1、“.....以。表荧光定量引物导出到实验结果两种干扰的效果检测注射后的和，提取脏神经节检测的相对表达量。结果表明，组与阴性对照组汪桂玲，陈亚，等干扰沉默角帆蚌基因对贝类矿化作用的影响基因组学与应用生物学，李颖翔，杜以帅，张琳琳，等利用干扰技术研究长牡蛎基因对基因表达的影响湖北农业科学，姜珊珊，苗晶晶，刘力铷，潘鲁青菲律宾蛤仔基因沉默对其性激素合成酶基因表达的影响中国海洋大学学报自然科学版，基金山东省自然科学基金面上项目资助。探索菲律宾蛤仔基因沉默如何影响自身性激素合成酶基因表达分子生物学论文。基因表达的分析根据，大连说明书分别提取脏神经节性腺总。每样品取总，按照，大连试剂盒说明书反转录合成，以为模版，进行实时荧光定量反应用于检测及性激素合成相关基因表达量，所用引物见表。以为内参基因，荧光定量数据分析采用表达量显著升高，在产卵后显著性下降......”。

2、“.....进而调节贝类性腺发育。本研究结果显示，当表达被抑制时，的表达均显著下降，由此我们推测在性腺发育处于休止期的菲律宾蛤仔中，基因表达可能在转录水平受到的调控。作为动物体内大多数性激素生物合成的关键酶，在睾酮生物合成中起限速酶的作用。等通过技术获得了虾夷扇贝性腺组织的全长，研究发现当扇贝性成熟出现大量生殖细胞时，的表达量最高，说明在贝类性腺发育中也可能具有重要作用。等通过体外培养大鼠睾丸间质细胞发现，可促进细胞中的表达进而促进睾酮的分泌。等研究发现蛙体内内源性大麻素通过与大麻素受体探索菲律宾蛤仔基因沉默如何影响自身性激素合成酶基因表达分子生物学论文成，。等研究表明和在虾夷扇贝的外周和性腺组织中普遍表达，并且和基因的表达与性腺成熟度有关。同时具有羟化酶和，裂解酶的两种活性......”。

3、“.....等研究许氏平鲉发现，性腺中的表达与血清中睾酮浓度密切相关。研究表明在斑点叉尾鮰和日本鳗鲡卵泡发育过程中，的含量变化极为显著，。早在年，等利用使用氚和氧化标记的前体，在紫贻贝中发现了酶活性，随后等利用同样的方法在乌贼性腺中也发现酶活性。等在虾夷扇贝性腺中克隆到了种的全长，与脊椎动物氨基酸序列相比具有较高的保守性，并且虾夷扇贝的表达水平在配素是性激素合成与性腺发育的关键神经内分泌调控因子。对硬骨鱼类的研究发现，体内注射短期内可诱导垂体合成，同时注射和多巴胺拮抗剂可促进多数种类的性腺发育成熟，。目前关于软体动物功能的研究较少等研究发现人工合成的真蛸多肽可促进离体培养的真蛸卵巢和精巢组织中孕酮睾酮和雌醇含量显著升高等采用人工合成的离体孵育虾夷扇贝的精巢，发现可促进精原细胞分裂等发现菲律宾蛤仔脏神经节基因表达在性腺发育过程中具有明显的变化规律......”。

4、“.....这些研究结果均体现了在软体动物的性腺发育与性激素合成中可能具有重要作用。脊椎动物中性激素合成关键酶及等基因在转录水平受到和的调控，论目前，作为种简单高效特异性沉默同源目标基因的敲减工具，为动物基因功能的研究提供了新的思路和方法。等体外合成了牡蛎性腺基因的干扰链，将其注射到牡蛎性腺中成功引起不育现象，首次证明双壳贝类体内注射的有效性。这项技术在日本合浦珠母贝角帆蚌栉孔扇贝等双壳贝类中也均有应用报道，。在生物体内具有定的时效性，多数研究表明持续的时间为。对甲壳动物的研究发现在南美白对虾和克氏原螯虾中，注射目的基因干扰链后即可达到有效干扰效果，。等探究栉孔扇贝基因功能时注射后表达量显著性降低。本研究结果显示，干扰链注射后显著下降，在注射后，基因的表达量开始回升见图。在实验中，处理用纯化产物，按照试剂盒说明书的方法......”。

