1、“.....分析本方法对不同样品检测的准确率。病原菌的环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测试剂盒的研制根据本项目所建立的最佳反应体系和反应产物显示方法，研制开发快速检测病原菌的试剂盒包括单病原菌检测试剂盒和多种病原菌同时检测试剂盒。工艺流程引物优化组合反应体系的建立灵敏度试验特异性试验反应条件优化阴性对照阳性对照样品收集核酸提取引物设计基因序列分析三项目技术质量指标本项目建立的方法对病原菌检测的准确率常见病原菌发的多重环介导等温扩增快速检测病原菌技术及其配套试剂盒达到国际先进水平。二项目技术方案技术方案环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测常见病原菌方法的建立常见病原菌特异性引物的设计。根据数据库公布的常见病原菌序列，采用专用引物设计软件设计特异性引物包括每类致病菌的两个外引物两个内引物和两个环引物......”。

2、“.....以保证靶序列的特异性扩增。常见病原菌基因组的提取。专用引物设计软件设计特异性引物包括每类致病菌的两个外引物两个内引物和两个环引物，其中每个内引物均具有两段能够识别靶分子上特定位点的序列，以保证靶序列的特异性扩增。常见病原菌特异性引物的设计。二项目技术方案技术方案环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测常见病原菌方法的建立部分内容简介术，以克服当前个等温扩增反应只能检测种或的缺点。因此，本项目的实施，将开发出具有自主知识产权的病原菌检测试剂盒。项目完成时达到的技术水平项目完成时，开发的多重环介导等温扩增快速检测病原菌技术及其配套试剂盒达到国际先进水平。二项目技术方案技术方案环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测常见病原菌方法的建立常见病原菌特异性引物的设计。根据数据库公布的常见病原菌序列......”。

3、“.....其中每个内引物均具有两段能够识别靶分子上特定位点的序列，以保证靶序列的特异性扩增。常见病原菌基因组的提取。采用本实验室建立的基因组快速提取技术提取致病菌。扩增反应体系的优化对引物浓度内引物和外引物的最佳浓度比模板浓度浓度聚合酶用量浓度等条件进行优化。④温育条件的优化在之间优化等温扩增温度。扩增产物的检测建立快速显色法和电泳分析法两种检测扩增产物的方法。以上述研究结果为基础，建立常见病原菌的环介导等温扩增和多重环介导等温扩增快速检测技术。常见病原菌的环介导等温扩增快速检测方法的灵敏度分析将常见病原菌目标基因克隆至载体，转化后提取质粒，倍比稀释成含目的基因拷贝数为，以其为模板做环介导等温扩增反应，检测本方法的灵敏度。常见病原菌的环介导等温扩增快速检测方法的特异性分析分别以病原菌和非病原菌基因组为模板做环介导等温扩增反应，检测本方法的特异性......”。

4、“.....并与的扩增结果进行比较分析，进步判断技术的灵敏度特异性和稳定性。常见病原菌的环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测方法在食品检测和临床诊断中的应用研究将本方法应用于食品检测和临床诊断中，分析本方法对不同样品检测的准确率。病原菌的环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测试剂盒的研制根据本项目所建立的最佳反应体系和反应产物显示方法，研制开发快速检测病原菌的试剂盒包括单病原菌检测试剂盒和多种病原菌同时检测试剂盒。工艺流程引物优化组合反应体系的建立灵敏度试验特异性试验反应条件优化阴性对照阳性对照样品收集核酸提取引物设计基因序列分析三项目技术质量指标本项目建立的方法对病原菌检测的准确率达到。本项目建立的方法对病原菌目的基因检测的灵敏度达到拷贝。本项目建立的方法不产生非特异性扩增产物。对病原菌目的基因的等温扩增过程在分钟内完成......”。

5、“.....电泳法检测扩增产物在分钟内完成。四项目执行过程中各阶段目标年度第季度设计引物，引物合成，购买实验菌株和有关试剂，完善实验条件。第二季度样品采集，病原菌提取。第三季度等温扩增反应体系优化，温育条件优化。第四季度扩增反应产物检测方法的建立快速显色法电泳分析法。年国家重点建设学科生物化学与分子生物学省级重点学科和食品科学教育部重点实验室。这些重点学科和重点实验室设施完善先进，具有进行本项目研究的实验条件和实验场地，为本项目的完成提供了保障。项目申请人所在的江西省生物化学与分子生物学重点实验室实验条件先进，具有型仪，全自动测序仪型高速冷冻离心机超速冷冻离心机超低温冰箱超纯水系统各种规格的电泳仪紫外分光光度计设施先进的细菌培养室等仪器设备。现已完成了本项目所需的科研平台建设工作。项目申请人长期从事分子生物学研究工作，熟练掌握了分子生物学研究技术......”。

