1、“.....引物合成和测序工作为上海英骏公司完成。氨苄青霉素购自南京创瑞公司，使用浓度为。形态特征观察南京农业大学硕士学位论文培养方法对土壤可培养细菌多样性的影响及两株新菌的初步鉴定革兰氏染色反应用结晶紫草酸铵染色方法。扫描电子显微镜观察菌体细胞形态的方法参照文献等人方法进行，所用仪器为日立,。生理生化特性测定,生长温度的测定以的接种量，将新鲜菌液接种于液体培养基中，在不同的温度下，摇床培养，各自设置个重复，用可见光分光光度计测定其吸光值，检测其生长温度范围和最适生长温度。耐受范围和最适值测定以的接种量......”。

2、“.....各自设置个重复摇床培养天后，用可见光分光光度计测定其吸光值，检测其范围和最适生长值。耐盐性测定以的接种量，将新鲜菌液接种于含有盐浓度范围为，，以的梯度向上增加的培养基中，各自设置个重复摇床培养天和天，用可见光分光光度计测定其吸光值，检测其能适应的盐浓度范围和最适的盐浓度。碳源利用实验培养基即无机盐培养基，，。以的接种量，将新鲜菌液接种于装有含有的不同的碳源，包括蔗糖半乳糖果糖麦牙糖山梨醇阿拉伯糖蜜三糖核糖甘露醇乳糖甘露糖肌醇葡萄糖木糖甜醇的液体无机盐培养基中，且做份不加碳源的液体无机盐培养基为空白对照，各自设置个重复摇床培养天和天......”。

3、“.....比对照管浑浊为阳性反应。明胶液化能力测定培养基蛋白胨，明胶，。将菌株用穿刺接种法接种于明胶培养基中，设置个重复，另留两管不接种第三章的初步鉴定做对照，放下培养，分别在及，观察次液化程度。观察前应将菌种管冷冻分钟。淀粉水解测定培养基蛋白胨，牛肉膏，氯化钠，可溶性淀粉，。试剂碘液取新鲜菌株点种于上述平板上，恒温培养箱中培养天，形成明显菌落后，在培养基表面滴加碘液，轻轻旋转，使碘液均匀铺满整个平板。若菌落周围出现无色透明区，而其他部位培养基呈蓝色为阳性。抗生素敏感性测定在固体培养基上均匀涂布为左右的待测菌液后......”。

4、“.....置恒温培养箱中培养后，观察菌的生长情况，记录抑菌透明圈直径。抗生素药敏纸片的种类及每片有效含量分别为多粘菌素纸片，链霉素纸片纸片，四环素纸片，青霉素纸片，庆大霉素纸片，氧氟沙星纸片，氨苄西林纸片，红霉素纸片，新霉素纸片，卡那霉素纸片，氯霉素纸片试验甲基红实验培养基即葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨，葡萄糖。试剂甲基红试剂以的接种量，将新鲜菌液接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中，设置个重复，另留两管不接种做对照摇床培养天后，取出部分菌液加滴甲基红试剂，判定结果。培养基呈红色为阳性，呈黄色为阴性。结果为阴性应适当延长培养时间再进行试验......”。

5、“.....试剂肌酸以的接种量，将新鲜菌液接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中，设置个重复，另留两管不接种做对照摇床培养天后，取培养液和南京农业大学硕士学位论文培养方法对土壤可培养细菌多样性的影响及两株新菌的初步鉴定等量相混，加少许肌酸，或更长时间后培养基若出现红色则为阳性。硫化氢产生试验培养基蛋白胨，牛肉膏，氯化钠，半胱氨酸，。以的接种量，将新鲜菌液接种于上述培养基中，然后用无菌镊子夹取经的醋酸铅浸透且已灭过菌的纸条用橡皮塞塞紧，使悬挂于管中，下端接近培养基表面，不接触液面，设置个重复，另留两管不接种做对照，恒温培养箱中培养。培养天......”。

6、“.....纸条变黑者为阳性，反之，不变者为阴性。实验的测定培养基蛋白胨，氯化钠，。底物灭过菌的。基础培养基冷却于后，加使终浓度为，倒平板，划线接种培养物于平板，培养至天，每天观察，在菌生长的周围有模糊的晕圈者为阳性，否则为阴性。吲哚实验培养基胰胨水溶液，。试剂吲哚试剂以的接种量，将新鲜菌液接种于上述培养基中，设置个重复，另留两管不接种做对照摇床培养。在，天的培养液中加入乙醚滴使之呈明显乙醚层，充分振荡使吲哚溶于乙醚中，静置片刻，等乙醚层浮出培养液上面时，沿管壁慢慢加入吲哚试剂，不需摇动。如有吲哚存在，则乙醚层呈现玫瑰红。过氧化氢酶试验培养基培养基。试剂过氧化氢溶液......”。

7、“.....在洁净玻片上滴加过氧化氢溶液，再用接种环挑取固体培养基上培养的菌落在过氧化氢溶液中研磨，内产生大量气泡为阳性，否则为阴性。硝酸盐还原试验培养基蛋白胨，牛肉膏，氯化钠。第三章的初步鉴定试剂格里斯氏试剂液液，二苯胺试剂以的接种量，将新鲜菌液接种于硝酸盐培养基中，设置个重复，另留两管不接种做对照摇床培养。吸取天的培养液于白瓷盘小窝中，再各加滴格里斯氏试剂液液，若溶液出现红色则为阳性。若无红色出现，则可加滴二苯胺试剂，此时若不出现蓝色，则仍然为阳性，否则为阴性。产氨实验培养基蛋白胨，。试剂试剂以的接种量，将新鲜菌液接种于上述培养基中，设置个重复......”。

8、“.....吸取天的培养液于白瓷盘小窝中，加入试剂数滴，出现黄褐色沉淀为阳性，否则为阴性。全自动细菌鉴定系统分析脂肪酸使用美国公司全自动细菌鉴定系统对待测细菌进行军体脂肪酸成分分析，具体方法如下溶液配制溶液Ⅰ克溶于甲醇及蒸馏水中溶液Ⅱ浓盐酸，甲醇溶于蒸馏水溶液Ⅲ正己烷与乙醚混合均匀溶液Ⅳ克溶于蒸馏水溶液Ⅴ饱和溶液。提取方法挑取适量菌苔，置于螺口玻璃瓶中，加入溶液Ⅰ，拧紧螺盖，沸水浴，取出振荡，再度拧紧螺盖，继续沸水浴完成皂化待样品管冷却后，加入溶液Ⅱ，盖严振荡，随后精确控制水浴进行甲酯化，立即置于冰面冷却此步骤需严格控制温度和时间......”。

9、“.....快速振荡左右，弃去下层水相，萃取出脂肪酸甲酯④在剩余有机相中加入溶液Ⅳ及几滴溶液Ⅴ，快速振荡，取上层有机相气相色谱样品瓶中备用，注意勿将下层水相吸入，以保护色谱柱。分析方法气相色谱仪，同时配有分流和不分分流进样口，氢火焰离子化检测器及气相色谱化学工作站色谱柱为柱，长，内径，液膜厚度炉温设置为二阶程序升温起始温度，每五分钟升至，随后以﹒升至，维持进样口温度，载气为氢气，流速﹒，分流进样模式，分南京农业大学硕士学位论文培养方法对土壤可培养细菌多样性的影响及两株新菌的初步鉴定流比，进样量为，检测器温度，氢气流速﹒，空气流速﹒......”。