5、“.....并用不含的消化模板。将获得的以琼脂糖凝胶电泳分析其大小和纯度，用核酸蛋白仪测定合成的浓度和值，为。表荧光定量引物导出到实验结果两种干扰的效果检测注射后的和，提取脏神经节检测的相对表达量。结果表明，组与阴性对照组相比，的表达量无显著性差异。在注射后，两个干扰组的表达量出现显著下降，其中注射组表达量干扰率为，注射组干扰效率为见图。图注射对菲律宾蛤仔脏神经节的方法，体外合成用于干扰表达的及阴性对照，并用不含的消化模板。将获得的以琼脂糖凝胶电泳分析其大小和纯度，用核酸蛋白仪测定合成的浓度和值，为。材料与方法制备采用体外合成法制备及绿色荧光蛋白的用于干扰实验。根据菲律宾蛤仔基因序列信息和引物设计原则设计了两组不同的引物，并分别在每组引物的正义链和反义链的末端添加序列见表，以蛤仔脏神经节为模板，扩增特异序列。根据绿色荧光蛋白，序列信息设计引物，用以从中扩增特异序列......”。

6、“.....随机分为组，根据基因干扰链筛选结果，参考合浦珠母贝量随配子发育而增加，在生长期和成熟期雄性性腺的表达量显著高于雌性性腺。等研究证实孔鲍中可以催化雌酮转化为雌醇，并且在成熟期性腺内表达量显著升高，在产卵后显著性下降。这些研究表明在贝类性类固醇激素的合成中发挥重要作用，进而调节贝类性腺发育。本研究结果显示，当表达被抑制时，的表达均显著下降，由此我们推测在性腺发育处于休止期的菲律宾蛤仔中，基因表达可能在转录水平受到的调控。作为动物体内大多数性激素生物合成的关键酶，在睾酮生物合成中起限速酶的作用。等通过技术获得了虾夷扇贝性腺组织的全长，研究发现当扇贝性成熟出现大量生殖细胞时，的表达量最高，说明不同性别的菲律宾蛤仔性激素合成主要性激素含量的影响，为查明在不同发育阶段和不同性别菲律宾蛤仔中的功能提供依据......”。

7、“.....主要由和等性激素合成关键酶介导完成，。等研究表明和在虾夷扇贝的外周和性腺组织中普遍表达，并且和基因的表达与性腺成熟度有关。同时具有羟化酶和，裂解酶的两种活性，参与脊椎动物中孕烯醇酮和孕酮的羟化催化羟孕酮转化为雄烯酮和羟孕烯醇酮转化为去氢表雄酮。等研究许氏平鲉发现，性腺中的表达与血清中睾酮浓度密切相关。研究表明在斑点叉尾鮰和日本鳗鲡卵泡发育过程中，的含量变化极为显著，。早在年，等利用使用氚和氧化标记的前体，在紫贻贝中发现了酶活性，随后等利用同样的方法在乌后的抑制率达，说明脏神经节中的表达被有效抑制。由此可见，本实验中对基因的干扰效果也主要受到注射浓度的影响有关，为注射的有效浓度。脊椎动物中促性腺激素释放激素是性激素合成与性腺发育的关键神经内分泌调控因子。对硬骨鱼类的研究发现，体内注射短期内可诱导垂体合成，同时注射和多巴胺拮抗剂可促进多数种类的性腺发育成熟，......”。

8、“.....发现可促进精原细胞分裂等发现菲律宾蛤仔脏神经节基因表达在性腺发育过程中具有明显的变化规律，其相对表探索菲律宾蛤仔基因沉默如何影响自身性激素合成酶基因表达分子生物学论文目的基因的浓度设定，设定空白对照组注射灭菌的阴性对照组注射低浓度组注射和高浓度组注射，于后用镊子取脏神经节提取总，用法测定的表达水平，计算干扰率。探索菲律宾蛤仔基因沉默如何影响自身性激素合成酶基因表达分子生物学论文。材料与方法制备采用体外合成法制备及绿色荧光蛋白的用于干扰实验。根据菲律宾蛤仔基因序列信息和引物设计原则设计了两组不同的引物，并分别在每组引物的正义链和反义链的末端添加序列见表，以蛤仔脏神经节为模板，扩增特异序列。根据绿色荧光蛋白，序列信息设计引物......”。

9、“.....参考文献林浩然脊椎动物促性腺激素释放激素的分子结构变异型和功能多样性动物学报，柳学周，史宝，徐永江，等我国鲆鲽类生殖内分泌研究进展渔业科学进展，王晓安，蒋小满中国蛤蜊神经系统显微结构的初步研究动物学杂志，王芹，汪桂玲，陈亚，等干扰沉默角帆蚌基因对贝类矿化作用的影响基因组学与应用生物学，李颖翔，杜以帅，张琳琳，等利用干扰技术研究长牡蛎基因对基因表达的影响湖北农业科学，姜珊珊，苗晶晶，刘力铷，潘鲁青菲律宾蛤仔基因沉默对其性激素合成酶基因表达的影响中国海洋大学学报自然科学版，基金山东省自然科学基金面上项目资助。探索菲律宾蛤仔基因沉默如何影响自身性激素合成酶基因表达分子生物学论文。用纯化产物，按照试剂盒说明基因表达量没有出现显著变化。与对照组相比，干扰组中及基因的表达量分别下降了与阴性对照组相比，及基因表达量分别下降了......”。