的比例依次稀释，配制成个浓度制备提取吗啡受体粗膜膜甲苯闪烁液缓冲液，方法膜的制备取大鼠全脑，弃去小脑及表面脑膜血管后称重，加倍重量体积缓数，然后用总结合管计数减掉非特异结合管的计数即可得到特异性结合量，根据受体理论，作图，即可求出最大结合量及解离常数。材料方法材料依托啡，水溶液，按入大量远远大于标记的放射性配基非标记特异性配基以使受体几乎全部被非标记配基饱和，标记配基只能与非特异性位点结合，从而得到总结合量和非标记结合量。实验原理由此我们可以得到总结合量和非特异性结合量的计非特异性结合。特异性结合亲和力高且有饱和性，非特异性结合不易饱和。为得出特异性结合量，必须设法在总结合量中减去非特异结合量。实验原理总结合管中包含有特异结合与非特异结合量，同时制备的非特异结合管中需加研究阿片受体及其配基的结合情况，计算出受体含量及解离常数，分析有多种不同亲和力的受体存在时配基与受体相互作用规律。实验原理放射配基与受体制备物作用时，有配基与受体的特异性结合和配基与非受体分子的受体结合实验中国协和医科大学药理学系叶菜英实验目的观察了解受体与配基的结合方式原理。掌握受体与配基结合饱和曲线解离常数及受体含量的测定与计算方法。实验原理本实验用氚标记的依托啡杨世杰主编人民卫生出版社年月现代医学实验技巧张德昌主编协和医科大学出版社年医学药理学张德昌主编协和医科大学出版社年!中国协和医科大学八年制临床医学生药理学实验实验四放射配体除保温过程外需在冰浴中进行。实验讨论本实验的意义，掌握受体结合相关概念及原理。针对本组实验结果进行分析讨论讨论成功或失败原因。参考资料药理实验讲义中国协和医科大学药理室年月药理学。注意事项注意反应温度及时间，般来讲温度高反应时间要短些，温度低反应时间则适当延长。此实验为放射性同位素实验，注意同位素污染及防护。此实验为微量实验，注意加样器的正确使用注意实验条件，此实验结合的配基量为纵坐标，做饱和曲线。以为纵坐标，为横坐标绘制图，计算出及值计算及绘图测定结果为放射计数，需转换成配基浓度特异性结合为总结合管减去非特异性结合管加样后的样品试管保温，之后冰浴终止反应，细胞收集器过滤，冷洗涤两次后取下滤膜放入闪烁杯，加闪烁液无水乙醇进行液闪测定。结果处理以配基浓度为横坐标，与受体。加样每个测定点双复管依下表顺序加样，膜最后加依托啡依托啡膜总结合非特异结合分钟后取上清，离心分钟后保留沉淀，加缓冲液混悬均匀，保温后再次离心分钟，保留沉淀并用缓冲液混悬，测定蛋白浓度后置保存备用，使用时解冻后稀释，使其蛋白浓度为后取上清，离心分钟后保留沉淀，加缓冲液混悬均匀，保温后再次离心分钟，保留沉淀并用缓冲液混悬重量体积缓冲液后用组织粉碎机研碎注意冰浴制成匀浆，离心甲苯闪烁液缓冲液，方法膜的制备取大鼠全脑，弃去小脑及表面脑膜血管后称重，加倍重量体积缓冲液后用组织粉碎机研碎注意冰浴制成匀浆，离心分钟结合量，根据受体理论，作图，即可求出最大结合量及解离常数。材料方法材料依托啡，水溶液，按的比例依次稀释，配制成个浓度制备提取吗啡受体粗膜膜乎全部被非标记配基饱和，标记配基只能与非特异性位点结合，从而得到总结合量和非标记结合量。实验原理由此我们可以得到总结合量和非特异性结合量的计数，然后用总结合管计数减掉非特异结合管的计数即可得到特异性结乎全部被非标记配基饱和，标记配基只能与非特异性位点结合，从而得到总结合量和非标记结合量。实验原理由此我们可以得到总结合量和非特异性结合量的计数，然后用总结合管计数减掉非特异结合管的计数即可得到特异性结合量，根据受体理论，作图，即可求出最大结合量及解离常数。材料方法材料依托啡，水溶液，按的比例依次稀释，配制成个浓度制备提取吗啡受体粗膜膜甲苯闪烁液缓冲液，方法膜的制备取大鼠全脑，弃去小脑及表面脑膜血管后称重，加倍重量体积缓冲液后用组织粉碎机研碎注意冰浴制成匀浆，离心分钟后取上清，离心分钟后保留沉淀，加缓冲液混悬均匀，保温后再次离心分钟，保留沉淀并用缓冲液混悬重量体积缓冲液后用组织粉碎机研碎注意冰浴制成匀浆，离心分钟后取上清，离心分钟后保留沉淀，加缓冲液混悬均匀，保温后再次离心分钟，保留沉淀并用缓冲液混悬，测定蛋白浓度后置保存备用，使用时解冻后稀释，使其蛋白浓度为。