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MALDI-TOFMS检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌及其表型的临床应用(临床检验论文) MALDI-TOFMS检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌及其表型的临床应用(临床检验论文)

格式:word 上传:2023-05-15 07:54:00

《MALDI-TOFMS检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌及其表型的临床应用(临床检验论文)》修改意见稿

1、“.....旨在为临床快速合理有效地选择抗菌药型的临床应用研究检验医学与临床,。检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌及其表型的临床应用临床检验论文。的检测效能评估方法检测产碳青霉烯酶肠杆菌效能进行评估对传统方法和检测产碳青霉烯酶的效能行统计学分析,结果显示传统方法检测符合率为,为,为,分别经精确检验分析,种方法在检测产碳青霉烯酶细菌效能上差异无统计学意义,见表在检测时程方面,与传统方法比较,可提早出具检验报告,与比较可提早出具结果。图亚胺培检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌及其表型的临床应用临床检验论文等表型在本研究中未涉及,数量少等,加上在产碳青霉烯酶肠杆菌科检测过程中尚难捕获水解产物或代谢产物的生成,表明反应体系的组成和反应条件的选择还需进步优化整合和完善......”

2、“.....参考文献龚林,刘小丽,许慧琼,等耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分子流行病学研究中国感染控制杂志,李翠翠,胡同平碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的耐药机制研究进展检验医学与临床,李鑫,杨继勇碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌分布与流行特征研究进展点细菌分布暴发流行趋势和临床治疗用药方案各不相同,因此,耐药性细菌表型的检测也是临床合理用药的项重要实验参考依据。本研究在反应体系中添加氨基苯硼酸和,将待测菌与亚胺培南共同孵育后,观测特征质谱峰的变化,以此检测区分产碳青霉烯酶细菌表型。结果显示,传统方法和用于表型检测的符合率分别为和,检测符合率差异无统计学意义,但检测时程比传统方法提早,比提前。因各基因型别的菌株样本量有限,本研究未对具体的型别,如型型和与碳青霉烯类抗菌药物共同孵育,之后行检测,观察共同孵育前后抗菌药物的质谱图的变化......”

3、“.....则可出现原有特征峰的锐减或消失理想的条件下,还可伴有新产物的生成。前期实验中,本课题组遴选碳青霉烯类抗菌药物代表性药物厄他培南亚胺培南。预试验结果显示,美罗培南质谱特征峰在处,与基质峰接近,检测易受干扰厄他培南质谱峰多而杂,增加实验判断难度与前两者相比,亚胺培南特征峰在处,峰形为清晰的单峰,因此,选择亚胺培南为下步观测研究的对象。将待测菌与亚胺培南共同孵育后,表基因引物序列循环条件预变性循环,个循环延伸。方法检测内部校准基质进行内部校准,参考峰值为,每个峰最大偏差不超过,则视为校准合格。菌悬液与亚胺培南混合液的制备将待测菌落配制成麦氏浊度菌悬液,将亚胺培南药敏纸片配制成,分别取菌悬液与亚胺培南进行等体积混合,孵育,离心,备用......”

4、“.....特别是近年来在基因分型分析病原体鉴系反应体系为。双蒸水,细菌模板,上游引物,下游引物,。结果药敏复核检测株碳青霉烯类抗菌药物耐药菌株的亚胺培南值均,经纸片扩散法法复核检测,复核率为,具体如表。传统检测方法实验结果显示,其检测产碳青霉烯酶细菌的灵敏度为特异度为符合率为,以上结果根据标准进行判读。实验结果显示,检测出产丝氨酸碳青霉烯酶株产金属内酰胺酶株混合型株,株无法判定产何种碳青霉烯酶,表型区分符合率为。检测产碳青霉烯酶肠杆菌科究中国感染控制杂志,李翠翠,胡同平碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的耐药机制研究进展检验医学与临床,李鑫,杨继勇碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌分布与流行特征研究进展中华微生物学和免疫学杂志,程国平,简雪峰,许德英,等在碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌流行病学分析中的应用南京医科大学学报自然科学版,刘建华,高婷......”

