1、“..... 应作涂片和组织切片检查，并采取部分病灶磨碎，加少量生理盐水混匀，皮下 注射只豚鼠。若证明系结核病变，该菌种即应废弃。试验经过详细记录备查。 若未满个月试验豚鼠因其他病患死亡应解剖检查，依上法处理。若死亡只 以上应重试。 免疫力试验 用原代种子批以人份的剂量免疫豚鼠，以强毒人型结核分枝杆 菌感染，免疫组与对照组动物的病变指数及脾脏毒菌分离数的对数值经统计学 处理，应有显著差异。如无条件，可送中国药品生物制品检定所进行。 菌种保存 冻干菌种保存于。 菌苗制造 卡介苗制造室必须与其他生物制品部门及实验室分开。所需用具如高 压锅冰箱及玻璃器皿等，均须单独设置并专用。卡介苗制造包装及保存过 程均须避光。 卡介苗制造的工作人员及经常进入卡介苗制造室的人员，必须身体健康，经 线检查无结核病，且以后每年经线检查次，可疑者暂不在卡介苗制造室 工作，其检查记录必须保存备查......”。

2、“.....培养基所用的原料 应符合中国生物制品主要原材料试行标准规定。 菌种传代与培养 冻干菌种在苏通马铃薯培养基胆汁马铃薯培养基以及液体苏通培养基上每传 次为代。马铃薯培养基上培育的菌种放冰箱保存不超过个月。用于生产 菌苗的培养物的总代数不超过代。 原液制造 收集 培养瓶应逐瓶检查，若有污染湿膜混浊等情况应废弃。收集菌膜压干，移 入盛有不锈钢珠瓶内，钢珠与菌体的比例应根据研磨机转速控制在适宜的范 围，并尽可能在低温下研磨。加入适量无致敏原保护液稀释成定浓度的原液。 稀释用中国药品生物制品检定所发给的冻干卡介苗参考比浊标准，以分光光度法或 其他适宜方法测定原液浓度，用保护液将原液稀释成。 纯菌试验 用于制造卡介苗的培养物原液以及稀释后的菌苗均应按生物制品无菌试 验规程抽样做纯菌试验。 菌苗分批 用同代菌种同时制造的菌苗为批，稀释为数瓶者，按瓶分亚批......”。

3、“.....每人份卡介苗应为。 冻干 菌苗原液分装后应立即进行冻干。干燥完毕后立即进行真空封口。亦可充氮封 口。 成品检定 物理化学检查 察到，如果向 培养这株结合杆菌的甘油土豆培养基中加入牛胆汁。则在培养期间杆菌形态发生 变化，并逐步缓慢地丧失其毒力。他们从年开始采用这个方法，约每 星期传代次，前后共传了代，经约年时间，终于获得株毒力稳定地 减毒株。该株仅可以使牛产生发热反应，但不使之发生结核，注入豚鼠体内非但 不引起发病，而且可赋予其保护力，能抵抗强毒菌地感染。年， 首次将此用于名死于结核产妇的乳婴，经个月观察婴儿健康无恙，从此开始 人群预防和接种。现今，结核病已经不在会对人类生命有太大的威胁了，卡介苗 的接种也已经普及，但仍会有些接种后的隐患存在，我们应认识并提高警惕， 尤其是在婴幼儿接种方面......”。

4、“.....医学领域对于卡介苗的研究直在继续，直在发展。卡介苗用于结核病的 预防，至今全球有亿以上人口接种过卡介苗，尽管卡介苗的免疫效果当前受 到部分质疑，但卡介苗对有效地预防和控制结核病的流行发挥了极大作用。再现 的传染病中结核病的回升疫情最为严重。年中国疾病预防与控制中心 发布的我国感染性疾病发病率中，结核病直位居首位，死亡率也位于 第二位。全世界每秒钟就有个新的结核病感染者出现，约的人感染了结 核菌，现有结核病人万，万人死于结核病，是其他传染病死亡人数的 总和。在高发地区，合并结核病感染者死亡率明显增加。我国至少有亿以 上人口感染了结核菌，每年死于结核病的约有万之多......”。

5、“.....因此研制新型的有效疫苗 防治结合并具有重大研究意义。针对全球结核病疫情恶化的情况于年 发布了全球结核病紧急状态宣言。年，和国际防痨肺病联合会议决 定把每年的月日定为世界防治结核病日。疫苗的市场来源于需求，而种 需求则始于传染病，预防传染病的有效手段是提供疫苗。多人同时患种传染病 则为疫，人类为了生存，必须防疫。疫苗可以防疫，因此，疫苗研制者研制 出疫苗在向市场提供，这种需求关系在商品时代形成了经济关系即构成了疫苗市 场。 目前我国属于全球个结核病高负担国家之。结核病数居世界第二位，仅次 于印度。由于我国出现了结核病卷土重来的严峻现实，早在年，我国 结核病疫情管理已由丙级升为乙级。卡介苗自年应用于人体以来，仍是目 前世界仅有的预防结核病的疫苗，全球有多个国家和地区多亿儿童接 种了卡介苗，现在每年仍有亿多新生儿接种卡介苗......”。

