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纤维素降解菌的分离及酶活研究 纤维素降解菌的分离及酶活研究

格式:word 上传:2022-06-25 20:10:54

《纤维素降解菌的分离及酶活研究》修改意见稿

1、“.....在此我对他们深表谢意。感谢所有参加答辩的老师的指导。入含的醋酸醋酸钠缓冲液,混匀,恒温水浴,加入试剂,沸水中煮沸,冷却后定容到,在下比色,测出值,查阅标准曲线后,求出溶液中的葡萄糖含量。个酶活国际单位等于酶促反应中每分钟生成葡萄糖的酶量。实验中为了便于比较将酶活单位重新定义为酶促反应中每分钟生成葡萄糖的酶量。酶活力其中为反应后待测液中的葡萄糖含量,为酶液的稀释倍数,为酶液体积,为水解时间......”

2、“.....以上述条件改变碳源种类,添加量为,考察碳源对产酶的影响。其中碳源主要有葡萄糖,滤纸,麸皮,羧甲基纤维素钠。不同氮源对产酶条件的影响在碳源确定基础上改变氮源种类,比例为,考察氮源对产酶的影响。其中氮源主要有酵母膏,蛋白胨尿素,大豆粉,以及蛋白胨。不同值对产酶条件的影响在碳源氮源确定的基础上,调节培养基的初始值为,,,,,。在上述条件下测定纤维素酶活......”

3、“.....在不同温度条件,下摇瓶发酵培养,测定酶活,确定最佳发酵温度。氮源添加量的优化在碳源氮源值及温度确定的基础上改变氮源的比例,分别为,,,,,。摇瓶发酵培养测定酶活。时间对产酶的试验从发酵的第天开始,每隔抽样进行酶活测定,直至第天结束,比较时间对产酶的影响。结果与分析富集培养的结果将从不同环境中采集的土样按照实验方法进行处理后,分别接种于富集培养基,另外,取土壤悬液,不经富集,直接涂布分离平板。平板培养观察结果。不经富集......”

4、“.....虽然出发浓度很高,但是分离平板上长出的菌落很少,平均每个平板只有个以下的菌落长出。经过富集培养后,取三个浓度涂布分离平板,三个浓度都有大量的菌落长出,其中以涂布的平板上的菌落最多,所有菌落几乎连成片,很难区分单菌落。次之,涂布的平板上的菌落平均个左右,菌落形态色泽呈现明显的差异。从外观,可以初步判断它们是不同的菌。此结果是由于经过段时间富集培养使土壤中的纤维素降解菌呈现优势状态,增加了纤维素降解菌的浓度。刚果红染色结果经过固体培养基培养......”

5、“.....再用脱色,从两种不同的土壤样品所分离的降解纤维素菌株中各取株水解圈大的菌,标为号长春和号东北农业大学校园内,两株菌的水解圈情况如图图刚果红染色后的水解圈测得水解圈直径,见表由刚果红染色,依据测得的水解圈大小来判断,可初步得出长春土样中分离的号菌降解纤维素的能力强些。这可能是由于长春土样的采集地点富含丰富的纤维素,更适合降解纤维素较强的菌生存,所以较易筛出降解纤维素强的菌。标准曲线的绘制按照实验方法,取支比色管,按表顺序分别加入各种试剂......”

6、“.....用空白管溶液调零,在处,测定光密度值。所得值见表菌株水解圈直径培养天数菌落直径测试项目葡萄糖液蒸馏水含糖总量光密度表葡萄糖标准溶液光密度测定结果表水解圈直径情况由上述测得的数值绘制葡萄糖标准曲线,葡萄糖含量为横坐标,值为纵坐标。葡萄糖标准曲线如图发酵条件优化结果选取分解纤维素能力较强的号菌株进行发酵条件优化,号菌的菌落形态为绒毛状,初为白色后变为绿色,属于真菌。不同碳源对产酶条件的影响碳源是构成菌体细胞物质和代谢产物的主要成分......”

7、“.....按照的方法其他条件不变改变碳源种类,分别以葡萄糖滤纸麸皮羧甲基纤维素钠作为唯的碳源进行发酵实验并测定酶活,不同的碳源使酶活不同,影响结果如图所示。图葡萄糖标准曲线由图可看出,不同种类的碳源对纤维素酶的产生有很大的影响,以作为碳源时的产酶能力最强。可能是因为是可溶性碳源,没有结晶区,纤维素酶对其分解比较容易,所以在短时间内就产生了比较高的酶活。另外还可看出,以纤维素原料为碳源的产酶效果优于以葡萄糖为碳源的产酶效果,可以说明纤维素酶的确是诱导酶......”

8、“.....不同氮源对产酶条件的影响氮是组成蛋白质和核酸的主要元素。酶的本质是蛋白质,微生物的生长代谢也离不开氮源。虽然氮源并不作为纤维素酶的诱导物,但对菌体的迅速增长有很重要的作用,有助于缩短培养时间,因此氮源种类对产酶有较大的影响。分别采用不同种类的氮源实验,结果见表。氮源种类酶活尿素大豆粉硫酸铵蛋白胨硫酸铵蛋白胨酵母膏图碳源对号菌产纤维素酶的影响表氮源对号菌产纤维素酶的影响由表可以看出......”

9、“.....但是有机氮源的利用效果优于无机氮源,利用各种有机氮源时的酶活相差不大,以酵母膏的利用最好。其中以蛋白胨和费尚芬,鹿宁,刘坤,等白腐菌纤维素酶高酶活菌株的筛选安徽农业科学王亚林,严建芳,吴灵英,等稻草发酵菌种得筛选与组配研究饲料研究,,刘春芬,贺稚非等纤维素酶及应用现状粮食与油脂,年第期外山信男等纤维素酶研究进展发酵工业杂志刘小洁,何国庆,陈启和康氏木霉纤维素酶发酵培养基的优化浙江大学学报吴旻,杨树林纤维素酶高产菌株的选育南京理工大学......”

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