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胶质细胞神经营养因子诱导骨髓间充质干细胞向功能性神经元分化的机制(神经内科论文) 胶质细胞神经营养因子诱导骨髓间充质干细胞向功能性神经元分化的机制(神经内科论文)

格式:word 上传:2023-05-15 03:47:00

《胶质细胞神经营养因子诱导骨髓间充质干细胞向功能性神经元分化的机制(神经内科论文)》修改意见稿

1、“.....免疫荧光技术检测各组细胞中及表达。高刺激诱导分化后细胞去极化反应,标记分化后细胞突触囊泡活动。结果与结论腺量分析,重复实验次,并以柱形图表示统计学分析结果。表与内参基因引物序列检测骨髓间充质干细胞增殖活性将第代骨髓间充质干细胞以孔密度接种于块孔板,随机分为组,每组个复孔,按上述方法转染各组细胞,未转染组加入等体积培养液,同条件下在培养时每组取出块孔板,避光下加入,恒温箱中孵育后,弃上清液,每孔加入甲基亚砜,振荡,酶标仪检测各孔吸光度值,重复次实验,收集数据并进行统计学分析。免疫荧光检测及表达将第代骨髓间充质干细胞以孔密度接种于预先臵有细胞爬片的孔板中,实验分组及转染培养方法同前......”

2、“.....该实验研究采用腺病毒转染方式将基因导入骨髓间充质干细胞,并以此诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞自行分化,鉴定分化过程中神经元特异性蛋白表达及分化后神经元样细胞突触囊泡运输功能,同时检测骨髓间充质干细胞分化过程中信号转导通路关键分子蛋白的表达,以期为研究促进骨髓间充质干细胞向成熟神经元分化的分子机制奠定定的实验基础。荧光定量检测骨髓间充质干细胞中基因相对表达量取第代骨髓间充质干细胞,以孔细胞密度接种于孔板,随机分为转染组转染组及未转染对照组后,骨髓间充质干细胞表达成熟神经元标记蛋白,细胞胞体皱缩明显,胞体周围出现神经元轴突样结构,并在细胞胞质中检测到胞核中检测到表达,而组及未转染对照组未见表达且细胞仍维持梭形形态体外培养后,组细胞呈现典型的神经元突起或轴突并相互连接成网状结构......”

3、“.....给予高刺激诱发细胞产生动作电位后轴突发生突触囊泡活动,可见红色荧光逐渐衰减,同条件下转染组及未转染组细胞未见荧光标记的突触囊泡活动结果表明,胶质细胞神经营养因子材料和方法设计细胞学观察实验。时间及地点实验于年至月在扬州大学医学院及苏北人民医院实验中心完成。材料实验动物周龄大鼠只用于骨髓间充质干细胞原代细胞培养,雌雄不限,体质量,由扬州大学比较医学中心实验动物中心提供,许可证号为苏。摘要背景胶质细胞神经营养因子在诱导骨髓间充质干细胞体外定向分化及促进神经元轴突再生过程中起到重要作用。目的观察过表达胶质细胞神经营养因子基因诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化情况,检测分化后细胞突触功能及信号通路组分表达,初步探索骨髓间充质干细胞向成熟神经元分化机制。方法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞......”

4、“.....而转染组与未转染对照组细胞增殖活力未见明显差异,见图。体外培养骨髓间充质干细胞表达神经元特异性蛋白及信号通路组分蛋白免疫荧光检测结果表明转染组骨髓间充质干细胞体外培养后可见神经元核蛋白及信号通路中表达,但未见表达,该组内细胞胞体收缩,胞体周围可见神经元突触样结构,而转染组及未转染组未见转录因子形成异聚体调控核内靶基因表达,调控间充质干细胞向神经元分化,。等报道红景天苷通过激活信号通路进而促使骨髓间充质干细胞表达神经元特异性蛋白并维持其分化状态,亦有研究采用特异性阻断信号通路后神经干细胞向神经元分化受到明显抑制,可见信号通路与间充质干细胞向神经元分化密切相关......”

