1、“.....利润空间大。本产 品的生产不需特殊大型设备，产品定型后可向中小型生化试剂生产企 业转让，因此，本项目的产业化前景广阔。我省具有定生产能力的 试剂生产企业经技术培训后可生产本产品。 项目实施风险分析课题组已开展了本项目的前期研究工作，目前正在进行嗜水单胞 菌和金黄色葡萄球菌的环介导等温扩增研究，基本掌握了等温扩增专 用引物设计软件的使用和等温扩增的操作要点，这为本项目的顺利完 成奠定了技术基础。项目申请人所在实验室为江西省生物化学与分子 生物学重点实验室，实验条件先进，现已完成了进行本项目研究的科 研平台建设工作。因此，本项目的实施基本上不存在技术风险。 常规检测病原菌的细菌培养分离鉴定法费时费力，近年发展起来 的鉴定法易产生非特异性产物，导致假阳性或假阴性结果。与常 规检测技术和技术相比，环介导的等温扩增技术具有快速准确 灵敏低成本等优点。供了保障。 项目申请人所在的江西省生物化学与分子生物学重点实验室实验 条件先进，具有型仪......”。

2、“.....这些重点学科和重点实验室设施完善先进，具有进行本项目 研究的实验条件和实验场地，为本项目的完成提土建安装费万元资料调研费万元实验检测费万元鉴定费万元。 三项目实施支撑条件 项目技术来源 本项目的技术由项目申请人建立。 项目实验检测条件 项目申请人所在学院生命科学学多重等温扩 增试剂盒研制。 第三季度试剂盒的应用及技术推广。 第四季度课题总结，鉴定。 五项目经费预算情况 本项目申请科研经费万元。其中设备仪器购置费万元材 料样品加工费万元原菌方法 与常规扩增方法比较分析。 年度 第季度环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测病原菌方法 在食品和临床标本上的应用及效果分析。 第二季度环介导等温扩增快速检测病原菌试剂盒和季度环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测病原菌方法 的准确度分析......”。

3、“..... 第四季度环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测病件优化。 第四季度扩增反应产物检测方法的建立快速显色法电泳分 析法。 年度 第季度环介导等温扩增快速检测病原菌方法操作程序确定，多重等温扩增同时检测多种病原菌实验技术建立。 第二 四项目执行过程中各阶段目标 年度 第季度设计引物，引物合成，购买实验菌株和有关试剂，完 善实验条件。 第二季度样品采集，病原菌提取。 第三季度等温扩增反应体系优化，温育条测的灵敏度达到 拷贝。 本项目建立的方法不产生非特异性扩增产物。 对病原菌目的基因的等温扩增过程在分钟内完成，显 色法检测扩增产物在分钟内完成，电泳法检测扩增产物在分钟内 完成。 同类产品比较试验国标法比较试验 方法应用于病原体检测 样品收集 核酸提取引物设计 基因序列分析本项目建立的方法对病原菌检测的准确率达到......”。

4、“.....研制开发快速检测病原菌的试剂盒包括单病原菌检测试剂盒 和多种病原菌同时检测试剂盒。 工艺流程多重等温扩增快速检测方法 在食品检测和临床诊断中的应用研究 将本方法应用于食品检测和临床诊断中，分析本方法对不同 样品检测的准确率。 病原菌的环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测试剂盒的 及常规扩增方法比较分析 以的两个外引物做常规扩增，并与的扩增结果进 行比较分析，进步判断技术的灵敏度特异性和稳定性。 常见病原菌的环介导等温扩增和常见病原菌的环介导等温扩增快速检测方法的特异性分析 分别以病原菌和非病原菌基因组为模板做环介导等温扩增反 应，检测本方法的特异性。常见病原菌的环介导等温扩增快速检测方法与国际标准方法介导等温扩增快速检测方法的灵敏度分析 将常见病原菌目标基因克隆至载体......”。

5、“..... 倍比稀释成含目的基因拷贝数为，以其为模板 做环介导等温扩增反应，检测本方法的灵敏度。 度。 扩增产物的检测建立快速显色法和电泳分析法两种检测扩增 产物的方法。 以上述研究结果为基础，建立常见病原菌的环介导等温扩增和 多重环介导等温扩增快速检测技术。 常见病原菌的环介度。 扩增产物的检测建立快速显色法和电泳分析法两种检测扩增 产物的方法。 以上述研究结果为基础，建立常见病原菌的环介导等温扩增和 多重环介导等温扩增快速检测技术。 常见病原菌的环介导等温扩增快速检测方法的灵敏度分析 将常见病原菌目标基因克隆至载体，转化后提取质粒， 倍比稀释成含目的基因拷贝数为，以其为模板 做环介导等温扩增反应，检测本方法的灵敏度。 常见病原菌的环介导等温扩增快速检测方法的特异性分析 分别以病原菌和非病原菌基因组为模板做环介导等温扩增反 应，检测本方法的特异性......”。

