1、“.....初步建立了抗体的检测方法，该方法具有良好的特异性及灵敏性，为的鉴别诊断提供了技术手段。关键词原核表达型特异性抗原生物信息学方法病毒学登革病毒型酶联免疫吸附测定登革病毒，属黄病毒科黄病毒属，主要传播媒介为埃及伊蚊及白纹伊蚊。据世界卫生组织统计，全球每年感染人口达万亿，超过个国家的亿人口正在受到威胁，仅次于疟疾的重要行临床应用验证。方法采用生物信息学方法分析型及其相近虫媒病毒基因组序列，选择预测得分较高且在不同流行株中高度保守的表位利用表达系统制备其原核表达抗原，法分析其免疫原性建立优化检测抗体的方法，并验证方法的特异性及灵敏性应用优化的方法检测份各型登革热，确诊患者及份健康体检人群血清样本。结果经生物信息学分析，预测获得特异性抗原表位段，预测得分值较高的登革病毒型抗体检测方法建立及型特异性抗原片段的鉴定病毒学论文异性抗原片段的鉴定病毒学论文......”。

2、“.....湿法转印至硝酸纤维素膜，分别以及多克隆抗体∶稀释为抗，标记羊抗鼠为抗∶稀释，分析重组抗原的反应原性。重组抗原的纯化将鉴定正确的阳性菌株接种液体培养基，经诱导超声破碎后，采用树脂纯化重组抗原，并进行分析。检测方法的建立及优化重组抗原按定浓度包被酶标板，对包被条件封闭释为抗，标记羊抗鼠为抗∶稀释，分析重组抗原的反应原性。重组抗原的纯化将鉴定正确的阳性菌株接种液体培养基，经诱导超声破碎后，采用树脂纯化重组抗原，并进行分析。检测方法的建立及优化重组抗原按定浓度包被酶标板，对包被条件封闭条件进行系统优化，以制备的多克隆抗体为抗∶稀释，标记羊抗鼠为抗∶稀释，波长下测定吸光度值。判定标准，且检测标本阴性对照比值，的体反应的均，多克隆抗体在倍稀释范围内，均可获得阳性检测结果。份临床阳性样本，阴性样本，检测样本阴性对照比值，。结论成功筛选鉴定了型特异性抗原片段......”。

3、“.....该方法具有良好的特异性及灵敏性，为的鉴别诊断提供了技术手段。关键词原核表达型特异性抗原生物信息学方法病毒学登革病毒型酶联免疫吸附测定登革病毒，属黄病毒科黄病毒属，主要摘要目的筛选鉴定登革病毒，型型特异性抗原片段建立优化检测抗体的方法，并进行临床应用验证。方法采用生物信息学方法分析型及其相近虫媒病毒基因组序列，选择预测得分较高且在不同流行株中高度保守的表位利用表达系统制备其原核表达抗原，法分析其免疫原性建立优化检测抗体的方法，并验证方法的特异性及灵敏性应用优化的方法检测份各型登革热于黄病毒属病毒之间具有严重的免疫交叉反应，而之间交叉尤为严重，这些均对其抗原的特异性提出了更高的要求。本研究在保证免疫反应亲和力的前提下，尽量缩短了抗原片段长度，以减少非特异性反应，经生物信息学筛选，鉴定型特异性抗原表位区域的融合表达片段具有良好的免疫原性......”。

4、“.....具有良好的特异性。建立优化了检测感染的方法，该方法的特异性及灵敏性良好，为下步试剂盒的研制奠定了良好原核表达抗原与多抗反应的，与其他相近虫媒病毒多抗反应的均。见表。方法的灵敏性结果显示，抗体在倍稀释范围内，均可获得阳性检测结果抗体在倍稀释范围内，反应相对稳定，在之间，随着抗体稀释倍数的增加，逐步降低，倍稀释后，其仍在以上，稀释至倍以后，降至，随后进入检测灰区。见图。表原核表达抗原分析图检测方法的灵敏性方法的临床应用抗原与感染患者血清无交叉反应，其均在以下收试剂盒及质粒快速提取试剂盒均购自美国公司标记羊抗鼠及标记兔抗人购自武汉博士德生物工程有限公司胰化蛋白胨及酵母提取物购自英国公司。特异性抗原表位的生物信息学分析采用及软件系统，分析参考株编码蛋白的亲水性抗原性可塑性及表面可能性，同时考虑是否含有易形成抗原表位的转角及无规则卷曲结构......”。

