1、“.....损伤检测点是调控损伤的重要关卡。目的通过慢病毒干扰技术敲减大鼠骨髓内皮祖细胞中的基因，探讨其在内皮祖细胞衰老进程中的作用。方法将大鼠骨髓源内皮祖细胞进行分离培养并鉴中的培养基，使用多聚甲醛固定，清洗次，放于滤纸上风干，在小室中加入结晶紫染色，洗次，于镜下随机选取个视野，将迁移至小室外层的细胞进行计数，取其平均值。成血管实验检测各组内皮祖细胞成管功能根据体外血管生成试剂盒说明书操作，稀释液和胶液同时臵于环境过夜融化，次日将稀释液加入胶液中，将者混匀，以每孔快速加入孔板中，勿产生气泡，将其放于培养箱，后基质胶凝固，将转染至第，天的各组内皮祖细胞计数后以个孔的量接种于胶上，环境孵育，于镜下随机取个视野进行观察，将长度为宽度倍以上的细胞进行计数，得出平均值。流式细胞术检测细胞周期将转染至第，天的各组内皮祖细胞用胰酶消化后，以化。与第天比较......”。

2、“.....处于期的细胞百分率显著降低，组则无显著变化，见图。讨论血管内皮损伤会影响血管屏障功能血管舒张反应的调节功能及分泌功能等，因此，维护血管内皮的完整性对防治心脑血管疾病具有重要意义，。由于成熟的内皮细胞其增殖能力较低，又属于终末分化细胞，替代损伤内皮能力有限，而内皮祖细胞则可通过旁分泌和自分泌些细胞因子，促进血管再生抑制内膜过度增生研究发现移植体外培养的内皮祖细胞能够在缺血区聚集并参与心肌血管新生，维持心脏血管功能。近年来利用内皮祖细胞治疗缺血性心血管疾病已成为再生医学研究的热点之，但是内皮祖细胞在体内数量较少，需通过体外扩增才能满足移植需求同时由于缺血性疾病多在敲减基因对大鼠骨髓内皮祖细胞衰老及其功能的影响细胞学论文的各组内皮祖细胞用胰酶消化后，重悬计数，每孔细胞悬液加入的上室，在下室中加入含血管内皮生长因子的培养基，于培养箱中培养......”。

3、“.....使用多聚甲醛固定，清洗次，放于滤纸上风干，在小室中加入结晶紫染色，洗次，于镜下随机选取个视野，将迁移至小室外层的细胞进行计数，取其平均值。成血管实验检测各组内皮祖细胞成管功能根据体外血管生成试剂盒说明书操作，稀释液和胶液同时臵于环境过夜融化，次日将稀释液加入胶液中，将者混匀，以每孔快速加入孔板中，勿产生气泡，将其放于培养箱，后基质胶凝固，将转染至第，天的各组内皮祖细胞计数后以个孔的量接基因的表达，进步探讨基因在内皮祖细胞衰老进程中的作用，以期为临床内皮祖细胞移植提供些新思路。流式细胞术检测细胞周期将转染至第，天的各组内皮祖细胞用胰酶消化后，以的细胞浓度加入提前预冷的体积分数为乙醇中，者混合后固定，离心，用预冷的进行重悬，再次离心，弃上清，余，轻弹管底部以免细胞成团，再用碘化丙啶染色液在环境中孵育，注意避光，于激发波长处检测红色荧光，内完成检测......”。

4、“.....采用统计软件进行分析，方差齐性条件下，采用单因素方差分析，两两比较采用检验，为差异有显著性意义。结果大鼠骨髓源内皮祖细胞的生长特性及鉴定结果提取的大鼠骨髓源单个核细胞在分离之初时呈小圆形，在培养液中呈悬浮胞的衰老进程，同时增强内皮祖细胞的功能，减轻细胞周期的停滞。关键词与相关蛋白激酶内皮祖细胞慢病毒转染细胞功能细胞周期细胞衰老骨髓内皮祖细胞是类能够进行自我更新，具有游走特性并能增殖分化为内皮细胞的定向干细胞。等通过免疫磁珠细胞分选法于年首次从人外周血成功分离培养出内皮祖细胞后，越来越多的研究表明，内皮祖细胞在骨髓中占比丰富，且增殖活力强在缺血缺氧炎症等病理或生理性因素影响下，内皮祖细胞可通过血液循环定向迁移至受损血管与缺血组织，从而对血管内膜进行修复。随着对内皮祖细胞研究的不断深入......”。

5、“.....自体细胞移植可有效避免免疫排斥反应，也不存在伦理学方摘要背景内皮祖细胞在血管内皮更新及修复中发挥重要作用，利用体外扩增的自体内皮祖细胞移植促进缺血部位血管新生，现已成为防治缺血性心血管疾病的新策略，但取自老年机体的内皮祖细胞在体外扩增中会出现细胞衰老迹象，难以发挥修复能力，研究表明损伤与细胞衰老关系密切，损伤检测点是调控损伤的重要关卡。目的通过慢病毒干扰技术敲减大鼠骨髓内皮祖细胞中的基因，探讨其在内皮祖细胞衰老进程中的作用。方法将大鼠骨髓源内皮祖细胞进行分离培养并鉴定，将分离出的内皮祖细胞继续培养至第代，随机分为组未转染组空白组阴性对照组基因敲减组组。未转染组正常培养，阴性对照组基因敲减组分别予以慢病毒及慢病毒稳定转染至第，天，通过胞损伤修复促进细胞存活，抑制可诱导通路依赖型恶性肿瘤细胞死亡，但对正常细胞繁殖和生长影响较小。因此......”。

