1、“.....而未感染的正常细胞及空白载体组中呈阴性表达图。图细胞免疫组化成骨相关基因的表达实验组的可以检测到成骨相关基因骨涎蛋白骨桥蛋白型胶原骨钙蛋白的表达。而且实验组各成骨相关基因的表达明显高于正常对照组和空载体组。对空载体组和正常对照组各成骨相关基因的表达数据进行单因素方的形成,的表达更为明显,这说明可能参与牙周组织的发育。尚淑贤等研究发现在小鼠牙胚钟状期牙囊细胞质中只有的表达,而未见蛋白的表达。而且蛋白在前期牙本质和牙槽骨中有表达,但在成牙本质细胞成釉细胞和牙本质中,和蛋白均未见表达......”。
2、“.....。而是成骨特异性转录因子,它通过调控多种矿化相关蛋白,启动并促进成骨细胞分化,对成骨细胞早期分化起决定作用,。研究发现基因敲除小鼠表现为膜内骨及软骨内钙化的完全缺失,即使在的作用下,小鼠骨髓基质细胞在体内外均不能诱导为成骨细胞,说明较慢病毒感染将状态良好的细胞消化制成细胞悬液,以密度个孔接种到孔板中,次日换液,根据查阅文献及值测定结果,以加入慢病毒及终浓度,感染后,更换新鲜培养液,后观察各组细胞状态及绿色荧光的表达情况。外源基因表达慢病毒连接,臵冰箱过夜,次日转化感受态细胞......”。
3、“.....培养过夜,第天挑取单菌落进行菌落鉴定,将鉴定呈阳性的克隆接到液体培养基中摇菌过夜,次日提取质粒,进行酶切鉴定。最后将酶切鉴定呈阳性的克隆送测序。将构建成功的及空载体装,收集病毒液,采用荧光法测定病毒浓度。计算滴度公式如下感染形成单位平均阳性细胞数视野视野数孔病毒体积稀释倍数。表引物设计细胞培养人牙龈成纤维细胞取自年轻患者岁因手术切除的健康牙龈组织,经过传代培养,取代细胞用于实验。慢病毒介导核心结合因子表达。引物设计见表。方法重组慢病毒构建及包装以质粒为模板设计引物,并在目的基因上下游分别添加酶切位点和,引物设计见表,通过扩增目的基因......”。
4、“.....并回收所需酶切片段,利用连接,臵冰箱过夜,次日转化感受牙本质中,和蛋白均未见表达,由此推断是牙齿发育所必须的转录因子。因此我们选择作为研究因子,以期其在牙周组织再生方面有进步的研究。慢病毒感染将状态良好的细胞消化制成细胞悬液,以密度个孔接种到孔板中,次日换液,根据查阅文献及值测定结果,以加入慢病毒慢病毒介导核心结合因子基因感染对人牙龈成纤维细胞成骨特性的影响研究口腔科职称大量提取质粒,分别与包装质粒共转染细胞进行病毒包装,收集病毒液,采用荧光法测定病毒浓度......”。
5、“.....表引物设计细胞培养人牙龈成纤维细胞取自年轻患者岁因手术切除的健康牙龈组织,经过传代培养,取代细胞用于实算的滴度为,阴性对照滴度为。方法重组慢病毒构建及包装以质粒为模板设计引物,并在目的基因上下游分别添加酶切位点和,引物设计见表,通过扩增目的基因,将目的基因产物和慢病毒载体进行双酶切,并回收所需酶切片段,利用的作用下,小鼠骨髓基质细胞在体内外均不能诱导为成骨细胞,说明较有更直接的促进成骨作用。等对周龄雄性大鼠左上颌第磨牙行牙髓切断术后覆盖氧化物凝聚体,在术后第天发现大部分牙髓组织的细胞核中可以检测到......”。
6、“.....有研基因感染对人牙龈成纤维细胞成骨特性的影响研究口腔科职称。表实时荧光定量引物统计学方法以上各组实验至少重复次,采用检验,数据用均数标准误来表示,有统计学意义。结果慢病毒构建及包装慢病毒经酶切及测序检验其构建成功图,通过细胞包装病毒并收集病毒液。采用荧光法检测病毒滴度图,按照公式细胞,涂布于含有氨苄青霉素的培养板上,培养过夜,第天挑取单菌落进行菌落鉴定,将鉴定呈阳性的克隆接到液体培养基中摇菌过夜,次日提取质粒,进行酶切鉴定。最后将酶切鉴定呈阳性的克隆送测序。将构建成功的及空载体大量提取质粒......”。
7、“.....感染后,更换新鲜培养液,后观察各组细胞状态及绿色荧光的表达情况。外源基因表达慢病毒转染后,法提取细胞,并按照逆转录试剂盒说明将各组转化成,采用荧光定量检测细胞外源基因究还发现在牙囊和牙乳头中也都有表达而且随着牙齿的进步发育和牙根牙周组织的形成,的表达更为明显,这说明可能参与牙周组织的发育。尚淑贤等研究发现在小鼠牙胚钟状期牙囊细胞质中只有的表达,而未见蛋白的表达。而且蛋白在前期牙本质和牙槽骨中有表达,但在成牙本质细胞成釉细胞慢病毒介导核心结合因子基因感染对人牙龈成纤维细胞成骨特性的影响研究口腔科职称研究是最多的,因为它是家族成员中活性最强......”。
8、“.....并且在牙周组织再生和修复中发挥重要作用,。而是成骨特异性转录因子,它通过调控多种矿化相关蛋白,启动并促进成骨细胞分化,对成骨细胞早期分化起决定作用,。研究发现基因敲除小鼠表现为膜内骨及软骨内钙化的完全缺失,即使在经抗染色显示被感染的细胞核中可见棕褐色颗粒沉着,呈阳性表达,而未感染的正常细胞及空白载体组中呈阴性表达图。图细胞免疫组化成骨相关基因的表达实验组的可以检测到成骨相关基因骨涎蛋白骨桥蛋白型胶原骨钙蛋白的表达。而且实验组各成骨相关基因的表达明显高于正常对照组和空载体组。原骨钙蛋白的表达......”。
9、“.....并检测到基因蛋白的表达实验组中,的表达明显高于对照组和空载体组。结论外源性基因能够在人牙龈成纤维细胞中表达,并促进其向成骨细胞方向转化,为进步研究该基因及种子细胞分析,其结果显示无统计学意义,表明空载体组对成骨相关基因的表达无影响。见图。摘要目的研究慢病毒介导核心结合因子基因感染对人牙龈成纤维细胞成骨特性的影响。方法构建携带目的基因的慢病毒表达载体实验组,通过酶切测序验证其构建的转录因子。因此我们选择作为研究因子,以期其在牙周组织再生方面有进步的研究......”。
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