Ⅱ与其体外抗肝癌活性的谱效关系研究医学职称回归系数均大于，说明其对药效贡献相对较大并成正相关。美洲大蠊提取物Ⅱ与其体外抗肝癌活性的谱效关系研究医学职称。由图可知，以值排序，峰的值均大于，说明这些峰对样品的抗肝癌活性有重要影响。结合图可知，在大于的色谱峰中，峰的标准化回归系数大于，其与样品的抗肝癌活性成正相关瘤和肝损伤修复等作用。可见，美洲大蠊提取物的抗肝癌作用可能与这两类物质紧密相关。图样品的标准化回归系数图和对药效的贡献图法常用于预测中药或复方中各成分与药效的相关性，具有对样本容量和数据分布规律要求低计算简便且易程序化的特点。但该方法计算出的关联度只具有相对意义，只能反映化合物重复次，取平均值，计算样品对细胞的抑制率细胞抑制率溶剂对照组吸光度给药组吸光度溶剂对照组吸光度空白对照组吸光度。表样品中化学成分的分析结果表结果讨论有研究表明，以美洲大蠊为原料制得的美蠊精胶囊等药品的药理活性显著且临床应用广泛，但其化学成分研究较为薄弱，尚未找到特异性的活性物质，亦无细胞培养用完全培养基于培养箱中培养细胞培养条件下同。培养过程中，换次细胞培养液，传代细胞。样品对肝癌细胞活性的影响取对数生长期细胞，用完全培养基调整细胞密度至个，按孔接种至孔板中，培养后，吸出培养液，清洗次，加入项下个质量浓度的溶液给药题组前期已建立的指纹图谱研究方法，按项下色谱条件对批样品的指纹图谱进行分析。相关方法学考察内容见已发表文献。批样品的指纹图谱和对照指纹图谱见图，样品在正负离子模式下的基峰离子流图见图。根据标准品和相关文献，定性鉴定出个化合物，结果见表。从图和表可知，的指纹图谱中有个共有峰，其中峰含药物和溶剂对照组不含药物只含细胞，每组设个复孔。给药后继续培养，吸弃孔内培养液，清洗次，再加入溶液，轻轻拍匀，继续培养后，每孔添加，低速振荡，使用酶标仪在波长下检测各孔的吸光度。每组试验重复次，取平均值，计算样品对细胞的抑制率细方法联合分析与抗肝癌活性之间的谱效关系。结果表明，个共有峰中有个特征峰与样品抗肝癌活性的值大于，证明其具有相关性。但所有峰的值均未超过，表明其相关性不显著。其中，峰的值大于值大于且标准化回归系数均大于，说明其对药效贡献相对较大并成正相关。细胞培养用完全培养基于培养箱中培养技术在正负离子模式下对批美洲大蠊提取物进行整体分析，共得个共有峰并鉴定出个化合物，多为环肽类和核苷类成分。据报道，环肽类是具有抗癌抑菌抗凝和抗氧化等作用的类活性物质核苷类物质多具有抗病毒抗肿瘤和肝损伤修复等作用。可见，美洲大蠊提取物的抗肝癌作用可能与这两类物质紧密相关。图样品的美洲大蠊提取物Ⅱ与其体外抗肝癌活性的谱效关系研究医学职称分别为腺嘌呤苯丙氨酸肌苷环甘氨酸苯丙氨酸，由于其峰面积相对较大，推测均为样品的主要成分。细胞人肝癌细胞株由齐氏生物科技有限公司提供。方法与结果样品体外抗肝癌试验样品制备分别精密称取批样品各，溶于含胎牛血清的培养基以下简称完全培养基中，得到质量浓度为，再用完全培养基稀释成溶液，备与其体外抗肝癌活性的谱效关系研究医学职称。质谱条件采用电喷雾离子源以正负离子两种模式分别进行检测扫描范围，以甲酸钠进行质量实时矫正喷雾气体和干燥气体均为高纯度氮气碰撞气体氩气离子喷雾电压检测电压脱溶剂气温度锥孔气流量离子源温度。指纹图谱生成和共有峰指认按本课峰中，峰的标准化回归系数大于，其与样品的抗肝癌活性成正相关，峰的标准化回归系数小于，两者成负相关。和的联合分析将和的峰整合，发现样品抗肝癌活性的主要成分依次为峰未知化合物未知化合物环酪氨酸脯氨酸环甘氨酸苯丙氨酸，且均与药理活性成正相关。