6、“.....尤其是对结核性脑膜炎和全身粟粒性结核等重 症结核病的预防。由于卡介苗具有经济性等优点，因而在今后相当长时间内，其 仍然会在全世界尤其是发展中国家继续使用。据最新公布发改委公布的数据， 年全国医药工业实现销售收入亿元。因此推算目前国内市场疫苗行业 的销售额不到整个医药行业的低于世界的水平，可见在我国疫苗行业目 前还是个很小的行业。近年来国外有关卡介苗进展情况，越南民主共和国取得 了很大的进展。卡介菌及防痨菌苗世界各国卡介菌种虽都来自巴黎研 究院,但由于长期以来的传代培养,因此到目前为止各国所用的菌种各出现明显 的差异。总结了丹麦巴西苏联等株卡介菌,敲明共培养性能菌落 形态免疫效能有很大不同。由于近年来进步认藏到卡介菌是种混合菌型, 因此同菌种培养生长的菌液如各型此例不同,免疫力及接种反应就可能不同。 因此选择菌种以及分离卡介菌的钝菌种简题对提高卡介苗工作质量有重要关系。 对于冻干菌苗......”。

7、“.....报告淋巴拮抗发症也基本相同,口服效果也好。捷克自年使用 鼠型菌苗菌苗，在布拉格有,多人分别接种了鼠型菌苗及卡介苗,砚察 期简征明免疫效果完全相同。卡介苗经过半个多世纪的实践证明是种安全的疫 苗，而具有持久的免疫效果。疫苗诱导的免疫反应可长达年，因而卡介苗 成了表达外源基因的理想载体，并以此来构建可预防其他传染病的重组活载体疫 苗。许多病毒细菌和寄生虫的抗原已经成功地在卡介苗中获得了表达，并作为 疫苗在动物试验中显示了有效的免疫保护效果。但是用卡介苗作为载体表达外源 基因的疫苗在Ⅰ期和Ⅱ期临床试验中的初步结果不十分理想，主要原因是因为卡 介苗本身会在接种疫苗者的体内刺激产生很强的针对分枝杆菌的免疫反应，而针对外源性基因编码的抗原反应却不太理想，这使得重组卡介苗载体疫苗的临床进 展缓慢......”。

8、“.....但唯可 用于预防接种的卡介苗，在世界已免疫了亿人次，虽然儿童仍在使用，但对流行 的肺结核却无有效的防护作用。同时，卡介苗接种面临的新问题对纯蛋白衍 生物接种可诱导迟发超敏反应，造成不能与结核菌感染相区别，从而降低纯蛋白衍 生物的诊断效率卡介苗是减毒活疫苗，不能用于感染个体进来研究显示致 病性结核杆菌的些编码抗原能够增强诱导保护性免疫，但卡介苗却缺少编码这些 抗原的基因，在卡介苗减毒和反复传代时缺少而导致免疫效果下降，加上结核杆菌 多重抗药株在许多国家包括中国明显增加，目前全国大约有万人感染的是 结核杆菌此外，我国城市农村来源的流动人口中，有部分人在儿童未接受卡 介苗免疫，致使现在对结核菌易感染。上述种种原因导致结核病发病率和死亡率居 高不下。因此，研制新型的有效疫苗对防治结核病已迫在眉睫。世界卫生组织认为 个理想的疫苗应具备的条件是价廉，让贫困地区或国家的人们有应用疫苗的支 付能力。耐热......”。

9、“.....耐热的疫苗有更好 的稳定性。单次注射剂可产生保护，有研究表明，若种疫苗如乙肝疫苗需注射 针，注射完针的人数仅为注射针人数的。多价，针对病原体的多个表 位的疫苗会刺激更强的免疫应答。可经黏膜接种，对于经黏膜感染的病原体，能刺 激分泌型免疫球蛋白的疫苗会产生更好的预防作用。适合在生命的早期应用。 近期的发展趋势 目前进行重组疫苗营养缺陷型结核减毒活疫苗结核亚单位疫苗及结 核疫苗等的研究。然而卡介苗作为多年来使用被验证的疫苗，相对来说还是 很安全的，并且建立了定的基础，不会被轻易的取代。由于卡介苗具有经济性 等优点，因而在今后相当长的段时间内，其仍然会在全世界尤其是发展中国家 继续使用。新疫苗的回复突变率仍比较高，其安全性是最令人担忧的问题。当前 的研究方向技术难度大，短期内难以成功。寻求合适的佐剂也需要相当长的时间， 还有些生产过程中的操作关键也需要确定......”。