6、“.....目前正在进行嗜水单胞菌和金黄色葡萄球菌的环介导等温扩增研究，基本掌握了等温扩增专用引物设计软件的使用和等温扩增的操作要点，这为本项目的顺利完成奠定了技术基础。项目申请单位人才资源情况项目申请单位南昌大学是我省唯所省部共建的工程重点建设大学，人才资源丰富，科研力量雄厚。生命科学学院有专任教师人，其中正副教授人，讲师人，中高级技术人员比例。项目组人员专业结构职称结构项目组科研人员人，主要由生物化学与分子生物学专业微生物学专业人员组成，专业结构合理。科研人员中，教授人副教授人研究生人。其中具有博士学位的教师人。项目新增投资筹集情况本项目申请科研经费万元。四项目预期经济效益预期市场需求病原菌的检测是食品检测和临床诊断中的常规项目，食品检测部门和医疗机构对检测试剂的需求量巨大。等温扩增技术在病原菌的检测工作中有很大潜力。然而，目前国外仅有将其用于病毒和检测的研究报道......”。

7、“.....国内也未见这方面的研究开发报道。因此，开发病原菌的环介导的等温扩增试剂具有广阔的前景。预期盈利水平目前以传统方法检测个样品中的种致病菌的收费约元。本项目建立的检测技术检测个样品的试剂成本约元，如果以元销售，可获利润元。个小型试剂生产企业年至少可生产检测万个样品的试剂，每年获利万元。因此，该技术的推广可产生明显的经济效益。预期产业化前景本项目是针对严重影响人类健康的病原菌的检测问题提出的，研究成果的实用性强，易于转化。在产品的研制工作中采用了现代分子生物学新技术，产品的科技含量高，生产成本低，利润空间大。本产品的生产不需特殊大型设备，产品定型后可向中小型生化试剂生产企业转让，因此，本项目的产业化前景广阔。我省具有定生产能力的试剂生产企业经技术培训后可生产本产品。项目实施风险分析课题组已开展了本项目的前期研究工作，目前正在进行嗜水单胞菌和金黄色葡萄球菌的环介导等温扩增研究......”。

8、“.....这为本项目的顺利完成奠定了技术基础。项目申请人所在实验室为江西省生物化学与分子生物学重点实验室，实验条件先进，现已完成了进行本项目研究的科研平台建设工作。因此，本项目的实施基本上不存在技术风险。常规检测病原菌的细菌培养分离鉴定法费时费力，近年发展起来的鉴定法易产生非特异性产物，导致假阳性或假阴性结果。与常规检测技术和技术相比，环介导的等温扩增技术具有快速准确灵敏低成本等优点。在本项目的研究中，我们还将建立次测试能够检测多种致病菌的多重环介导等温扩增新技术。该技术易于质控，适用于大批量样品同时检测，值得在食品病原菌普查和人体健康普查工作中推广应用。环介导等温扩增新技术以其明显的优势将完全能够取代目前使用的常规分析方法和方法，成为病原菌检测中的主要检测方法。因此，本项目的成果转化基本上不存在市场风险......”。

9、“.....该检测方法简单快速便宜，不需要昂贵的仪器设备，易于在基层食品检测部门和医院推广。这对于保障我省食品安全和人体健康具有重要意义，能够产生明显的社会效益。对资源利用情况本项目是生物高科技产品，技术含量高，产品的生产原料主要是常规生物化学试剂，因此不会破坏自然资源。对人才培养情况本项目的实施，将为我省培养从事现代分子生物学产品开发和病原菌检验人员人，培养硕士研究生人。环境影响及效益。本项目的研究和产品开发过程中不会使用有害物质，也不会过度利用自然资源，因此不会对环境造成影响。选题的必要性项目所处技术领域产业政策本项目属生物高技术领域，是国家重点支持的研究领域，项目主要针对严重影响人类健康的主要病原菌的检测与诊断需要进行检测技术的研究与试剂盒的开发，本项目的实施可产生具有自主知识产权的科研成果。本项目技术含量高......”。