1、“.....对混合菌进行分离不能计数适用于好氧菌稀释涂布平板法可以计数，可以观察菌落特征吸收量较少较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延适用于厌氧菌和兼性厌氧菌平板划线法二.大肠杆菌的纯化培养㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基㈡纯化大肠杆菌.接种稀释涂布平板法.培养将接种后的培养基和个未接种的培养基放入恒温箱中培养后，观察并记录稀释倍稀释倍稀释倍三菌种的保藏.临时保藏试管固体斜面培养基上，培养长成菌落冰箱保存.长期保存菌种易被污染变异甘油管藏甘油灭菌菌液搁置斜面四课题成果评价培养基的制作是否合格如果未接种的培养基在恒温箱中保温后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。二接种操作是否符合无菌要求如果培养基上生长的菌落的颜色形状大小基本致，并符合大肠杆菌菌落的特点......”。

2、“.....则说明接过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。三是否进行了及时细致的观察与记录培养与后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这点，并能观察到其他些细微的变化。这步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。微生物的培养基础知识实验操作结果分析与评价培养基定义分类人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养物质固体培养基液体培养基无菌技术培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法定义消毒与灭菌常用灭菌方法制备牛肉膏蛋白胨固体培养基纯化大肠杆菌课堂小结试蛋白胨易吸潮，要快加盖牛肉膏称量纸少量水加热溶解取纸蛋白胨琼脂补水定容.调分装封口.灭菌.倒平板培养基培养皿分散成单个细胞,形成单个菌落倒平板约防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染灼烧灭菌......”。

3、“.....培养基灭菌后，需要冷却到左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度答可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰答通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。.平板冷凝后，为什么要将平板倒置.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗为什么答平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。答空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此为什么总是从上次划线的末端开始划线答划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上次划线的末端开始......”。

4、“.....最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。支试管，分别加入无菌水稀释涂布平板法.梯度稀释菌液菌液微量移液器浸稀释涂布平板法.梯度稀释菌液.涂布平板不超过.各梯度分别涂布个平板个不涂布作空白对照滴灼涂稀释倍稀释倍稀释倍稀释涂布法稀释涂布法是将菌液进行系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想想，第步应如何进行无菌操作应从操作的各个细节保证“无菌”。例如酒精灯与培养皿的距离要合适吸管头不要接触任何其他物体吸管要在酒精灯火焰周围等等。．平板划线法和稀释涂布平板法的比较优点缺点适用范围好不要用这个平板培养微生物。二......”。

5、“.....纯化大肠杆菌的方法平板划线法和稀释涂布平板法接种环防止划破培养基重复实验空白对照平板划线法平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。为什么在操作的第步以及每次划线之前都要灼烧接种环在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗为什么操作的第步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物杀死上次残留的菌种，保证使下次划线时，菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线答以免接种环温度太高，杀死菌种。......”。

6、“.....牛肉膏蛋白胨培养基的配方定容至蛋白胨牛肉膏琼脂.分析营养构成.配制原则目的明确营养全面浓度适宜比例恰当适宜的值有机碳源异养型根据微生物的种类培养目的选择原料自养型不加碳源加入缓冲剂细菌偏碱，真菌偏酸碳源生产科研耐高温需保持干燥的物品，小时接种环接种针等金属用具消毒灭菌定义方法较为温和理化方法，杀死部分有害菌体不包括芽孢孢子强烈的理化方法，杀死所有微生物包括芽孢孢子煮沸消毒法巴氏消毒法化学药剂紫外线灼烧灭菌干热灭菌酒精氯气石炭酸等高压蒸汽灭菌培养基，二.无菌技术防止外来杂菌的污染.消毒与灭菌请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。培养细菌用的培养基与培养皿玻棒试管烧瓶和管实验操作者的双手......”。

7、“.....无菌技术防止外来杂菌的污染.消毒与灭菌酒精灯旁操作超净工作台有些细菌在定的条件下，细胞里面形成个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱低温高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜如温度水分适宜的时候，芽孢又可以萌发，形成个细菌细菌原生动物真菌和植物等产生的种有繁殖作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。单个或少数菌体.特征大小形状光泽度颜色透明度等。.功能.定义菌落鉴定菌种的重要依据固体培养基上大量繁殖子细胞群体牛肉膏蛋白胨培养基的配方定容至蛋白胨牛肉膏琼脂.三.大肠杆菌的纯化培养㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基.计算培养基用量依配方计算各成分的用量.称量.溶化牛肉膏黏稠，用称量纸称取牛肉到目前为止，几十项生理学和医学奖......”。

8、“.....提供营养和条件.防止污染.培养基微生物生存的环境和营养物质.基本成分思考微生物“吃”什么碳源氮源水无机盐碳源无机碳源有机碳源牛肉膏蛋白胨等自养微生物异养微生物氮源无机氮源有机氮源为硝化细菌提供源和能源牛肉膏蛋白胨酵母膏尿素等注含的有机物是异养型微生物的碳源氮源能源.培养基微生物生存的环境和营养物质.基本成分碳源氮源水无机盐.特殊营养维生素碱基等生长因子牛肉膏酵母膏蛋白胨中含有.氧气的需求.种类固体培养基液体培养基有无凝固剂琼脂分离鉴定工业生产化学成分物理性质天然培养基合成培养基牛肉膏蛋白胨培养基是种应用最广泛和板划线分离法可以观察菌落特征......”。

9、“.....可以观察菌落特征吸收量较少较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延适用于厌氧菌和兼性厌氧菌平板划线法二.大肠杆菌的纯化培养㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基㈡纯化大肠杆菌.接种稀释涂布平板法.培养将接种后的培养基和个未接种的培养基放入恒温箱中培养后，观察并记录稀释倍稀释倍稀释倍三菌种的保藏.临时保藏试管固体斜面培养基上，培养长成菌落冰箱保存.长期保存菌种易被污染变异甘油管藏甘油灭菌菌液搁置斜面四课题成果评价培养基的制作是否合格如果未接种的培养基在恒温箱中保温后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。二接种操作是否符合无菌要求如果培养基上生长的菌落的颜色形状大小基本致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的如果培养基上出现了其他菌落......”。