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马蓝BcASB基因的克隆、生物信息学及表达分析(中药学论文) 马蓝BcASB基因的克隆、生物信息学及表达分析(中药学论文)

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《马蓝BcASB基因的克隆、生物信息学及表达分析(中药学论文)》修改意见稿

1、“.....采用法绘制系统进化树,参数为个重复。基因在马蓝中的诱导表达采取马蓝的根茎叶,按照项方法提取总,以总为模板合成第链,测定基因在马蓝不同器官中的表达模式。以为内参基因,根据克隆获得的基因序列,通过设计荧光定量引物表。分别用的种不同外源激素对马蓝植株进行胁迫处理,对处理后不同时间点基因表达量进行荧光定量表达分析。反应体系为,正反向引物各,模板,。反应条件基因在不同处理下的相对表达量。激素诱导下吲哚类生物碱靛蓝靛玉红含量的测定色谱条件色谱柱为流动相为乙腈甲酸水溶液甲酸水溶液的制备移液枪吸取甲酸臵于含蒸馏水的容量为蓝盖瓶中,加蒸馏水至,摇匀后,超声脱气检测波长为柱温为体积流量为进样量为。梯度洗脱过程,。色谱图见图。精密度试验精密吸取同供试品溶液......”

2、“.....考察日内精密度,测得靛蓝靛玉红的分别为。加样回收率试验取重复性试验同批号样品份,各约,分别精密加入靛蓝靛玉红对照品溶液,制备成加样供试品溶液,并分别测定和计算加样回收率。结果显示,靛蓝靛玉红平均加样回收率分别为,分别为。结果与分析马蓝基因的克隆与序列分析以马蓝总反转录后获得的马蓝基因的克隆生物信息学及表达分析中药学论文滤液,即得。线性关系考察精密吸取混标对照品溶液适量,加入甲醇进行倍比稀释,分别得到对照品系列浓度。马蓝基因的克隆生物信息学及表达分析中药学论文。基因的生物信息学分析使用平台查找和分析基因的,并将翻译成氨基酸序列......”

3、“.....使用软件进行同源序列的比对利用软件对预测的氨基酸序列与上的其在植物的代谢过程中发挥着重要的作用,。本研究对马蓝叶片进行了这种不同外源激素的胁迫处理,表达量和马蓝有效成分靛蓝靛玉红积累量均呈现出不同程度的上调,说明基因响应并介导外源诱导子对代谢的调控。这与拟南芥水稻的表达情况相近。前期,等就在拟南芥的研究中发现会刺激邻氨基苯甲酸合成酶基因的转录,从而促进拟南芥芽和根的生长。在水稻中也发现。同时,也有很多研究验证了不同的信号诱导可以促进植物次生代谢产物的产生,。在马蓝等药用植物中,其生物合成过程中的关键酶活性高低也会影响药效成分的产量,因此,提高关键酶基因在植物中的表达也是提高药用活性成分产量提高中药材品质的有效手段之......”

4、“.....随着分子生物学技术的发展,大多数的药用植物已经涉及分子生物学领域,最活跃的研究领域就是与药用活性成分形成相关的关键酶基因的克隆同样呈现先上升后下降再上升的趋势,在呈现上升趋势,在含量达到最大值,在之后,含量呈现下降的趋势,但在含量上升至,为初始水平的倍,总体上含量在各个检测点没有显著性差异。综上所述,通过检测不同外源诱导子处理下,不同时间点靛蓝靛玉红积累量的变化,发现在个时间检测点靛蓝靛玉红含量与相比,均发生了显著的上调,这与基因的表达量相致,说明马蓝有效成分靛蓝靛玉红积累量受基因表达的影响,进步说明基因表达在马蓝有效成分的合成中发挥着关键作用。讨论吲哚类生物碱靛蓝靛玉红等作为植物次生代谢的重要产物之,具有抗菌抗病毒抗炎抗肿瘤增强免疫等显著药理活性。是植物体内吲哚类生物碱合成途径的关键酶之,具有重要的研究价值。近几年......”

5、“.....在药用植物的研究中鲜见报道。本研究立足于前期建立的马蓝转录组数据库,克隆了马蓝基因,激素诱导下靛蓝靛玉红含量测定分析马蓝不同组织中靛蓝靛玉红含量测定对马蓝不同器官根茎叶中的吲哚类生物碱靛蓝和靛玉红含量进行了测定图,研究结果显示,靛蓝靛玉红含量在马蓝叶茎中的含量相差较大,靛蓝在叶中的含量达到,是靛玉红含量的倍,靛蓝在茎中的质量分数为,是靛玉红含量的倍,而在根中,两者含量没有显著性差异且靛蓝在叶和茎中的含量显著高于根,而靛玉红在不同组织中的含量没有显著性差异。不同激素处理的马蓝叶片中靛蓝靛玉红含量测定用处理马蓝叶片,采取处理后不同时间点的叶片,测定其含量的变化图,检测结果显示,叶片中靛蓝靛玉红的含量随着时间的变化呈现先上升后下降的趋势,靛蓝在时含量显著高于其他检测点,在达到最大值,为,为的倍......”