5、“.....通过连续半换液可逐步去除悬浮杂质细胞,持续体外培养条件下群聚贴壁生长细胞逐渐增多,至第代贴壁生长细胞融合成片,以梭形或扁平样形态为主,见图。骨髓间充质干,标尺为是近年来发现的种神经营养因子,广泛分布于脊髓,是轴突再生的种重要神经营养因子,对中枢神经系统退行性疾病脊髓损伤后神经功能恢复以及诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化起到重要作用,。该实验转染组相对表达量显著提高,免疫荧光结果表明在无外源性诱导剂作用下,培养后检测到神经元特异性标记蛋白表达,该组内细胞胞体收缩,胞体周围可见神经元突触样结构,而转染组及未转染组相对表达量无明显增高,未见表达。体外培养后转染组细胞表达成熟神经元标记蛋白,该组内细胞胞体皱缩明显,胞体周围可见神经元,......”

6、“.....等在研究中以质粒为载体,将基因导入骨髓间充质干细胞,但转染后有效转染率仅等研究发现脂质体可促进骨髓间充质干细胞持续稳定过表达基因,但结果显示基因表达量较对照组仅增加倍,且过表达基因对骨髓间充质干细胞的存活及诱导分化作用尚缺乏进步研究。该实验研究以载基因重组腺病毒转染骨髓间充质干细胞,结果表明转染组基因相对表达量显著提高,转染后该组细胞相对表达量胞内信号转导蛋白显著增加,而作为核内信号转导蛋白表达量亦明显增加,转染组细胞胞体皱缩明显,胞体周围可见神经元典型单级或双极轴突样结构。转染组及未转染组未见及表达,见图。胶质细胞神经营养因子诱导骨髓间充质干细胞向功能性神经元分化的机制神经内科论文......”

7、“.....通过连续半换液可逐步去除悬浮杂质细胞,持续体外培养条件下群聚贴壁生长细胞逐渐增多,至第代贴壁生长细胞融合成片,以梭形或扁平样形态为主,见图。骨髓间充质干细胞分子表胶质细胞神经营养因子诱导骨髓间充质干细胞向功能性神经元分化的机制神经内科论文细胞分子表型鉴定结果流式细胞技术鉴定结果显示第代贴壁生长细胞高表达,低表达,见图。荧光定量检测各组细胞中基因相对表达量转染组在转染后可见基因表达,随培养时间延长,基因表达量显著提高,并可持续至转染后,其中转染后转染组细胞表达量较对照组提高近倍,与转染组及未转染对照组比较差异有显著性意义,而转染组与未转染对照组在各检测时间点基因相对表达量无明显增高,差异无显著性意义,见图。胶质细胞神经营养因子诱导骨髓间充质干细胞向功能性神经元分化的机制神经内科论文染色......”

8、“.....决定细胞分化增殖及生长的调节。是由基因编码的类分泌型糖蛋白,为信号通路中的配体蛋白分子,通过自分泌或旁分泌与位于细胞膜上的受体相结合,最终激活细胞内相关靶基因表达,。在细胞内的通路分为经典的信号通路非经典通路包括通路和通路。经典的信号传导通路是条相对保守的信号通路,该信号通路激活后可引起胞质内未被磷酸化的游离大量积聚转位进入核内与程中信号转导通路关键分子蛋白的表达,以期为研究促进骨髓间充质干细胞向成熟神经元分化的分子机制奠定定的实验基础。材料和方法设计细胞学观察实验。时间及地点实验于年至月在扬州大学医学院及苏北人民医院实验中心完成。材料实验动物周龄大鼠只用于骨髓间充质干细胞原代细胞培养,雌雄不限,体质量,由扬州大学比较医学中心实验动物中心提供,许可证号为苏......”

9、“.....而转染组与未转染对照组细胞典型单级或双极轴突样结构,而转染组及未转染组细胞未见表达。免疫荧光结果表明在无外源性诱导剂情况下过表达基因的骨髓间充质干细胞可自行向成熟神经元分化并实现满意的分化效率。已有研究证实是成熟神经元的标志蛋白之,广泛存在于胞浆和轴突,不仅为细胞的结构完整与功能正常运行提供重要保障,并且可以在定程度上反映轴突活性。实验结果表明在基因持续高表达作用下骨髓间充质干细胞分化过程中表达的同时细胞胞体逐渐皱缩并产生神经元轴突样结构,具备了成熟神经元的结构特点及功能性蛋白组成基础。图体外培养各组骨髓间充质干细胞表达神经元特异性蛋白及信号通路组分蛋白免疫荧光较对照组提高近倍......”

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