美洲大蠊提取物Ⅱ与其体外抗肝癌活性的谱效胞抑制率溶剂对照组吸光度给药组吸光度溶剂对照组吸光度空白对照组吸光度。细胞人肝癌细胞株由齐氏生物科技有限公司提供。方法与结果样品体外抗肝癌试验样品制备分别精密称取批样品各，溶于含胎牛血清的培养基以下简称完全培养基中，得到质量浓度为，再用完全培养基稀释成溶液，备用。美洲大蠊提取物胞培养条件下同。培养过程中，换次细胞培养液，传代细胞。样品对肝癌细胞活性的影响取对数生长期细胞，用完全培养基调整细胞密度至个，按孔接种至孔板中，培养后，吸出培养液，清洗次，加入项下个质量浓度的溶液给药浓度依据前期试验设置，同时设置空白对照组不含细胞不标准化回归系数图和对药效的贡献图法常用于预测中药或复方中各成分与药效的相关性，具有对样本容量和数据分布规律要求低计算简便且易程序化的特点。但该方法计算出的关联度只具有相对意义，只能反映化合物与药效间相关性的大小，不能判断出正负关联，而法则可弥补法的这不足。因此，本研究采用两种关系研究医学职称。表样品中化学成分的分析结果表结果讨论有研究表明，以美洲大蠊为原料制得的美蠊精胶囊等药品的药理活性显著且临床应用广泛，但其化学成分研究较为薄弱，尚未找到特异性的活性物质，亦无其真正发挥临床疗效活性物质的相关报道。基于此，本课题组结合前期指纹图谱，采用美洲大蠊提取物Ⅱ与其体外抗肝癌活性的谱效关系研究医学职称为抗肝癌活性指标，采用灰色关联度分析法和正交偏最小乘法联合建立指纹图谱与抗肝癌活性之间的谱效关系，旨在为美洲大蠊提取物的抗肝癌物质基础研究和临床应用提供科学依据。由图可知，以值排序，峰的值均大于，说明这些峰对样品的抗肝癌活性有重要影响。结合图可知，在大于的色谱度法美洲大蠊谱效关系飞行时间质谱联用法美洲大蠊为蜚蠊科大蠊属昆虫，俗称蟑螂。其药用历史悠久，始载于神农本草经，主治小儿疽积症瘕积聚和疮痈肿毒。近年来，美洲大蠊的药用价值得到学者的广泛认同，大量研究表明其具有明显的促进组织修复再生抗氧化抗肿瘤抗肝炎和免疫调节等功效。本课题组前期研究表明，以美洲大蠊提性之间的谱效关系。结果批样品的指纹谱图中有共有峰个，指认出其中个，分别为环酪氨酸脯氨酸峰环甘氨酸苯丙氨酸峰次黄嘌呤峰腺嘌呤峰苯丙氨酸峰肌苷峰乙酰多巴胺峰环脯氨酸丙氨酸峰羟基马尿酸峰环脯氨酸丝氨酸峰。批样品对细胞的为。个共有峰中，以抗肝癌活性的分析关联度峰的标准化回归系数小于，两者成负相关。和的联合分析将和的峰整合，发现样品抗肝癌活性的主要成分依次为峰未知化合物未知化合物环酪氨酸脯氨酸环甘氨酸苯丙氨酸，且均与药理活性成正相关。摘要目的研究美洲大蠊提取物与其体外抗肝癌活性的谱效关系，并初步明确其抗肝癌活性成分。方法在已建立批样品的与药效间相关性的大小，不能判断出正负关联，而法则可弥补法的这不足。因此，本研究采用两种方法联合分析与抗肝癌活性之间的谱效关系。结果表明，个共有峰中有个特征峰与样品抗肝癌活性的值大于，证明其具有相关性。但所有峰的值均未超过，表明其相关性不显著。其中，峰的值大于值大于且标准化其真正发挥临床疗效活性物质的相关报道。基于此，本课题组结合前期指纹图谱，采用技术在正负离子模式下对批美洲大蠊提取物进行整体分析，共得个共有峰并鉴定出个化合物，多为环肽类和核苷类成分。据报道，环肽类是具有抗癌抑菌抗凝和抗氧化等作用的类活性物质核苷类物质多具有抗病毒抗药浓度依据前期试验设置，同时设置空白对照组不含细胞不含药物和溶剂对照组不含药物只含细胞，每组设个复孔。给药后继续培养，吸弃孔内培养液，清洗次，再加入溶液，轻轻拍匀，继续培养后，每孔添加，低速振荡，使用酶标仪在波长下检测各孔的吸光度。每组试验