1、“.....以不同组中感染后第天∆∆分别接种只日龄鸡,臵于无菌隔离罩中饲养动物实验编号病毒感染后第,和天分别取只鸡因鸡脾脏中含有病毒感染的成熟细胞和细胞而病毒的再次激活复制的部位主要发生在羽毛嚢上皮细胞因此本研究分别分离脾脏组织和采集鸡羽毛嚢,提取脾脏组织和羽毛嚢上皮细胞,用方法分析病毒的拷贝数ⅳ方法测定病毒拷贝数利用苯酚氯仿法从鸡脾脏组织细胞或者羽毛嚢上皮细胞中提取方法对样品中的基因组拷贝数进行定量分析所用引物分别为荧光定量的方法检测病毒在脾脏和羽毛嚢中的拷贝数情况为探讨与参与的致病及免疫机制提供理论依据材料与方法ⅰ质粒与病毒本实验用的质粒载体为基因重组病毒∆,∆和∆∆的构建来自于原始毒株......”。
2、“.....末端的结合域和亮氨酸拉链区域与宿主原癌蛋白高度相似既可自身形成同源聚合物,又能与结合形成异源聚合物,两者在引起的肿瘤细胞转化过程中均发挥重要作用基因缺失毒株完全失去了致肿瘤性且具有良好的免疫保护力,但仍然会导致感染鸡体产生严重的免疫抑制,限制了其成为商品化的疫苗前期研究表明,通过敲除病毒早期复制相关基因,可以克服基因缺失引起的免疫器官萎缩的弊端,同时仍具备良好的免疫保护力未发表数据作为更有效的疫苗,而利用传统方法研发有效疫苗已经遇到了瓶颈随着分子生物学技术的发展,利用细菌人工染色体或者系统,对基因组进行编辑可研发新型基因重组疫苗系统是微生物抵抗病毒及外源遗传因素入侵的天然免疫机制......”。
3、“.....包括介导的核酸内切酶来源于链脓球菌单链引导和反式作用利用在基因组中插入了编码的基因构建成,基因序列随着病毒的增殖传代而保持遗传的稳定性作为外源基因的插入也没有改变病毒的体外复制特性因此力导致易感鸡群在短时期内的死亡,是影响世界养禽业的重要病毒之感染造成世界养禽业每年约亿美元的经济损失根据血清型,可分成类第类包括高度致肿瘤性的及其衍生物第类和第类是自然分离的无致病性和火鸡疱疹病毒,种血清型均可用来制备疫苗以预防控制的发生常用疫苗包括体外细胞传代致弱疫苗例如,温和型致肿瘤病毒株,经体外细胞传代致弱后,虽然在鸡体内复制及横向传播能力差,但在鸡胚成纤维细胞中具有良好的增殖能力......”。
4、“.....应用实时荧光定量技术对感染后第,日龄鸡脾脏中的病毒拷贝数进行检测,结果表明,双基因缺失病毒在早期溶细胞感染和潜伏感染期中的复制显著降低对感染后第日龄鸡的脾脏和羽毛囊中的病毒拷贝数进行定量分析,结果表明与双基因缺失也显著降低了病毒在肿瘤转化期和再次激显著降低,导致潜伏感染和羽毛嚢细胞再激活复制显著降低和基因同时敲除,影响病毒潜伏期的形成,导致再次激活复制的病毒量少本研究中动物实验周期为天,病毒在羽毛嚢中的复制是否随着时间的延长而增加有待于进步检测毒力强弱也是病毒在羽毛嚢复制传播的重要因素本研究所用毒株为超强毒株更高毒力毒株双基因敲除对病毒在羽毛嚢中复制能力的影响有待于进步验证结论本研究首先应用技术成功构建了病毒特异性基因与宿主细胞特异性基因的标准曲线利用技术检测与双低......”。
5、“.....和基因同时敲除毒株的感染量最低,每个脾脏组织细胞仅含有个拷贝表这些结果表明,致肿瘤基因对病毒的早期溶细胞复制影响较小,而与病毒的早期溶细胞复制相关,这些结果也与病毒感染鸡体引起的致病性相关感染后第天开始进入潜伏期复制阶段其主要特征是病毒早期溶细胞复制相关基因的表达显著降低,而与潜伏感染相关的基因表达显著升高以感染后第天分离的脾脏组织细胞为模板扩增病毒在原始毒株感染组,每个脾脏组织细胞含有个拷贝致肿瘤基因敲除毒株的感染量天脾脏细胞中的病毒基因组拷贝数所有病毒实验组中,鸡只接种的病毒量为表示没有病毒感染表示与亲本毒株相比,差异非常显著表比较感染后第天羽毛囊细胞中的病毒基因组拷贝数所有病毒实验组中,鸡只接种的病毒量为表示没有病毒感染表示与亲本毒株相比,差异非常显著讨论编码多个与致病性相关独特基因,包括磷酸化蛋白,基因作为区的个特异基因,编码的与相似性为......”。