5、“.....并参考相近虫媒病毒型编码蛋白序列，根据其与所获抗原表位氨基东省流行的株登革热型病毒基因组全序列测定及分析中国媒介生物学及控制杂志，赵文忠，周国林，何海怀，等海南岛两株甲病毒基因组末端核苷酸序列的克隆与分析中华实验和临床病毒学杂志，李硕，李以圣，任瑞文，官文升，陈迪佳，李春缘，杨柳，陈月，李鹏登革病毒型型特异性抗原片段的鉴定及其抗体检测方法的建立中国生物制品学杂志，。实验动物昆明鼠级，雌性，周龄，体重及昆明乳鼠级，日龄，体重均购自南方医科大学实验动物中心，动物生登革病毒型抗体检测方法建立及型特异性抗原片段的鉴定病毒学论文础，并为进步探讨该表位的生物学功能提供了参考。参考文献张复春中国登革热现状新发传染病电子杂志，白志军，张培，洪文艳，等广东省流行的株登革热型病毒基因组全序列测定及分析中国媒介生物学及控制杂志，赵文忠，周国林，何海怀......”。

6、“.....李硕，李以圣，任瑞文，官文升，陈迪佳，李春缘，杨柳，陈月，李鹏登革病毒型型特异性抗原片段的鉴定及其抗体检测方法的建立中国生物制品学杂志病例的几率日渐增加，准确评价患者免疫状态，确定是否次感染，可为临床治疗提供重要依据。同时，在广泛开展的流行病学调查工作中，也需要准确有效的血清学分型手段。目前，确定次感染产品主要通过检测抗体出现的时间及强度判断，由于临床上患者自身对发病时间的判断可能存在误差，导致诊断结果存在不确定性。通过直接检测患者体内异型抗体的有无来判断次感染，可信度更高，并且受检测条件限制较小。在的免疫学分型的研究方面，由查工作中，也需要准确有效的血清学分型手段。目前，确定次感染产品主要通过检测抗体出现的时间及强度判断，由于临床上患者自身对发病时间的判断可能存在误差，导致诊断结果存在不确定性......”。

7、“.....可信度更高，并且受检测条件限制较小。在的免疫学分型的研究方面，由于黄病毒属病毒之间具有严重的免疫交叉反应，而之间交叉尤为严重，这些均对其抗原的特异性提出了更高的要求。本研究在保，份感染患者血清中，份检测阳性在之间，其中份年感染患者血清的相对较低，为份健康体检人群样本中份检测阳性，为，其余样本均呈阴性，在之间。该结果与采用免疫荧光及商品化试剂盒的复核结果致。讨论致病机制复杂，有研究表明，其编码蛋白存在群特异性及型特异性抗原表位，群特异性表位可能在及的发病机制中起重要作用，次异型感染可导致严重的，。随着感染人口基数的增多，出现次异型感染进而发展为酸的序列及性质的差异，进步筛选型特异性抗原表位，并与代表性毒株进行多序列比对分析，鉴定其在其他株系中的保守性，以筛选广覆盖面的型特异性抗原表位......”。

8、“.....表原核表达抗原的优化条件经系统优化后，确定的反应条件为纯化重组抗原蛋白包被酶标板，孔，包被封闭液孔，封闭，充分干燥后备用。方法的特异性经分析，许可证粤。主要试剂病毒提取试剂盒及试剂盒购自美国公司表达系统及树脂购自美国公司及连接酶均购自大连公司琼脂糖凝胶纯化免疫反应亲和力的前提下，尽量缩短了抗原片段长度，以减少非特异性反应，经生物信息学筛选，鉴定型特异性抗原表位区域的融合表达片段具有良好的免疫原性，与其他种相近虫媒病毒无交叉反应，具有良好的特异性。建立优化了检测感染的方法，该方法的特异性及灵敏性良好，为下步试剂盒的研制奠定了良好基础，并为进步探讨该表位的生物学功能提供了参考。参考文献张复春中国登革热现状新发传染病电子杂志，白志军，张培，洪文艳，等广登革病毒型抗体检测方法建立及型特异性抗原片段的鉴定病毒学论文，其余样本均呈阴性，在之间......”。

9、“.....讨论致病机制复杂，有研究表明，其编码蛋白存在群特异性及型特异性抗原表位，群特异性表位可能在及的发病机制中起重要作用，次异型感染可导致严重的，。随着感染人口基数的增多，出现次异型感染进而发展为病例的几率日渐增加，准确评价患者免疫状态，确定是否次感染，可为临床治疗提供重要依据。同时，在广泛开展的流行病学调带病，对流行区国家的医疗卫生体系造成沉重负担。登革病毒型抗体检测方法建立及型特异性抗原片段的鉴定病毒学论文。表原核表达抗原的优化条件经系统优化后，确定的反应条件为纯化重组抗原蛋白包被酶标板，孔，包被封闭液孔，封闭，充分干燥后备用。方法的特异性经分析，原核表达抗原与多抗反应的，与其他相近虫媒病毒多抗反应的均。见表。方法的灵敏性结果显示，抗体在倍稀释范及重组表达载体经双向测序证实读码框架准确，经分析......”。