1、“.....所以本实验在进行基因测序之前,进行了验证,电泳。图基因测序,各基因序列完全正确后,进行下面的实验。讨论图同源重组示意图线性片段是最终同源重组的关键,当染色体基因被基因所切割后,先行片段上的同源臂将与重组菌染色体上的基因进行结合,然后我们想要改变的基因将会被线性片段所替换......”。
2、“.....体和质粒表菌株和质粒菌株和质粒基因型或表现型来源或文献博迈特培养基与常用溶液大肠杆菌培养基培养基高压灭菌胰蛋白胨酵母提取物北京电子科技职业学院生物工程学院毕业论文第四章基因同源重组常用溶液与试剂溶液定溶至溶液冰醋酸定溶至引物验证引物引物序列长度仪器仪超微量分光光度计电转仪北京电子科技职业学院生物工程学院毕业论文第四章基因同源重组方法感受态的制备准备工作灭菌或质量分数为甘油预先置于......”。
3、“.....挑取菌加入到无抗培养基中过夜培养取过夜培养的培养基加入到培养基培养,至制备感受态在高速冷冻离心机条件下离心用无菌预冷过的水洗涤重悬条件下离心,倒去上清夜。重复次用质量分数为甘油溶液溶解,并置于超低温冰箱冻存。质粒的电转化取质粒加入步骤中的管感受态中,小心混匀后将菌体全部转移至预冷的电转杯中电转立即向电转杯中加入,之后全部转入管中,于培养,重悬细胞下离心......”。
4、“.....将菌体在剩下的溶液中混匀,涂布于抗性平板上于过夜培养。感受态的制备挑取菌加入到无抗培养基中过夜培养取过夜培养的培养基加入到培养基培养,至每管中加入的阿拉伯糖,至终浓度。摇床培养到感受态制备参见第四章。北京电子科技职业学院生物工程学院毕业论文第四章基因同源重组各基因片段的同源重组先取质粒和线性片段质粒加入步骤中的管感受态中,小心混匀后将菌体全部转移至预冷的电转杯中......”。
5、“.....之后全部转入管中,于培养,重悬细胞而后按照的步骤,作组只加有质粒的电转作为阴性对照下离心,去掉部分上清液,将菌体在剩下的溶液中混匀,涂布于抗性平板上于培养至出现单菌落。重组验证菌落的反应体系与反应条件表退火温度梯度的条件优化的反应体系与反应条件......”。
6、“.....反应体系参见第四章反应条件预变性变性温度表退火延伸个循环后补充延伸保存的菌落反应体系与反应条件......”。
7、“.....最终发现染色体上的突变并没有造成色氨酸产量的改变。北京电子科技职业学院生物工程学院毕业论文参考文献参考文献马先勇同源重组技术研究进展生物工程进展,韩聪同源重组技术研究进展中国生物工程杂志,方锐介导的基因组定点编辑技术生物化学与生物物理进展......”。
8、“.....向编辑新技术遗传唐志如同源重组法敲出发光光状杆菌晶体翻白基因和基因组学与应用生物学蒋婕大肠杆菌和基因敲除的构建生化与生物工程付喜爱细菌重组技术的应用及其影响因素动物医学进展陈欣同源重组敲除和对大肠杆菌发酵生产氨基葡萄糖的影响生物工程学报陈彬利用进行基因编辑生物化学与生物物理进展李苗苗两种基因定点敲除技术和在南介中的应用遗传李敏种特效的构建同源重组片段的方法融合中国生物工程杂志肖利......”。
9、“.....从立体实验设计分析以及些观点的提出和问题的探讨中,都给于我很大的帮助。感谢李晔老师平时对我课题立体的操劳,以及对我的课题进度的关心......”。
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