1、“.....之后。封闭脱脂奶粉封闭液浸泡膜，再在室温下摇床封闭抗用封闭液稀释处理相应抗，并使膜浸泡于抗孵育液，然后孵育过夜二抗充分洗涤膜次，次。封闭液稀释相应标记的二抗稀释比，用二抗孵育液浸泡膜，在室温下摇床孵育。显色曝光充分洗涤膜次，次。将合适量的底物液滴加在每张膜上，再孵育数分钟左右。待荧光条带明显后，用滤纸吸去多余的底物液。之后，覆上保鲜膜光胶片压片，按显影液显影定影液定影顺序依次处理。统计学处理软件对所以实验数据进行统计学分析......”。

2、“.....单因素方差分析进行组间比较。时差异有统计学意义。万方数据三峡大学硕士学位论文结果第部分成功构建大鼠心肌损伤模型压线管法结扎万方数据三峡大学硕士学位论文万方数据三峡大学硕士学位论文反应体系如表示表反应体系上游引物下游引物反应条件，按照以上反应体系及条件完成操作，采用∆∆比较量化法对结果进行分析万方数据三峡大学硕士学位论文产物电泳鉴定琼脂糖凝胶铺胶，之后加入缓冲溶液。再将的扩增产物和的上样缓冲液混合均匀后，立即上样。处理条件如下电压时间......”。

3、“.....大鼠心肌梗死面积及凋亡指数检测双染法测定心肌梗死面积大鼠缺血，血流再灌注后，将大鼠心脏原位重新结扎，经颈动脉注入伊文思蓝，用无损伤血管钳夹住主动脉，等待缺血区显示清晰后即可摘取心脏，冰液冲洗，即置于冰箱中冷冻，继之延垂直心脏左室长轴切成厚为的心肌切片，迅速置入提前预热的的氯化三苯基四氮唑溶液，避光恒温孵育。之后，福尔马林磷酸缓冲液固定。用计算机图像分析系统计算心肌缺血和梗死面积心肌梗死面积白色区面积白色区面积红色区面积......”。

4、“.....石蜡包埋并切片。经过不同浓度梯度的酒精脱水处理后，用二甲苯浸洗两次后制成蜡块浸蜡，之后将组织蜡块固定切片成约薄片，热水中铺平，贴至载玻片，烤箱过夜后再行以下操作切片脱蜡将切片按二甲苯Ⅰ二甲苯Ⅱ无水乙醇Ⅰ无水乙醇Ⅱ酒精酒精酒精酒精顺序依次处理，再用蒸馏水浸泡。滴加蛋白酶工作液，反应，用洗涤次，每次。制备反应混合液，酶溶液与荧光素标记溶液混合均匀制备反应混合液......”。

5、“.....孵育后，吸水纸拭干玻片，再加的反应混合液，阴性对照组仅加的荧光素标记溶液，随后避光孵育。洗涤次，每次。吸水纸擦干玻片干后加的，避光孵育。洗涤次，每次，滴加显色液，室温显色，之后用自来水冲洗终止显色。复染苏木素复染，时间控制在左右，水洗后用的盐酸酒精进行分化处理，再用水洗返蓝。脱水透明乙醇脱水无水乙醇脱水次每次约二甲苯透明次每次通风橱中风干中性树胶封片。万方数据三峡大学硕士学位论文切片晾干，显微镜下观察采集图像......”。

6、“.....而凋亡的心肌细胞核染成棕褐色，每张切片在凋亡细胞阳性区域随机取个以上的高倍视野。数不少于个心肌细胞核，计算凋亡指数，凋亡指数阳性细胞总细胞检测心肌组织线粒体依赖性的凋亡相关蛋白以及总蛋白及磷酸化总蛋白及磷酸化表达水平总蛋白提取取出各组组织样本，置入匀浆器中，加入组织裂解液充分匀浆样本冰上操作充分裂解后，吸取上清裂解液至的离心管，进而离心，吸取上清液即为总蛋白样品蛋白定量测定蛋白含量采用法，操作步骤按说明书进行......”。

7、“.....加热处理，使蛋白变性。电泳各组样品取总蛋白进行上样电泳，胶浓度根据蛋白分子量配制。之后，根据预染显示判断目的蛋白电泳情况，当目的蛋白充分分离后停止电泳。转膜湿转法小心取出凝胶，根据切下目的条带，并用蒸馏水轻轻冲洗。随后，剪大小适宜的膜和滤纸，甲醛浸泡膜数秒，与滤纸共同浸泡于电转缓冲液中。然后严格按照黑色板纤维垫滤纸凝胶膜滤纸纤维垫白色板的顺序依次放好，夹紧电泳板放入转膜仪内，需注意应将黑色板侧对照黑色负极面......”。

8、“.....之后。封闭脱脂奶粉封闭液浸泡膜，再在室温下摇床封闭抗用封闭液稀释处理相应抗，并使膜浸泡于抗孵育液，然后孵育过夜二抗充分洗涤膜次，次。封闭液稀释相应标记的二抗稀释比，用二抗孵育液浸泡膜，在室温下摇床孵育。显色曝光充分洗涤膜次，次。将合适量的底物液滴加在每张膜上，再孵育数分钟左右。待荧光条带明显后，用滤纸吸去多余的底物液。之后，覆上保鲜膜光胶片压片，按显影液显影定影液定影顺序依次处理。统计学处理软件对所以实验数据进行统计学分析......”。

9、“.....单因素方差分析进行组间比较。时差异有统计学意义。万方数据三峡大学硕士学位论文结果第部分成功构建大鼠心肌损伤模型压线管法结扎冠状动脉左前降支，结扎即刻就可观察到心尖部缺血变白，心电图即出现宽大波，段抬高显著，表明成功构建缺血模型。心电图Ⅱ导联评估模型构建与结扎前心电图相比，结扎即刻波增高增宽，段抬高明显，再灌注后，可见肢体Ⅱ导联段急剧压低，提示恢复血流灌注模型成功建立如图所示......”。