6、“.....是个值得期待和关注的靶点。该研究在干细胞衰老领域探讨了损伤检测点基因对内皮祖细胞衰老的干预作用，可为临床内皮祖细胞移植提供些新思路，但由于实验的局限性，只进行了体外实验，并未通过体内实验进行验证，探索还未十分深入和广泛，尚待后续研究。参考文献秦臻，韦正新，宰青青，等黄精降低活性氧水平促进衰老内皮祖细胞功能的研究中国药理学通报，朱光旭，黄岚，武晓静，等不同年龄段大鼠血清影响内皮祖细胞向成熟内皮诱导分化中国动脉硬化杂志，秦臻，韦正新，许键炜黄精对衰老大鼠内皮祖细胞损伤检测点通路的购自碧云天公司小室批号购自公司多聚甲醛溶液批号购自公司体外血管生成试剂盒购自公司细胞周期检测试剂盒购自碧云天公司。实时荧光定量仪购自德国公司高速离心机购自美国公司荧光显微镜购自日本公司倒臵显微镜购自日本公司流式细胞仪购自美国公司酶标仪购自美国公司培养箱购自美国公司......”。

7、“.....采用脱颈法处死大鼠，在无菌环境下解剖取出双侧胫骨股骨，浸泡于体积分数为乙醇中消毒，用注射器吸取冲洗髓腔，并运用目细胞筛将悬液祖细胞向成熟内皮诱导分化中国动脉硬化杂志，秦臻，韦正新，许键炜黄精对衰老大鼠内皮祖细胞损伤检测点通路的影响中药新药与临床药理，李丽玲，计晓娟，余更生，等种新来源的内皮祖细胞提取分离方法免疫学杂志，罗伟，李翔翮，杨先腾，等小鼠骨髓源性内皮祖细胞的分离培养与鉴定中华创伤骨科杂志，秦臻，黄水清当归补血汤含药血清对内皮祖细胞功能及其通路影响的研究中国药理学通报，胡洁，陈庆伟，贺无恙增龄与动脉粥样硬化性心血管疾病临床类型的相关性分析临床心血管病杂志，饶璇，李元建内皮细胞损伤与修复的研究进展中国动脉硬化杂志，宰青青，秦臻叶兰黄精对自然衰老大鼠内皮祖细胞功能及端粒酶活性的影响中国中西医结合杂志，李文瑞，刘新光，周中军表达逐渐增高......”。

8、“.....但对内皮祖细胞衰老的影响尚不明确，为此，该研究首先分离培养衰老大鼠骨髓中内皮祖细胞并进行鉴定，再利用慢病毒干扰细胞中基因的表达，进步探讨基因在内皮祖细胞衰老进程中的作用，以期为临床内皮祖细胞移植提供些新思路。敲减基因对大鼠骨髓内皮祖细胞衰老及其功能的影响细胞学论文。该研究通过慢病毒转染使内皮祖细胞中的表达下调，转染第，天通过半乳糖苷酶染色法实验成血管实验流式细胞术检测表明基因在内皮祖细胞衰老中同样发挥了重要作用，敲减基因能减轻细胞周期停滞，延缓内皮祖细胞的衰老，增强内皮祖细胞的功能，这提示延缓内皮祖细敲减基因对大鼠骨髓内皮祖细胞衰老及其功能的影响细胞学论文响中药新药与临床药理，李丽玲，计晓娟，余更生，等种新来源的内皮祖细胞提取分离方法免疫学杂志，罗伟，李翔翮，杨先腾......”。

9、“.....秦臻，黄水清当归补血汤含药血清对内皮祖细胞功能及其通路影响的研究中国药理学通报，胡洁，陈庆伟，贺无恙增龄与动脉粥样硬化性心血管疾病临床类型的相关性分析临床心血管病杂志，饶璇，李元建内皮细胞损伤与修复的研究进展中国动脉硬化杂志，宰青青，秦臻叶兰黄精对自然衰老大鼠内皮祖细胞功能及端粒酶活性的影响中国中西医结合杂志，李文瑞，刘新光，周中军损伤与细胞衰老关系的研究进展国际检验医学杂志，乔田奎，陈伟，袁素娟蛋白激酶依赖性信号转导通路研究进展复旦学报医学版去含病毒的培养液，重新加入全培养基，继续培养至第，天通过荧光显微镜观察慢病毒载体中的绿色荧光蛋白，根据细胞中绿色荧光蛋白的表达情况以判定转染效率，转染效率荧光阳性细胞数筛选细胞总数。敲减基因对大鼠骨髓内皮祖细胞衰老及其功能的影响细胞学论文。该研究通过慢病毒转染使内皮祖细胞中的表达下调，转染第......”。