6、“.....靛玉红的含量在也达到最大值,为,为的倍,在下降到初始水平,但靛玉红含量在各个检测点没有显著性差异。用处陆地棉等植物同源性达到,总相似度达。利用软件构建系统进化树图,结果显示马蓝蛋白与茄科年或有限多年生草本植物辣椒的亲缘关系最近,可聚为支,与锦葵科陆地棉和海绵蛋白亲缘关系最远。基因的时空表达分析基因在不同器官中的表达模式分析分别提取马蓝根茎叶的总,法测定基因在马蓝不同组织的表达模式,结果表明,在种不同的器官中均有表达,但相对表达量存在定差异,在叶和茎中表达量显著高于根,表达量从高到低呈现出叶茎根,在叶中的表达量是茎的倍,根的倍图。不同外源激素对基因诱导表达的影响对马蓝叶片进行了种不同外源诱导物的胁迫处理,对不同时间点表达量进行检测。检测结果表明,用处理后,马蓝因的相对表达量显著高于其他检测点......”

7、“.....对植物代谢影响显著图。用处理后,基因表达量在时相对表达量显著高于其他检测点,在趋于稳定,在小幅度上升,为的倍,达到峰值,为的倍,随后表达量逐渐下降,但在表达量仍然高于图。而用处理后,基因表达量在达到峰值,显著高于其他检测点,为的倍,时基因的表达量水平与其他检测点基本持平,没有显著性的差异,说明基因的相对表达量受的影响较小图。上述结果说明基因可以响应多种外源诱导子处理。邻氨基苯甲酸合成酶大多存在于植物细胞质体内,是由基组成的复合酶,。早在年,等首次从模式植物拟南芥中克隆出编码年,等从芸香中克隆出编码烟草长春花喜树等植物中分离克隆出编码亚基的基因。与亚基的研究相对较少,但近年来,也有研蛋白序列提交至,与其他植物蛋白序列进行同源比对,结果显示马蓝与上百种上登录的植物有相似性,挑选其中种与马蓝相似度较高的植物蛋白序列......”

8、“.....分析结果显示马蓝与芝麻丹参果杨胡杨月季陆地棉等植物同源性达到,总相似度达。利用软件构建系统进化树图,结果显示马蓝蛋白与茄科年或有限多年生草本植物辣椒的亲缘关系最近,可聚为支,与锦葵科陆地棉和海绵蛋白亲缘关系最远织特异性表达结果表明,基因在马蓝不同的器官中均有表达,佐证了马蓝根茎叶均可入药说,且在叶中的表达量高于根和茎,这与已经报道的喜树的研究结果具有致性,喜树中亚基编码的基因在其不同器官中均有表达,且在幼苗的发育过程中表达量迅速升高。在水稻中,亚基编码的基因在各组织中的表达模式却有所不同,在花序中的表达量高于根和叶,而在各组织的表达量差异不大,这说明同源蛋白之间组织表达也具有定的差异,可能与蛋白参与的功能相关。在植物的代谢过程中发挥着重要的作用,。本研究对马蓝叶片进行了这种不同外源激素的胁迫处理......”

9、“.....说明基因响应并介导外源诱导子对代谢的调控。这与拟南芥水稻的表达情况相近。前期,等就在拟南芥的研究中发现会刺激邻氨基马蓝基因的克隆生物信息学及表达分析中药学论文基因表达量呈现先上升后下降的趋势,在时表达量显著高于其他检测点,在达到峰值,与处理点存在显著差异,为的倍,随后逐渐下降,在相对表达量水平接近图。用处理后,基因表达量呈现先稳定后迅速上升的趋势,在达到峰值,表达量为的倍,而在时基因的相对表达量显著高于其他检测点,说明对基因的调节更为持久,对植物代谢影响显著图。用处理后,基因表达量在时相对表达量显著高于其他检测点,在趋于稳定,在小幅度上升,为的倍,达到峰值,为的倍,随后表达量逐渐下降,但在表达量仍然高于图。而用处理后,基因表达量在达到峰值,显著高于其他检测点,为的倍......”

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