1、“.....由标准疫苗规范接种仔猪获得阴性血清取自未接种疫苗的仔猪其他试剂全为分析纯。猪瘟病毒间接抗体检测方法及其蛋白主要抗原区的表达研究兽医学论文。表临床血清样品检测结果讨论控制猪瘟的策略主要包括不接种疫苗的扑杀政策和系统性疫苗接种预防措施。执行不接种疫苗政策的高密度养殖地区旦猪瘟暴发会造成巨大的经济损失。中国目前执行的猪瘟强制性腹泻病毒抗体对猪瘟病毒抗体检测的影响，而且在标准化封闭养殖场猪感染牛病毒性腹泻病毒的可能性很小，但在临床怀疑存在牛病毒性腹泻病毒时建议搭配检测进步确诊。综上，本试验优化了主要抗原区密码子提高了表达量，重组蛋白与猪瘟抗体特异性结合强......”。

2、“.....临床检测结果理想，可以进步开发应用。参考文献侯金秀，郑阳，李照耀，等猪瘟病毒非结构蛋白和多克隆抗体的制备和鉴定南京农业大学学报，朱元源猪瘟病毒结构蛋白与生物学特性的关系北京中国兽医药品监察所，陈明杰，高明明，姚文兵，等大肠杆菌非偏爱密码子的数量及位臵对外源蛋白表达的影响中国药科大学学报，罗丹丹，曹冶，谢晶，等猪瘟病毒基因密码子偏爱性分析中猪瘟病毒间接抗体检测方法及其蛋白主要抗原区的表达研究兽医学论文测所使用指示抗体单结合位点的抗体阻断不同，间接检测与包被抗原结合的所有抗体。在正向间接血凝试验间接胶体金免疫层析试纸条种检测猪瘟病毒抗体的方法中，间接具有最高的灵敏性与阻断相比，间接操作更迅速制备更简单。有研究者通过大量的田间试验数据研究后认为，在目前中国的猪瘟强制免疫政策下......”。

3、“.....。由于蛋白在猪瘟病毒中高度保守的抗原结构域，因此任何猪瘟病毒毒株包括新出现的所产生的抗体都有可能与其结合而被检测到，这更有利于流行病学调查。本试验构建的间接通过曲线判断临界值，相比使用平均值作为临界值则曲线不易受极端值的影响，更能反映数据仍是最成功的系统之。本试验选择带有强启动子和标签蛋白的作为基因载体，宿主菌选择与之相配合的，建立个高表达的原核系统条件。有证据显示物种间的密码子使用偏好并不相同，据等的研究，大肠杆菌至少有个稀有密码子，稀有密码子与表达量呈负相关关系，如果稀有密码子串联成簇出现则对表达的抑制作用更加显著。猪瘟病毒对原核表达系统的密码子适应指数偏低，基因中存在多个大肠杆菌稀有密码子，并且存在稀有密码子串联出现的情况利用计算机程序对主要抗原区序列进行稀有密码子同义替换，不改变对应的氨基酸不影响蛋白质结构和活性......”。

4、“.....但可以通过合理的基因设计和合成克服。全基因表达对宿主菌负担较大，本试验只表达蛋白主要抗原区毒的抗体阳性血清无交叉反应，并且对份样品的临床检测结果显示与爱德仕猪瘟阻断试剂盒的阳性符合率为，阴性符合率为，总符合率为。结果表明密码子优化后重组蛋白实现高效表达，建立的猪瘟病毒间接抗体检测方法成本低准确率高，可进步开发应用。关键词蛋白兽医学原核表达密码子优化猪瘟病毒间接猪瘟病毒可感染所有品种不同年龄的猪和野猪。猪瘟发病特征是实质器官出血坏死与梗死慢性发病常见纤维素性坏死性肠炎，曾被称为猪霍乱，。猪瘟传播快病死率高，在世界范围流行，是动物健康和生猪养殖业需要面对的巨大威胁，是猪最重要的病毒性传染病之。猪瘟病毒是黄病毒科瘟病毒属成员，为单股正链病毒，基因组大小约为，包含个大的开放阅读框......”。

5、“.....包括猪圆环病毒猪蓝耳病病毒伪狂犬病病毒猪细小病毒猪流行性腹泻病毒口蹄疫病毒猪瘟病毒的抗体阳性血清。为了使检测数据更具有适用性，统计时用平均值标准差表示，以此测试间接的特异性。间接临床检测使用建立的间接检测份临床血清，与爱德仕生产的猪瘟阻断试剂盒进行比较，统计符合率。结果与分析基因主要抗原区序列优化原始序列对大肠杆菌的密码子适应指数为，优化后的密码子适应指数为原始序列含量为，优化后含量为优化后的核酸序列使用软件与原序列进行对比，相似度为，氨基酸序列不变。密码子优化后原序列中大肠杆菌使用频率低于的密码子全部被替换，并绘制曲线见图进行数据分析。当取值大于则百分之百阳性，当取值小于则百分之百阴性，在两者之间存在少量交叉......”。

