1、“.....已完成了本项目所需的科研平 台建设任务，开展了嗜水单胞菌和金黄色葡萄球菌的环介导等温扩增 研究，取得了阶段性研究成果，这些工作为本项目的顺利完成奠定了 基础。 二技术方案论述 项目技术关键点和创新点，项目完成时达到的技术 水平 技术关键 本项目的技术关键之是引物设计......”。

2、“..... 环介导等温扩增引物设计难度大，组引物要求有个位点与靶序列 完全匹配才能够进行扩增。目前我们已从国际基因组数据库中下载了 部分病原菌的基因组，并根据基领域，是国家重点支持的研究领域，项目主 要针对严重影响人类健康的主要病原菌的检测与诊断需要进行检测技 术的研究与试剂盒的开发，本项目的实施可产生具有自主知识产权的 科研成果......”。

3、“.....市场竞争力强，项目完成后能够产生 较好的经济效益和社会效益，项目符合国家产业技术政策。 项目所处技术领域技术发展现状 目前的病原菌检测方法费时费力准确性低，开发快速准确 低成本的检测技术和配套试剂是病原菌检测工作中亟待攻克的难题。 本项目针对病原菌检测中存在的问题......”。

4、“..... 项目技术先进性基因组特点采用等温扩增软件设计了 部分引物，现正通过实验确定这些引物的性能。本项目的另技术关键是最佳等温扩增体系优化。通过对引 物浓度内引物和外引物的最佳浓度比模板浓度浓度 聚合酶用量浓度等条件进行优化，能够获得最佳实验条件。 创新点 既往对病原菌的检测般采用细菌分离培养鉴定法，但该方 法的准确率低，所需时间长......”。

5、“.....近年 来，人们将技术用于病原常见病原菌的环介导等温扩增快速检测方法的特异性分析 分别以病原菌和非病原菌基因组为模板做环介导等温扩增反 应，检测本方法的特异性。对相关领域技术进步的推动作用 环介导等温扩增是利用个特殊设计的引物和具有链置换活性的 聚合酶，在恒温条件下特异高效快速地扩增的新技术......”。

6、“.....技术以其特异性强灵敏度高快速准确和操作简便等优点在核酸的科学研究疾病的诊断 和转基因食品检测等领域得到了日益广泛的应用。该技术的推广对生 物学食品科学及医学领域中的检测和诊断技术的进步有推动作用。 项目目前进展情况 课题组开展了大量前期研究工作，已完成了本项目所需的科研平 台建设任务......”。

7、“.....取得了阶段性研究成果，浓度等条件进行优化，能够获得最佳实验条件。 创新点 既往对病原菌的检测般采用细菌分离培养鉴定法，但该方 法的准确率低，所需时间长，往往延误临床正确的诊断和治疗。近年 来，人们将技术用于病原菌的检测。技术虽然较传统方法灵敏 快速，但需要较昂贵的仪器设备。更为重要的是，方法容易产生非 特异性扩增产物......”。

8、“.....影响对样品的正确判断。 本项目将建立适合于食品和临床标本大规模检测的环介导等温扩增快 速检测病原菌技术。与目前的检测方法相比，等温扩增法具有快速 准确灵敏的特点。而且，等温扩增法是在恒温下进行，只需个简 单速检测病原菌方法 的灵敏度分析。 第四季度环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测病原菌方法 与常规扩增方法比较分析......”。

9、“..... 第二季度环介导等温扩增快速检测病原菌试剂盒和多重等温扩 增试剂盒研制。 第三季度试剂盒的应用及技术推广。 第四季度课题总结，鉴定。 五项目经费预算情况 本项目申请科研经费万元......”。