分子进行扩增,所以可用于遗传疾病的诊断刑侦破案古生物学基因克隆和序列测定等方面......”

6、“.....这三大步需要的温度依次是答案解析当温度上升到以上时,双链解聚为单链,称之为变性当温度下降到左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链结合当温度上升到时,溶液中的四种脱氧核苷酸在聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的链,称为延伸。思维创新升华实验操作的注意事项所用的缓冲液实验前应分装成小份,并在储存。使用前,将缓冲液从冰箱中取出,放在冰块上缓慢融化,备用。所用的缓冲液配制定要严格,或者直接购买专用扩增缓冲液。为避免外源等因素的污染,实验中使用的微量离心管吸液枪头缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌。在微量离心管中添加反应成分时,每吸取种试剂后,移液器上的枪头必须更换。实验中应注意各种反应成分的用量......”

7、“.....均有可能导致片段扩增的失败。扩增的是位于两种引物之间的片段,合理设计引物是成功的关键。特别提示扩增过程中要进行无菌操作,避免污染。在操作中离心约,目的是使反应液集中在离心管底部,提高反应效果。知识体系构建答案变性复性延伸呈指数扩增成才之路生物路漫漫其修远兮吾将上下而求索人教版选修和蛋白质技术专题五课题多聚酶链式反应扩增片段专题五课堂合作探究思维创新升华知识体系构建课时作业课前预习导学课前预习导学理解的原理和反应过程。重难点尝试技术的基本操作。说出技术的应用。扩增的原理及条件概念即,是种迅速的技术。它能以极少量的为模板,在短时间内复制出上百万份的。体外扩增多聚酶链式反应拷贝原理的热变性在的温度范围内......”

8、“.....分开,这个过程称为。当温度缓慢后,两条彼此的链又会重新结合成。子链的合成需要合成方向总是从子链的。双螺旋结构双链变性降低分离双链聚合酶端到端条件模板。分别与模板相结合的两种。四种。聚合酶。需要稳定的和能严格控制的温控设备。引物脱氧核苷酸耐热的缓冲液温度二反应过程般要经历三十多次循环,每次循环可以分为和三步。从第二轮循环开始,上次循环的产物也作为模板参与反应,并且由引物Ⅰ延伸而成的单链会与结合,进行的延伸,这样,聚合酶只能特异地复制处于之间的序列,使这段固定长度的序列呈扩增。变性复性延伸引物Ⅱ两个引物指数分子能准确复制的原因是什么分子独特的双螺旋结构为复制提供了精确的模板,通过碱基互补配对,保证了复制能够准确地进行......”

9、“.....细胞提供能量,部分解开加热至左右,双链全部解开,不需要解旋酶引物小段可以是或单链分子片段合成子链在引物基础上,条链连续合成,另条链不连续合成分别从两条链的引物端开始,都是连续合成,控制温度体内复制反应不同点特点边解旋边复制,半保留复制体外迅速扩增聚合酶不需要需要循环次数受生物体自身控制多次温度体内温和条件高温可变相同点需提供复制的模板四种脱氧核苷酸为原料都需要定的缓冲溶液子链延伸的方向都是从端到端二的反应过程变性当温度上升到以上时,双链解聚为单链。复性温度下降到左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链结合。延伸温度上升到左右......”

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