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基于粪便代谢组学的黄芩酒炙改善急性肺损伤的作用机制研究(内科综合论文) 基于粪便代谢组学的黄芩酒炙改善急性肺损伤的作用机制研究(内科综合论文)

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《基于粪便代谢组学的黄芩酒炙改善急性肺损伤的作用机制研究(内科综合论文)》修改意见稿

1、“.....生成抗氧化剂清除过量氧自由基,恢复免疫系统的正常运行,维持机体氧化还原平衡。谷氨酸受体重要亚型之的甲基天门冬氨酸,受体可因肺内谷氨酸含量升高而过度激活,使肺组织出现高通透性肺水肿。本研究检测到模型组小鼠粪便中谷氨酸水平显著升高,表明刺激后谷氨酸释放增多在生黄芩干预下,谷氨酸水平显著下调,提示生黄芩可能通过阻断谷氨酸受体,发挥维持谷氨酸稳态与抗氧化应激的作用。近年来,大量研究表明苯丙氨酸在急性炎性疾病中发挥作用。体内高浓度苯丙氨酸可能增加的死亡率。严重的肺部炎性反应导致苯丙氨酸羟基于粪便代谢组学的黄芩酒炙改善急性肺损伤的作用机制研究内科综合论文水平无明显变化。生酒黄芩干预的粪便差异代谢物见表,代谢通路见图,生酒黄芩通过调节不同代谢途径发挥作用......”

2、“.....对照组与模型组模型组与生黄芩组重叠的差异代谢物为鞘氨醇和谷氨酸对照组与模型组模型组与酒黄芩组重叠的差异代谢物为苯丙氨酸。生黄芩通过谷氨酰胺与谷氨酸代谢通路以及鞘脂类代谢通路缓解,而酒黄芩则调节苯丙氨酸代谢通路发挥疗效。讨论本研究通过小鼠口咽吸入建立模型,发现模型组小鼠出现免疫脏器损伤以及严重的肺组织损伤,且体内炎性因子水平失衡酒黄芩的疗效优于生黄芩,与炮制理论致。采用粪便代谢组学探究潜在损伤粪便代谢组学酒炙黄芩黄芩为唇形科植物黄芩的干燥根,具有清热燥湿泻火解毒止血安胎的功效。中国药典年版收载黄芩和酒黄芩个品种生黄芩清热泻火,解毒力强,常须炮制后使用酒黄芩可借酒升腾之力,用于治疗上焦肺热及肢肌表之湿热。本课题组前期对黄芩炮制前后的化学成分进行分析,发现黄芩酒炙后,黄酮苷类成分含量下降,黄酮苷元含量上升......”

3、“.....可作为区分黄芩炮制前后的化学标志物表明酒炙后黄芩药材发生化学成分等内在变化,影响药物的性质及作用方向。影响的代谢通路见图,其中影响值的代谢通路有条小鼠内源性代谢物的影响,并探讨黄芩酒炙行上焦清湿热的作用机制。方法小鼠口咽吸入脂多糖建立模型,通过脏器指数肺组织病理及支气管肺泡灌洗液中细胞因子水平,评价生酒黄芩的疗效差异采用超高效液相色谱飞行时间质谱联用法检测内源性代谢物,运用主成分分析,正交偏最小乘判别分析,等方法寻找差异性代谢物及代谢通路。结果与对照组比较,模型组小鼠胸腺指数脾脏指数显著降质谱条件离子化模式为电喷雾正离子模式和负离子模式离子源电压为离子源温度为去簇电压为碰撞能量为,碰撞能量扩展为雾化气体为辅助气为,辅助气为,气帘气为级质谱母离子扫描范围为设臵响应值超过的峰优先进行级质谱扫描......”

4、“.....开启动态背景扣除。数据处理及分析使用软件对原始数据进行峰识别对齐滤噪峰面积归化等预处理,得到含有代谢物保留时间质荷比强度等信息的数据矩阵文件。将其导入软件进行主成分分析,和正交偏最小乘判别分析明显,肺泡壁明显增厚和间质水肿,表明造模成功各给药组肺组织病变程度降低,炎性细胞浸润和红细胞渗出增生等情况均有所改善,其中酒黄芩组与对照组小鼠肺组织形态相似。分析正负离子模式下,小鼠粪便总离子流图见图。针对系统稳定性,随机选取质控样本中的个分子离子峰,计算其和峰强度的见表,选取的个分子离子峰的为,峰强度的为,表明质控样品中的离子具有良好的质量准确度,符合代谢组学分析要求。基于粪便代谢组学的黄芩酒炙改善急性肺损伤的作用机制研究内科综合论文。生酒黄芩对小鼠肺组织病理变化的影响取小鼠右肺上叶浸泡于组织固定液中,室温放臵以上......”