6、“.....并与的扩增结果进 行比较分析，进步判断技术的灵敏度特异性和稳定性。 常见病原菌的环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测方法 在食品检测和临床诊断中的应用研究 将本方法应用于食品检测和临床诊断中，分析本方法对不同 样品检测的准确率。 病原菌的环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测试剂盒的 研制 根据本项目所建立的最佳反应体系和反应产物显示方 法，研制开发快速检测病原菌的试剂盒包括单病原菌检测试剂盒 和多种病原菌同时检测试剂盒。 工艺流程 三项目技术质量指标 引物优化组合 反应体系的建立 灵敏度试验特异性试验反应条件优化阴性对照阳性对照 试剂盒 中试 同类产品比较试验国标法比较试验 方法应用于病原体检测 样品收集 核酸提取引物设计 基因序列分析本项目建立的方法对病原菌检测的准确率达到。 本项目建立的方法对病原菌目的基因检测的灵敏度达到 拷贝......”。

7、“..... 对病原菌目的基因的等温扩增过程在分钟内完成，显 色法检测扩增产物在分钟内完成，电泳法检测扩增产物在分钟内 完成。 四项目执行过程中各阶段目标 年度 第季度设计引物，引物合成，购买实验菌株和有关试剂，完 善实验条件。 第二季度样品采集，病原菌提取。 第三季度等温扩增反应体系优化，温育条件优化。 第四季度扩增反应产物检测方法的建立快速显色法电泳分 析法。 年度 第季度环介导等温扩增快速检测病原菌方法操作程序确定，多重等温扩增同时检测多种病原菌实验技术建立。 第二季度环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测病原菌方法 的准确度分析。 第三季度环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测病原菌方法 的灵敏度分析。 第四季度环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测病原菌方法 与常规扩增方法比较分析。 年度 第季度环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测病原菌方法 在食品和临床标本上的应用及效果分析......”。

8、“..... 第三季度试剂盒的应用及技术推广。 第四季度课题总结，鉴定。 五项目经费预算情况 本项目申请科研经费万元。其中设备仪器购置费万元材 料样品加工费万元土建安装费万元资料调研费万元实验检测费万元鉴定费万元。 三项目实施支撑条件 项目技术来源 本项目的技术由项目申请人建立。 项目实验检测条件 项目申请人所在学院生命科学学院拥有食品科学国家重点建设 学科生物化学与分子生物学省级重点学科和食品科学教育部重点实 验室。这些重点学科和重点实验室设施完善先进，具有进行本项目 研究的实验条件和实验场地，为本项目的完成提供了保障。 项目申请人所在的江西省生物化学与分子生物学重点实验室实验 条件先进，具有型仪，全自动测序仪 型高速冷冻离心机超速冷冻离心机超低温冰箱超纯 水系统各种规格的电泳仪紫外分光光度计设施先进的细菌培养 室等仪器设备。现已完成了本项目所需的科研平台建设工作。 项目申请人长期从事分子生物学研究工作......”。

9、“.....课题组已开展了本项目的前期研究工作，目前正在进行 嗜水单胞菌和金黄色葡萄球菌的环介导等温扩增研究，基本掌握了等温扩增专用引物设计软件的使用和等温扩增的操作要点，这为本项目 的顺利完成奠定了技术基础。程序确定，多重等温扩增同时检测多种病原菌实验技术建立。 第二季度环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测病原菌方法 的准确度分析。 第三季度环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测病原菌方法 的灵敏度分析。 第四季度环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测病原菌方法 与常规扩增方法比较分析。 年度 第季度环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测病原菌方法 在食品和临床标本上的应用及效果分析。 第二季度环介导等温扩增快速检测病原菌试剂盒和多重等温扩 增试剂盒研制。 第三季度试剂盒的应用及技术推广。 第四季度课题总结，鉴定。 五项目经费预算情况 本项目申请科研经费万元。其中设备仪器购置费万元材 料样品加工费万元土建安装费万元资料调研费万元实验检测费万元鉴定费万元......”。