6、“.....此时约登指数为。猪瘟病毒间接抗体检测方法及其蛋白主要抗原区的表达研究兽医学论文。重组蛋白测试抗原性目的蛋白溶解在变性剂中，使用分步透析法于逐步去除变性剂根据说明书使用蛋白质定量检测试剂盒对溶液进行蛋白含量检测纯化后的蛋白进行试验检测与猪瘟病毒血清抗体的结合能力。优化间接反应条件将纯化的重组蛋白用作包被抗原，进行方阵滴定确定合适的抗原包被量以及血清稀释度等，用的碳酸盐缓冲液稀释重组蛋白以和孔包被于酶标板，于过夜，的牛指数为，优化后的密码子适应指数为原始序列含量为，优化后含量为优化后的核酸序列使用软件与原序列进行对比，相似度为，氨基酸序列不变。密码子优化后原序列中大肠杆菌使用频率低于的密码子全部被替换，序列中密码子偏好性普遍上升见图图。重组蛋白测试抗原性目的蛋白溶解在变性剂中......”。

7、“.....优化间接反应条件将纯化的重组蛋白用作包被抗原，进行方阵滴定确定合适的抗原包被量以及血清稀释度等，用的碳酸盐缓冲液稀释重组蛋白以和孔包被于酶标板，于过夜，的牛血清白蛋白试剂作为封闭液交叉反应，并且对份样品的临床检测结果显示与爱德仕猪瘟阻断试剂盒的阳性符合率为，阴性符合率为，总符合率为。结果表明密码子优化后重组蛋白实现高效表达，建立的猪瘟病毒间接抗体检测方法成本低准确率高，可进步开发应用。关键词蛋白兽医学原核表达密码子优化猪瘟病毒间接猪瘟病毒可感染所有品种不同年龄的猪和野猪。猪瘟发病特征是实质器官出血坏死与梗死慢性发病常见纤维素性坏死性肠炎，曾被称为猪霍乱，。猪瘟传播快病死率高，在世界范围流行，是动物健康和生猪养殖业需要面对的巨大威胁......”。

8、“.....猪瘟病毒是黄病毒科瘟病毒属成员，为单股正链病毒，基因组大小约为，包含个大的开放阅读框，侧翼是个非翻译区，。编码大多克隆抗体的制备和鉴定南京农业大学学报，朱元源猪瘟病毒结构蛋白与生物学特性的关系北京中国兽医药品监察所，陈明杰，高明明，姚文兵，等大肠杆菌非偏爱密码子的数量及位臵对外源蛋白表达的影响中国药科大学学报，罗丹丹，曹冶，谢晶，等猪瘟病毒基因密码子偏爱性分析中国畜牧兽医，凌明圣，许祥裕，丁树标以包涵体形式存在的重组蛋白的纯化和体外折叠中国生化药物杂志，张永国，刘湘涛，韩雪清，等猪瘟病毒基因主要抗原区的克隆及原核表达生物工程学报，马超英种猪瘟病毒抗体检测方法的比较动物医学进展，徐璐，范学政，梁智选，等猪瘟病毒间接抗体检测试剂盒的临床应用研究中国兽医杂志，冯春花，朱艳平，郭东光......”。

9、“.....陈，潘猪瘟病毒间接抗体检测方法及其蛋白主要抗原区的表达研究兽医学论文血清白蛋白试剂作为封闭液进行封闭，洗涤次，血清以∶∶∶∶稀释，每孔转移至酶标板，于孵育，洗涤次，加入适合稀释度的兔抗猪，于孵育，洗涤次，加入底物，于显色，加终止液测量值。确定检测的条件后，检测已知状态的血清样品，再使用软件绘制血清检测特征曲线对统计数据进行图像化便于直观感受和分析，选择正确率较高的临界值确定为猪瘟病毒间接抗体检测方法的临床检测临界值。间接重复性检测使用建立的间接方法在同检测板和不同检测板进行次进行重复检测，统计批内变异系数和批间变异系数，测试间接的重复蛋白的可溶性分析图重组蛋白纯化分析图重组蛋白的检测重组蛋白浓度检测根据说明书使用蛋白定量检测试剂盒进行重组蛋白浓度检测，显示纯化复性后溶液中蛋白质的含量约为......”。