5、“.....得到含有代谢物保留时间质荷比强度等信息的数据矩阵文件。将其导入软件进行主成分分析,和正交偏最小乘判别分析将变量投影重要性值,和的变量视为差异变量。利用与京都基因与基因组百科全书,数据库对差异变量的级碎片离子进行鼠粪便中氨基酸脂质类代谢均发生明显改变,生黄芩通过影响谷氨酰胺与谷氨酸代谢通路鞘脂类代谢通路抑制炎性反应,酒黄芩通过影响苯丙氨酸代谢通路抑制炎性反应。结论生酒黄芩能够通过调节不同代谢通路抑制小鼠肺部炎性反应,为阐明黄芩生熟异用的作用机制差异提供思路。关键词内源性代谢物急性肺损伤粪便代谢组学酒炙黄芩黄芩为唇形科植物黄芩的干燥根,具有清热燥湿泻火解毒止血安胎的功效。中国药典年版收载黄芩和酒黄芩个品种生黄芩清热泻火,解毒力强,常须炮制后使用酒黄芩可借酒升腾之力,用于治疗上焦肺热及肢肌表之湿热......”

6、“.....综上,本研究通过模型模拟上焦湿热症,考察生酒黄芩干预小鼠的药效差异以及内源性代谢物的差异影响,探讨黄芩酒炙行上焦清湿热的作用机制,为解释中药炮制机制提供了种新模式摘要目的基于粪便代谢组学技术考察生酒黄芩对急性肺损伤,小鼠内源性代谢物的影响,并探讨黄芩酒炙行上焦清湿热的作用机制。方法小鼠口咽吸入脂多糖建立模型,通过脏器指数肺组织病理及支气管肺泡灌洗液中细胞因子水平,评价生酒黄芩的疗效差异采用超高效液相色谱飞行时间质谱联用法检测内源性代谢物,运用基于粪便代谢组学的黄芩酒炙改善急性肺损伤的作用机制研究内科综合论文苏木素伊红染色,于显微镜下观察并拍照。粪便代谢组学研究粪便样本处理称取各组小鼠粪便样本,加入甲醇,匀浆,离心,取上清液,离心,取上清液......”

7、“.....称取各粪便样本,按上述方法处理后作为质控样品。分析前连续进样次确保仪器稳定性良好,分析过程中每进针样品后进针质控样品。色谱条件色谱柱,流动相为甲酸水溶液乙腈,梯度洗脱体积流量为柱温为进样体积为色谱柱,流动相为甲酸水溶液乙腈,梯度洗脱体积流量为柱温为进样体积为。肺水肿是最主要的病理特征之,与对照组比较,模型组小鼠肺干湿质量比显著升高,肺水肿严重与模型组比较,地塞米松组和酒黄芩组小鼠肺干湿质量比显著降低,生黄芩组小鼠肺干湿质量比呈降低趋势,表明酒黄芩改善小鼠脏器损伤的作用优于生黄芩。生酒黄芩对小鼠肺组织病理变化的影响如图所示,对照组小鼠肺组织结构清晰,肺泡间隔及肺泡腔未见明显病理改变模型组小鼠肺组织炎性细胞浸润,主要涉及多种氨基酸的合成与代谢以及脂质代谢,这些潜在的代谢通路与文献报道致。生黄芩组中鉴定得到个差异代谢物......”

8、“.....结合通路富集分析和组间差异代谢物的并集分析,发现生黄芩通过调节谷氨酰胺与谷氨酸代谢通路和鞘脂类代谢通路发挥作用,而酒黄芩通过苯丙氨酸代谢通路发挥作用。谷氨酰胺与谷氨酸代谢通路中主要的代谢物谷氨酸和谷氨酰胺在抗氧化中发挥着重要作用,。活性氧自由基的过量产生可引起,因此当与抗氧化剂相关的代谢通路激活时,生成抗氧化剂清除过量氧自由基,恢复免疫系统的正常运行,维持机体氧化还原平衡。谷氨酸受体重要亚型之的甲基天门鉴定,检索误差范围设臵为使用数据库进行代谢通路分析,影响值的代谢通路被认为是潜在的靶点路径。生酒黄芩对小鼠肺组织病理变化的影响取小鼠右肺上叶浸泡于组织固定液中,室温放臵以上,进行苏木素伊红染色,于显微镜下观察并拍照。粪便代谢组学研究粪便样本处理称取各组小鼠粪便样本,加入甲醇,匀浆,离心,取上清液......”

9、“.....取上清液,进行超高效液相色谱飞行时间质谱联用分析。称取各粪便样本,按上述方法处理后作为质控样品。分析前连续进样次确保仪器稳定性良好,分析过程中每进针样品后进针质控样品。色谱条期对黄芩炮制前后的化学成分进行分析,发现黄芩酒炙后,黄酮苷类成分含量下降,黄酮苷元含量上升,苷类成分与苷元的比例变化趋势明显,可作为区分黄芩炮制前后的化学标志物表明酒炙后黄芩药材发生化学成分等内在变化,影响药物的性质及作用方向。质谱条件离子化模式为电喷雾正离子模式和负离子模式离子源电压为离子源温度为去簇电压为碰撞能量为,碰撞能量扩展为雾化气体为辅助气为,辅助气为,气帘气为级质谱母离子扫描范围为设臵响应值超过的峰优先进行级质谱扫描,子离子扫描范围为,开启动态背景扣除。数据处理及分析使用软件对原始数据进行成分分析,正交偏最小乘判别分析......”

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