1、“.....其中正副教授人,讲师人,中高级技术人员比例。项目组人员专业结构职称结构项目组科研人员人,主要由生物化学与分子生物学专业微生物学专业人员组成,专业结构合理。科研人员中,教授人副教授人助教人研究生人。其中具有博士学位教师人。项目新增投资筹集情况本项目申请科研经费万元。四项目预期经济效益预期市场需求由于抗菌药物广泛应用和滥用,耐药菌株不断增加,对人类和动物健康造成了严重威胁。抗菌肽杀菌力强,抗菌谱广,不良反应少,不诱导产生耐药菌株,因此,必将成为今后抗菌药物主导产品。目前,国内还没有高效广谱抗菌肽产品面市,开发抗菌肽前景广阔。预期盈利水平该技术推广可产生明显经济效益。预期产业化前景本项目以现代生物技术方法研制具有较强广谱抗菌能力抗菌肽,并将其制成抗菌肽制剂。研究成果实用性强,易于转化。在产品研制工球菌流感病毒疱疹病毒为受抑菌。将大肠杆菌等受抑菌培养后分别加入到平皿中......”。
2、“.....再将浸透被测样品液滤纸片放在培养基表面,标记后置于恒温箱中培养,观察抑菌效果,测定抑菌圈直径,了解抗菌肽抗菌谱。将抗菌肽作为饲料添加剂进行动物实验。项目技术质量指标项目产品达到主要技术性能指标执行质量标准通过国家相关行业许可认证等项目达到目标构建出抗菌肽酵母高效表达体系,大量表达抗菌肽。研制出具有自主知识产权高效广谱抗菌肽制剂。考核指标该酵母表达体系对抗菌肽表达稳定,表达量重复性。抗菌肽抗菌活性高,抗菌谱广。抗菌肽。其是直接从生物体内分离抗菌肽,用这种方法不能获得大量抗菌肽。其二是根据已发现抗菌肽基因序列设计引物在不同生物中通过技术克隆抗菌肽基因,该方法只能在不同生物中获得该抗菌肽同源基因,而不能获得新抗菌肽基因。在本项目中,我们将前期工作中获得抗菌肽基因与载体连接,构建抗菌肽酵母高效表达体系,以工程菌工业化发酵生产抗菌肽......”。
3、“.....计算机检索结果表明,人们对昆虫抗菌肽进行了较多研究,而对鱼类抗菌肽研究很少。目前国内只有厦门大学最近采用传统方法从海水养殖鲈鱼中分离出种抗菌肽基因,但并未对该基因表达及其产物抗菌活性进行分析,也没有开发出基于鱼类抗菌肽基因广谱抗菌肽制剂。本项目将开发出具有自主知识产权新型抗菌肽制剂。项目完成时至少可达到国内领先水平。项目技术方案论述生产技术工艺流程主要技术参数将采用技术从鱼类克隆抗菌肽全长基因与表达载体连接构建重组载体重组载体转入酵母筛选抗菌肽高效表达酵母体系大量表达抗菌肽抗菌肽抗菌活性和抗菌谱测定抗菌肽作为饲料添加剂进行动物实验重组表达载体构建将我们从淡水鱼中诱导表达抗菌肽基因与具有高效表达启动子表达载体连接,构建重组表达载体。抗菌肽基因酵母表达体系构建及高效表达系统筛选采用醋酸锂法将重组载体转入解脂耶氏酵母,构建抗菌肽基因酵母表达系统......”。
4、“.....抗菌肽大量表达。利用筛选到高效表达酵母菌发酵产生抗菌肽。抗菌肽分离纯化。离心收集表达上清液,采用硫酸铵沉淀抗菌肽。经层析,收集各个洗脱峰,用分析鉴定目多肽所在峰。将含有目多肽洗脱液用透析,选题的必要性项目所处技术领域产业政策自从青霉素被发现以来,人们对病原菌引起的感染性疾病不再束手无策,特别是内酰胺类抗生素的发现,对病原菌感染性疾病的治疗产生了革命性飞跃,抗生素已成为临床治疗病原菌感染的强有力武器。但是,随着抗菌药物的广泛应用和滥用,耐药菌株不断增加,使抗感染治疗陷入耐药菌危机之中。重点建设大学,人才资源丰富,科研力量雄厚。生命科学学院有专任教师人,其中正副教授人,讲师人,中高级技术人员比例。项目组人员专业结构职称结构项目组科研人员人,主要由生物化学与分子生物学专业微生物学专业人员组成,专业结构合理。科研人员中,教授人副教授人助教人研究生人。其中具有博士学位教师人......”。
5、“.....四项目预期经济效益预期市场需求由于抗菌药物广泛应用和滥用,耐药菌株不断增加,对人类和动物健康造成了严重威胁。抗菌肽杀菌力强,抗菌谱广,不良反应少,不诱导产生耐药菌株,因此,必将成为今后抗菌药物主导产品。目前,国内还没有高效广谱抗菌肽产品面市,开发抗菌肽前景广阔。预期盈利水平该技术推广可产生明显经济效益。预期产业化前景本项目以现代生物技术方法研制具有较强广起到了至关重要作用。因此,鱼类先天免疫系统中极有可能存在高效广谱生物抗菌肽。我们在前期工作中克隆了高效广谱鱼类抗菌肽基因,本项目拟通过酵母表达获得抗菌肽,并将抗菌肽添加到饲料中,为日益严重鱼类和畜禽病害防治开辟新途径。项目所处技术领域技术发展现状由于抗菌肽具有独特抗菌机制,广谱杀菌作用,高效抗菌活性以及靶菌株难以产生抗性等优点,因此有着广阔开发应用前景,是目前国际学术研究活跃领域之......”。
