1、“.....再接种到发酵罐。发酵罐培养培养基的配制用麦芽糖液配置成含麦芽糖豆粕水解液豆油深井水，调至。发酵罐培养基经消毒灭菌冷却后接入种子培养成熟液。培养条件为温度，罐压，风量为，后，培养时间为。发酵罐的设计发酵罐的结构通用发酵罐的主要组成部件有罐体是发酵罐的主要结构，其内壁有挡板，作用是防止液内中心产生漩涡，般用块挡板。搅拌装置主要功能是使罐内物料混合均匀，搅拌器叶轮多采用搅拌涡轮式，搅拌轴要与罐体密封严实，防止漏液和染菌。搅拌转速为传热装置有夹套，列管等，这里采用外夹套。通气部分通过空气分布器将通入的无菌空气均匀分布到发酵液中，发酵罐通风量为，至发酵结束通风量为。分布器有单管式和环形管式......”。

2、“.....最简单实用的消泡装置是耙式消泡器，直接装在搅拌轴上。进出料口罐顶设有进料口，罐底有出料口。其他附属设备还包括试镜人孔手孔取样管等，用以观测和检修。发酵罐的工艺尺寸常用的机械通风发酵罐的结构和主要几何尺寸标准化设计见附图其几何尺寸比例如下表示搅拌器挡数单位全部为发酵罐大小用公称体积表示，∏其中发酵罐圆柱形筒身高度发酵罐内径罐顶到罐底的高度搅拌器直径挡板宽度下搅拌器距罐底的距离搅拌器间距底封头或顶封头高度计算已知年产量为吨，中性淀粉酶产量为，年有个工作日，发酵周期为小时，即天，清理发酵罐天，对淀粉的转化率为，预处理收率，提取率为，发酵罐个数为个，装料系数为，是公称容积，指筒身容积与底封头容积之和......”。

3、“.....每个为，中性淀粉酶产量为，对糖的转化率为，提取率为，装料系数为，则每个发酵罐在个发酵周期中性淀粉酶产量为那么个发酵罐年的总产量为吨故符合年产量为吨的生产要求。发酵过程的工艺控制发酵过程的补料策略中间补料是在发酵过程中补充些营养物料水或产酶促进剂，以满足微生物的代谢活动和产酶的需要。中性淀粉酶生产中要经常补料，用倍年度浓度碳源的培养基补料，体积相当基础料的，从培养开始，每小时次，分余次补加完毕。延长了发酵时间，提高了酶活力和单罐产量。发酵过程值的控制各种微生物需要在定的环境中方能正常生长繁殖。培养基中比值高，发酵液倾向于酸性，偏低比值低......”。

4、“.....偏高。中性淀粉酶最适为。因此，在发酵过程中，可通过添加适量的尿素或碳酸钙等来调节上升或下降。发酵过程温度的控制温度对微生物的生长产物的合成和代谢调节有重要作用。温度变化方面影响各种酶反应的速率和井水，并定期检查水质，要求，电导率，总硬度条件等，所使用的培养基都是不同的，这些也都是培养基配制需要考虑的因素。水水是所有培养基的主要成分，也是微生物机体的重要组成成分。水是良好的溶剂，又是活细胞中切代谢反应的媒介物，还可以维持细胞中的渗透水量达，常压蒸汽灭菌。培养基的营养要求培养基的成分大致分为碳源氮源无机盐微量元素特殊生长因子促进剂前体和水等几大类。对不同的微生物，微生物不同的生长阶段......”。

5、“.....使菌种迅速生长健壮，能在比较短的周期内充分发挥产生菌合成发酵产物的能力，但要注意成本和能耗。中性淀粉酶的发酵培养基配方是麸皮小米糠木薯粉烧碱，加水使到较高的溶解氧，供大量菌体生长和繁殖。中性淀粉酶的种子培养基的配置将豆饼蛋白胨和酵母膏各氯化钠配置成种子培养基，在蒸汽灭菌。发酵培养基发酵培养基的要求是营养要适当丰富蒸汽灭菌。种子培养基种子培养基是供孢子发芽生长和大量繁殖菌丝体，并使菌丝体长得粗壮成为活力强的种子。对于种子培养基的营养要求比较丰富和完全，氮源和维生素的含量也比较高些，浓度以稀薄为好，可以达菌体变异......”。

6、“.....中性淀粉酶的孢子培养基配置如下将麸皮豆饼粉蛋白胨琼脂制成斜面培养基，在规模发酵设计主要用到孢子，种子和发酵培养基这三种类型。所需菌种的纯化和分离可用平板划线法进行菌种分离。方法如下用接种管蘸取少量经增殖培养后的菌液，在含无菌固体培养基的平板表面上进行规则划线，操作时由右向左轻轻划线，划线时平板面与接种环成，以手腕力量在平板表面轻巧滑动划线，线条要平行密集，使两线不能重叠，充分利用表面积，划线时接种环不要嵌入板内划破培养基，密集的含菌样品，经过多划线稀释，使菌体在平板培养基上逐渐分离成单个菌株，经培养繁殖成单个菌落，反复进行几次平板划线分离......”。

7、“.....菌株的培养常用培养基配方蒸馏水蛋白胨牛肉膏琼脂。本课题以麸皮豆饼粉作为天然培养基，在保温箱中培养，至培养基中部分出现成熟颜色即可进行保藏。菌落的选择初筛采用透明圈法，方法为在培养基里接入淀粉天青，接入含菌样品后，可在菌落周围清晰地观察到淡蓝色晕环，初筛选出的微生物经过菌株性状试验后已确定具有定生产能力的菌株还要进行复筛。方法将初筛后的少数菌株接种于锥形瓶内的液体培养基中，次往复式摇床式震荡培养，得到摇瓶种子。诱变育种诱变育种可以利用物理化学因素诱导遗传特性发生变异，再从变异群体中选择符合人们种要求如高产的个体，进而培育成新的品种或种质......”。

8、“.....出发菌株的选择由于野生型菌株生产性能较差，通常采用经历过生产条件考验的菌株，即经过液体培养的摇瓶种子，这类菌株定的生产性状，对生产环境有较好的适应性，正突变的可能性也很大。菌悬液的制备细菌般要求处于对数生长中期的菌，用玻璃珠振荡，使细胞均分散，然后用灭菌脱脂棉过滤，得到分散菌株。菌悬液的细胞浓度不宜过高，本课题中的枯草芽胞杆菌，宜将其浓度控制在个。菌悬液介质般用生理盐水。诱变剂的处理诱变剂包括物理化学生物诱变，在微生物诱变育种中，可用物理化学复合诱变因素处理菌种，这样可以扩大培养幅度，提高诱变效果获得中性淀粉酶高产突变株......”。

9、“.....然后用的二乙酯处理，处理时采用的磷酸缓冲液，再将磁力搅拌器于紫外灯下距离，接着在红灯下吸取经处理的菌液，稀释至，取稀释液滴滴于个平板中，依次涂布均匀，再置暗箱内与培养。注意般化学诱变剂均有毒性，多数还具有致癌作用，故操作时切忌用口吸取并勿与皮肤直接接触，做好安全工作。突变菌株的筛选包括琼脂块透明圈法初筛。方法倒入选择培养基皿，取其中较厚的皿，用打孔器或玻璃打制圆形培养基平移琼脂块至个选择平板上，再用接种针挑取单菌落的少量菌体分别接种于琼脂块中心并与琼脂块接入出发菌株作为对照正置于培养小时于培养好的选择平板中滴加几滴淀粉天青......”。