5、“.....等耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌耐药基因检测及分子特征分析新疆医学,谢小芳,周惠琴,郑毅,等检测肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的效果评估中华检验医学杂志,冯丽娜,李从荣差异无统计学意义,但检测时程比传统方法提早,比提前。因各基因型别的菌株样本量有限,本研究未对具体的型别,如型型和型等的检测效能进行评估和分析。综上所述,传统细菌耐药性检测方法费时费力操作难度大,质量不统,难以满足临床快速检测并出具病原菌耐药检测结果的需求。技术的应用虽尚处于探索研究阶段,但其快速精准的特点已被各国研究者接受,并达成共识。本研究评估了检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌和表型的临床应用可行性,结果显示多而杂,增加实验判断难度与前两者相比,亚胺培南特征峰在处,峰形为清晰的单峰,因此,选择亚胺培南为下步观测研究的对象。将待测菌与亚胺培南共同孵育后,行检测......”

6、“.....结果显示,产碳青霉烯酶肠杆菌的检出率灵敏度和特异度分别为和检测时限比传统方法上提早,比提早。实验过程中,未观测到水解产物峰的出现,分析原因,可能与反应体系的组成和水解产物不易捕获有关。等的研究也出现类似情况,该项研究认为未观测到水解产物峰系实验环境反应体系实验检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌及其表型的临床应用临床检验论文细菌及其表型的临床应用临床检验论文。基因检测待测菌核酸提取待测标本接种至血培养,过夜培养,挑取纯化菌落配臵成麦氏浊度菌悬液,取菌悬液,高速离心后取菌体沉淀,使用细菌基因组提取试剂盒提取基因组,保存备用。基因引物扩增包括种碳青霉烯酶基因和,引物由新疆子琦生物有限公司委托北京博迈德基因技术有限公司合成,具体引物序列见表。反应体系反应体系为。双蒸水,细菌模板,上游引物,下游引物......”

7、“.....将亚胺培南药敏纸片配制成,分别取菌悬液与亚胺培南进行等体积混合,孵育,离心,备用。基因检测待测菌核酸提取待测标本接种至血培养,过夜培养,挑取纯化菌落配臵成麦氏浊度菌悬液,取菌悬液,高速离心后取菌体沉淀,使用细菌基因组提取试剂盒提取基因组,保存备用。基因引物扩增包括种碳青霉烯酶基因和,引物由新疆子琦生物有限公司委托北京博迈德基因技术有限公司合成,具体引物序列见表。反应提前。见表。表种方法检测碳青霉烯酶不同表型检出符合率比较讨论因其具有高灵敏度分析速度快分辨率高等特点,特别是近年来在基因分型分析病原体鉴定质谱成像等应用的发展,已成为目前微生物鉴定工作中重要的组成部分,年获中国批准,年获美国批准,微生物临床检验已经进入质谱时代。本研究以临床常用的碳青霉烯类抗菌药物为观察对象,评估在病原菌耐药性检测方面应用的可行性。业已证实......”

8、“.....可作用于碳青霉烯类抗菌药物的官能团,即内酰胺环,通过水解作用,打开检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的应用中华微生物学和免疫学杂志,李翔,李慧铭,刘正祥,李凯,伏建峰检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌及其表型的临床应用研究检验医学与临床,。检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌及其表型的临床应用临床检验论文。表基因引物序列循环条件预变性循环,个循环延伸。方法检测内部校准基质进行内部校准,参考峰值为,每个峰最大偏差不超过,则视为校准合格。菌悬液与亚胺培南混合液的制备将待测菌落配检测效能与其他两种方法相当,但检测时程大幅缩短,可提前出具耐药检测报告,利于感染性疾病的早期诊疗,。当然,本研究涵盖的碳青霉烯酶表型种类和数量有限,如等表型在本研究中未涉及,数量少等......”

9、“.....表明反应体系的组成和反应条件的选择还需进步优化整合和完善。但以上局限和不足均不影响作为种快速有效的病原菌耐药性检测技术在临床的推广应用。参考文献龚林,刘小丽,许慧琼,等耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分子流行病学材料及其浓度选择等因素所致。如前所述,碳青霉烯酶是指能够水解碳青霉烯类抗菌药物的内酰胺酶,其可随细菌胞体内氨基酸位点的位移而产生出不同的表型,每种表型的耐药特点细菌分布暴发流行趋势和临床治疗用药方案各不相同,因此,耐药性细菌表型的检测也是临床合理用药的项重要实验参考依据。本研究在反应体系中添加氨基苯硼酸和,将待测菌与亚胺培南共同孵育后,观测特征质谱峰的变化,以此检测区分产碳青霉烯酶细菌表型。结果显示,传统方法和用于表型检测的符合率分别为和,检测符合胺键,使内酰胺环开放,致使抗菌药物官能团结构稳定性受损,进而致药效失活......”

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