剂倍。植物及其加工产品中转基因成分实时荧光定性检验方法。内源基因在检测物种中拷贝数恒定的不显示等位基因变化的基因。该基因可用于判定物种特异性。外源基因利用生物工程技术转入的其他生物基因,使该生物品种表现新的生物学性状。值每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数。缩略语下列缩略语适用于本文件。十烷基甲基溴化铵脱氧腺苷磷酸脱氧胞苷磷酸脱氧鸟苷磷酸脱氧核糖核酸脱氧核苷磷酸脱转基因棉花,对玉米是内源基因转基因玉米油菜转基因玉米大豆油菜棉花苜蓿对豌豆是内源基因转基因油菜转基因油菜转基因玉米续序号基因品系名称引物探针序列终浓度产物大小适用范围同序号的范围转基因大豆玉米油菜棉花水稻番茄马铃薯木瓜亚麻甜菜苹果菊苣烟草李子甜瓜茄子和桉树等外源筛选基因转基因油菜玉米小麦棉花水稻大豆等筛选检测转基因油菜玉米棉花大豆甜菜等筛选检测转基因油菜玉米甜菜等筛选检测转基因油菜大豆玉米棉花马铃薯甜菜小麦剪股颖等筛选检测大豆内源基因番茄内源基因续序号基因品系名称引物探针序列终浓度产物大小适用范围水稻内源基因马铃薯内源基因棉花内源基因植物及其加工产品中转基因成分实时荧光定性检验方法.续作物品系名称引物探针序列终浓度产物大小玉米于阴性对照内源基因检测值小于或等于,转化事件特异性检测值大于或等于阳性对照内源基因检测值小于或等于,转化事件特异性检测值小于或等于上述指标有项不符合者,说明反应体系不正常,应重新进行实时扩增。结果判定及表述实时荧光结果判定测试样品检测值大于或等于,内源基因检测值小于或等于,则可判定该样品不含所检基因或品系。测试样品检测值小于或等于,内源基因检测值小于或等于,判定该样品含有所检基因或品系。测试样品检测值在之间,应调整模板浓度,重做实时荧光。再次扩增后的外源基因检测值仍小于,则可判定为该样品含有所检基因或品系。再次扩增后的外源基因检测值大于或等于,则可判定为该样品不含所检基因或品系。结果表述结果为阳性的,表述为检出外源基因或检出转基因品系结果为阴性的,表述为未检出外源基因或未检出转基因品系。防污染措施检测过程中防止交叉污染的措施按照和。最低检出限各基因片段的实时荧光扩增的最低检出限。附录规范性附录植物转基因成分检测实时荧光检测引物和探针植物转基因成分检测实时荧光检测引物和探针序号基因品系名称引物探针序列终浓度产物大小适用范围莽草酸磷酸合成酶基因抗虫毒蛋白,选择性毒杀科罗拉多马铃薯甲虫来源于农杆菌的胭脂碱合成酶基因启动子来自拟南芥的小亚基启动子来源于烟草的花蕊特异性基因的发育调节启动子玉米泛素基因的启动子花椰菜花叶病毒终止子为来源于豌豆磷酸核酮糖羧化酶基因的终止子章鱼碱合成酶终止子谷氨酰胺转移酶磷酸甘露糖异构酶基因基因,真核生物核糖体基因高移动性蛋白家族基因磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因油菜种子储藏蛋白基因乙醇脱氢酶编码玉米淀粉合酶异构体的基因,植物凝集素基因番茄花药粉特异性表达基因蔗糖合成酶磷脂酶家族基因草甘膦氧化还原酶基因尿苷磷酸葡萄糖焦磷酸化酶陆地棉的基因方法提要提取样品后,采用实时荧光技术对样品筛选基因或品系特异性片段扩增,根据实时荧光扩增曲线,判断该样品中是否含有转基因成分。对外源基因检测阳性的样品,或已知为转基因阳性的样品,如需进步进行品系鉴定,则采用品系特异性实时荧光扩增品系特异性片段,根据扩增结果实时荧光扩增曲线,判定该样品中含有哪些种转基因品系成分。仪器设备实时荧光仪。样品粉碎仪或研磨机。天平。水浴锅或恒温孵育器。植物及其加工产品中转基因成分实时荧光定性检验方法。注的专门适用于化学变构的热启动酶。以上参数可根据不同型号实时荧光仪和所选扩增试剂体系不同作调整。仪器检测通道的选择设置反应管荧光信号收集条件,应与探针标记的报告基团致。具体设置方法可参照仪器使用说明书。实验对照的设立每个样品应有个平行实验,同时每次检测必须设立个对照阳性对照,为对应的转基因植物样品品系或含有相应外源基因的转基因植物样品基因组,或含有上述片段的质粒标准分子阴性对照,非转基因植物样品空白对照,设两个,是提取时设置的提取空白对照以水代替样品,是反应的空白对照以水代替模板。质量控制空白对照内源基因检测值大于或等于,外源基因或品系特异性检测值大于或等核酸蛋白分析仪或紫外分光光度计。微量移液器。试剂和材料除特别说明外,所有试剂均为分析纯或生化试剂,实验用水应符合中级水的规格。实时荧光预混液聚合酶反应缓冲液氯化镁含,和酶按比例配制的溶液。荧光校正试剂倍。植物及其加工产品中转基因成分实时荧光定性检验方法。内源基因在检测物种中拷贝数恒定的不显示等位基因变化的基因。该基因可用于判定物种特异性。外源基因利用生物工程技术转入的其他生物基因,使该生物品种表现新的生物学性状。值每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数。缩略语下列缩略语适用于本文件。十烷基甲基溴化铵脱氧腺苷磷酸脱氧胞苷磷酸脱氧鸟苷磷酸脱氧核糖核酸脱氧核苷磷酸脱续作物品系名称引物探针序列终浓度产物大小油菜马铃薯续作物品系名称引物探针序列终浓度产物大小棉花水稻植物内源基因油菜内源基因玉米内源基因方法提要提取样品后,采用实时荧光技术对样品筛选基因或品系特异性片段扩增,根据实时荧光扩增曲线,判断该样品中是否含有转基因成分。对外源基因检测阳性的样品,或已知为转基因阳性的样品,如需进步进行品系鉴定,则采用品系特异性实时荧光扩增品系特异性片段,根据扩增结果实时荧光扩增曲线,判定该样品中含有哪些种转基因品系成分。仪器设备实时荧光仪。样品粉碎仪或研磨机。天平。水浴锅或恒温孵育器。植物及其加工产品中转基因成分实时荧光定性检验方法。注的专门适用于化学变构的热启动酶。以上参数可根据不同型号实时荧光仪和所选扩增试剂体系不同作调整。仪器检测通道的选择设置反应管荧光信号收集条件,应与探针标记的报告基团致。具体设置方法可参照仪器使用说明书。实验对照的设立每个样品应有个平行实验,同时每次检测必须设立个对照阳性对照,为对应的转基因植物样品品系或含有相应外源基因的转基因植物样品基因组,或含有上述片段的质粒标准分子阴性对照,非转基因植物样品空白对照,设两个,是提取时设置的提取空白对照以水代替样品,是反应的空白对照以水代替模板。质量控制空白对照内源基因检测值大于或等于,外源基因或品系特异性检测值大于或等续作物品系名称引物探针序列终浓度产物大小玉米玉米续作物品系名称引物探针序列终浓度产物大小
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