加样每个测定点双复管依下表顺序加样，膜最后加依托啡依托啡膜总结合非特异结合加样后的样品试管保温，之后冰浴终止反应，细胞收集器过滤，冷洗涤两次后取下滤膜放入闪烁杯，加闪烁液无水乙醇进行液闪测定。结果处理以配基浓度为横坐标，与受体结合的配基量为纵坐标，做饱和曲线。以为纵坐标，为横坐标绘制图，计算出及值计算及绘图测定结果为放射计数，需转换成配基浓度特异性结合为总结合管减去非特异性结合管。注意事项注意反应温度及时间，般来讲温度高反应时间要短些，温度低反应时间则适当延长。此实验为放射性同位素实验，注意同位素污染及防护。此实验为微量实验，注意加样器的正确使用注意实验条件，此实验除保温过程外需在冰浴中进行。实验讨论本实验的意义，掌握受体结合相关概念及原理。针对本组实验结果进行分析讨论讨论成功或失败原因。参考资料药理实验讲义中国协和医科大学药理室年月药理学杨世杰主编人民卫生出版社年月现代医学实验技巧张德昌主编协和医科大学出版社年医学药理学张德昌主编协和医科大学出版社年!中国协和医科大学八年制临床医学生药理学实验实验四放射配体受体结合实验中国协和医科大学药理学系叶菜英实验目的观察了解受体与配基的结合方式原理。掌握受体与配基结合饱和曲线解离常数及受体含量的测定与计算方法。实验原理本实验用氚标记的依托啡研究阿片受体及其配基的结合情况，计算出受体含量及解离常数，分析有多种不同亲和力的受体存在时配基与受体相互作用规律。实验原理放射配基与受体制备物作用时，有配基与受体的特异性结合和配基与非受体分子的非特异性结合。特异性结合亲和力高且有饱和性，非特异性结合不易饱和。为得出特异性结合量，必须设法在总结合量中减去非特异结合量。实验原理总结合管中包含有特异结合与非特异结合量，同时制备的非特异结合管中需加入大量远远大于标记的放射性配基非标记特异性配基以使受体几乎全部被非标记配基饱和，标记配基只能与非特异性位点结合，从而得到总结合量和非标记结合量。实验原理由此我们可以得到总结合量和非特异性结合量的计数，然后用总结合管计数减掉非特异结合管的计数即可得到特异性结合量，根据受体理论，作图，即可求出最大结合量及解离常数。材料方法材料依托啡，水溶液，按的比例依次稀释，配制成个浓度制备提取吗啡受体粗膜膜甲苯闪烁液缓冲液，方法膜的制备取大鼠全脑，弃去小脑及表面脑膜血管后称重，加倍重量体积缓冲液后用组织粉碎机研碎注意冰浴制成匀浆，离心分钟后取上清，离心分钟后保留沉淀，加缓冲液混悬均匀，保温后再次离心分钟，保留沉淀并用结合量，根据受体理论，作图，即可求出最大结合量及解离常数。材料方法材料依托啡，水溶液，按的比例依次稀释，配制成个浓度制备提取吗啡受体粗膜膜后取上清，离心分钟后保留沉淀，加缓冲液混悬均匀，保温后再次离心分钟，保留沉淀并用缓冲液混悬重量体积缓冲液后用组织粉碎机研碎注意冰浴制成匀浆，离心。加样每个测定点双复管依下表顺序加样，膜最后加依托啡依托啡膜总结合非特异结合结合的配基量为纵坐标，做饱和曲线。以为纵坐标，为横坐标绘制图，计算出及值计算及绘图测定结果为放射计数，需转换成配基浓度特异性结合为总结合管减去非特异性结合管除保温过程外需在冰浴中进行。实验讨论本实验的意义，掌握受体结合相关概念及原理。针对本组实验结果进行分析讨论讨论成功或失败原因。参考资料药理实验讲义中国协和医科大学药理室年月药理学受体结合实验中国协和医科大学药理学系叶菜英实验目的观察了解受体与配基的结合方式原理。掌握受体与配基结合饱和曲线解离常数及受体含量的测定与计算方法。实验原理本实验用氚标记的依托啡非特异性结合。特异性结合亲和力高且有饱和性，非特异性结合不易饱和。为得出特异性结合量，必须设法在总结合量中减去非特异结合量。实验原理总结合管中包含有特异结合与非特异结合量，同时制备的非特异结合管中需加数，然后用总结合管计数减掉非特异结合管的计数即可得到特异性结合量，根据受体理论，作图，即可求出最大结合量及解离常数。材料方法材料依托啡，水溶液，按