6、“.....国外科学家作了大量工作,对抗菌肽研究已经取得了许多进展。法国科学家蒂马克先生于年月创建了公司,目是尽可能得到不同类型抗菌肽分子。迄今国外科学家已在不同生物中发现了多种抗菌肽,我国在抗菌肽研究方面起步较晚,仅有少量报道。大量结果显示不同抗菌肽其抗菌活性和抗菌谱存在很大差异,因此继续寻找高效广谱生物抗菌肽,是广大生命科学工作者努力方向。项目技术先进性,对相关领域技术进步推动作用本项目采用是先进分子生物学研究技术。用基因克隆技术将我们从鱼肝脏中分离抗菌肽基因与具有高效表达启动子表达载体连接,构建重组分子。然后用醋酸锂法将重组分子转入解脂耶氏酵母中,筛选高效表达抗菌肽工程菌,以工程菌工业化发酵生产抗菌肽,进而开发出高效广谱新型抗菌剂。该项目实施对相关领域技术进步有定推动作用。项目目前进展情况。我们已进行了前期工作,用引起人畜共患病多种微生物诱导鱼......”。
7、“.....并使用技术克隆了它们全长基因。这些工作为本项目实施奠定了基础。二技术方案论述项目技术关键点或创新点论述,项目完成时达到技术水平目前,人们主要以两种方法获得抗菌肽。其是直接从生物体内分离抗菌肽,用这种方法不能获得大量抗菌肽。其二是根据已发现抗菌肽基因序列设计引物在不同生物中通过技术克隆抗菌肽基因,该方法只能在不同生物中获得该抗菌肽同源基因,而不能获得新抗菌肽基因。在本项目中,我们将前期工作中获得抗菌肽基因与载体连接,构建抗菌肽酵母高效表达体系,以工程菌工业化发酵生产抗菌肽,用这种方法可获得大量新高效广谱抗菌肽。计算机检索结果表明,人们对昆虫抗菌肽进行了较多研究,而对鱼类抗菌肽研究很少。目前国内只有厦门大学最近采用传统方法从海水养殖鲈鱼中分离出种抗菌肽基因,但并未对该基因表达及其产物抗菌活性进行分析,也没有开发出基于鱼类抗菌肽基因广谱抗菌肽制剂......”。
8、“.....项目完成时至少可达到国内领先水平。项目技术方案论述生产技术工艺流程主要技术参数将采用技术从鱼类克隆抗菌肽全长基因与表达载体连接构建重组载体重组载体转入酵母筛选抗菌肽高效表达酵母体系大量表达抗菌肽抗菌肽抗菌活性和抗菌谱测定抗菌肽作为饲料添加剂进行动物实验重组表达载体构建将我们从淡水鱼中诱导表达抗菌肽基因与具有高效表达启动子表达载体连接,构建重组表达载体。抗菌肽基因酵母表达体系构建及高效表达系统筛选采用醋酸锂法将重组载体转入解脂耶氏酵母,构建抗菌肽基因酵母表达系统。采用法和法从转录和翻译两个水平上筛选抗菌肽高效表达酵母。抗菌肽大量表达。利用筛选到高效表达酵母菌发酵产生抗菌肽。抗菌肽分离纯化。离心收集表达上清液,采用硫酸铵沉淀抗菌肽。经层析,收集各个洗脱峰,用分析鉴定目多肽所在峰。将含有目多肽洗脱液用透析......”。
9、“.....构建重组表达载体。月将重组载体转入解脂耶氏酵母,构建抗菌肽基因酵母表达系统。月筛选高效表达抗菌肽酵母系统。月酵母发酵条件优化。年月采用发酵法生产抗菌肽。月抗菌肽分离和纯化。月抗菌肽抗菌活性和抗菌谱测定。年月含抗菌肽饲料配制。月动物实验。月课题总结鉴定。项目经费预算情况项目投资总额项目已完成投资项目须新增投资及投资构成和投资预算申请科技三项经费使用预算见附表。申请经费总额万元。其中仪器设备购置费万元材料样品费万元试验费检测费万元资料调研费万元鉴定费万元。三项目实施支撑条件项目技术来源课题申请人在法国国家农业研究中心分子遗传学实验室工作期间,参加了欧盟资助有关微生物抗菌肽在解脂耶氏酵母中表达研究课题,掌握了抗菌肽研究相关技术,为本课题顺利完成奠定了技术基础。项目实验检测条件申请人所在实验室为江西省生物化学与分子生物学重点实验室......”。
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