6、“.....表这些结果表明,致肿瘤基因与潜伏期相关,而基因可能对病毒潜伏期的影响较小在羽毛嚢上皮细胞复制检测潜伏感染的淋巴细胞,或者转化的肿瘤细胞随着血液循环到羽毛嚢上皮在外界或者体内因素的刺激下,潜伏感染的病毒被激活,在羽毛嚢上皮细胞中大量增殖,产生的成熟病毒粒子散播到周围的环境中,进步感染新的宿主为了检测在羽毛嚢上皮细胞中再次激活复制的情况,以感染后第天分离的羽毛嚢上皮细胞为模板扩通过超强马立克氏病病毒探索与双基因缺失重组毒株复制能力的减弱病毒学论文因缺失重组毒株感染宿主不同阶段的组织样品中与的拷贝数之后利用标准曲线对感染宿主不同阶段的组织样品中的与拷贝数进行定量分析结果表明,与亲本毒株比较......”。
7、“.....张改平,庄国庆与双基因缺失显著降低超强马立克氏病病毒的复制能力科学通报,通过超强马立克氏病病毒探索与双基因缺失重组毒株复制能力的减弱病毒学论文期结果致的是毒株在第,和天拷贝数均比原始毒株显著降低表在体内或者体外的因素刺激下,于羽毛嚢上皮细胞再次激活复制后产生成熟的病毒粒子,并散播到外界环境中传播流行本研究检测了感染后第日龄羽毛嚢中的病毒拷贝数阴性对照组中没有检测到感染,而的阳性对照组的病毒拷贝数最高,为平均每个细胞个拷贝本研究中检测到感染组在羽毛嚢中的拷贝数是个拷贝感染组仅有个拷贝表导致双基因敲除病毒在羽毛嚢中拷贝数低的因素包括早期溶细胞感染准曲线图轴表示基因拷贝数的值轴表示值潜伏期复制检测感染后第天开始进入潜伏期复制阶段,其主要特征是病毒早期溶细胞复制相关基因的表达显著降低......”。
8、“.....以感染后第天分离的脾脏组织细胞为模板扩增病毒,阴性对照组没有检测到病毒,而在原始毒株感染组,每个脾脏组织细胞含有个拷贝致肿瘤基因敲除毒株的感染量为每个脾脏组织细胞含有个拷贝基因敲除毒株的感染量为每个脾脏组织细胞含有个拷贝和基因同时敲除毒株的感为每个脾脏组织细胞含有个拷贝基因敲除毒株的感染量为每个脾脏组织细胞含有个拷贝和基因同时敲除毒株的感染量株为每个脾脏组织细胞含有个拷贝表这些结果表明致肿瘤基因与潜伏期相关,而基因可能对病毒潜伏期的影响较小的早期溶细胞复制能力的降低,可能导致毒株致病力的显著降低很有意思的是,的缺失并不影响肿瘤细胞的转化在感染后第天的潜伏期,的拷贝数是早期溶细胞感染期的倍而失去转化肿瘤能力的毒株在第天拷贝数比早期溶细胞感染期降低了倍与与相似性为......”。
9、“.....缺失毒株显著降低了肿瘤发生率和致病性,并且不引起淋巴器官的萎缩,表明其在致病过程中起到重要的调控作用未发表数据同时敲除和的毒株在体外细胞培养过程中的复制与原始毒株没有差异在体内复制周期中,以感染后第天分离的脾脏组织细胞为模板扩增病毒在原始毒株感染组,病毒的拷贝数为每个脾脏组织细胞含有个拷贝致肿瘤基因敲除毒株的感染量为每个脾脏组织细胞含有个拷贝,低于,但差异不显著基因敲除毒株的感染量显著增病毒阴性对照组没有检测到病毒,而在原始毒株感染组,每个羽毛嚢上皮细胞含有个拷贝致肿瘤基因敲除毒株的感染量为每个羽毛嚢上皮细胞含有个拷贝基因敲除毒株的感染量为每个羽毛嚢上皮细胞含有个拷贝和基因同时敲除毒株的感染量株为每个羽毛嚢上皮细胞含有个拷贝,表这些结果表明,或者基因缺失显著降低了病毒在羽毛嚢上皮细胞中的增殖表比较感染后第天脾脏细胞中的病毒基因组拷贝数所有病毒实验组中......”。
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