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探究浙贝母淀粉、蔗糖代谢相关基因的克隆(农业科学论文) 探究浙贝母淀粉、蔗糖代谢相关基因的克隆(农业科学论文)

格式:word 上传:2023-05-08 18:56:00

《探究浙贝母淀粉、蔗糖代谢相关基因的克隆(农业科学论文)》修改意见稿

1、“.....蔗糖作为光合作用的主要产物,支持着植物的生长和发育。植物中蔗糖合成主要受类酶影响。酶作为个双向酶,既可合成蔗糖,也可将蔗糖分解为葡萄糖和果糖,浙贝母中基因在鳞茎中表达量明显高于其他部位,这与其在牛大力白及木薯在块茎中表达量最高的结果致,甜菜中基因在根部大量表达,柑橘中基因高表达部位为果汁囊,以上结果说明具有非常广泛的生物学活性,可清热润肺解毒散结。每年月份为浙贝母鳞茎发育时期,此期间鳞茎随时间推移迅速膨大,鳞茎大小是衡量浙贝母是否成熟的主要标志。鳞茎的品质直接决定浙贝母的药用功效及市场价值,所以获取高品质的浙贝母鳞茎是当今浙贝母产业的关注焦点。民间常施加钾肥促进鳞茎发育,宋健琴发现释放钾肥可有效提升浙贝母鳞茎中碳物质的积累,从而推断浙贝母鳞茎的发育与其他鳞茎类植物类似,伴随着碳水化合物的积累,鳞茎逐渐膨大......”

2、“.....尤其是可溶性糖及淀粉等。例如在百合唐菖蒲郁金香石蒜水仙中发现,糖含量的变化影响着鳞茎的休眠及发育。植物中常见可溶性糖为果糖葡糖糖蔗糖,其中蔗糖是植物中糖的主要可运输形式,其主要在光合组织的细胞质中被合成后运输到非光合作用组织中。高等植物中蔗糖的合成与众多酶密切相关,其中蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶是蔗糖调节合成中的关键酶。是种基因全长进行克隆,如图所示,端约保守端约端约端约保守端约端约端约保守端约端约端约保守端约端约端约保守端约端约端约保守端约端约端约保守端约端约端约保守端约端约。蔗糖淀粉代谢基因全长及生物信息学分析基因全长,氨基酸序列与兰州百合龙舌兰芦笋博落回白杨胡杨毛果杨以及无油樟氨基酸全长或部分序列致性分别达到和。基因包含个完整的开放阅读框,长度,编码个氨基酸。理论为,属碱性蛋白不稳定系数,为稳定蛋白疏水性......”

3、“.....不存在跨膜区,属于非跨膜蛋白不存在信号肽,属于分泌性蛋白保守结构域预测为,属于超家族,该结构域代表探究浙贝母淀粉蔗糖代谢相关基因的克隆农业科学论文油棕蝴蝶兰海枣氨基酸全长或部分序列致性分别达到和。基因包含个完整的开放阅读框,长度,编码个氨基酸。理论为,属酸性蛋白不稳定系数,为稳定蛋白疏水性,为亲水蛋白亚细胞定位在细胞核中,不存在跨膜区,属于非跨膜蛋白不存在信号肽,属于非分泌性蛋白保守结构域预测为,属超家族,该结构域代表蔗糖合成酶。基因全长,氨基酸与兰州百合油棕海枣凤梨芭蕉芦笋睡莲氨基酸全长或部分序列致性分别达到和。基因包含个完整的开放阅读框,长度,编码个氨基酸。理论为,属酸性蛋白不稳定系数,为不稳定蛋白疏水性,为亲水蛋白亚细胞定位在细胞质中,不存在跨膜区,属于非跨膜蛋白不存在信号肽,属于非分泌性蛋白保守结构域预测为,属于含个完整的开放阅读框,长度......”

4、“.....理论为,属碱性蛋白不稳定系数,为稳定蛋白疏水性,为亲水蛋白亚细胞定位在叶绿体中,不存在跨膜区,属于非跨膜蛋白不存在信号肽,属于分泌性蛋白保守结构域预测为,属于超家族,该结构域代表葡萄糖焦磷酸化酶。数据分析使用软件进行相关性分析。结果与分析鳞茎性状测量如图所示,浙贝母鳞茎随时间推移逐渐增大,鳞茎从幼苗期至成熟期共需经历,每取样次,直径依次为,质量依次为,两项性状指标均在时达到最高。可溶性糖蔗糖淀粉含量测定可溶性总糖蔗糖淀粉含量如图所示。淀粉含量随着鳞茎发育逐渐上升,达到最高值,蔗糖与可溶性总糖变化趋势相同,皆为下降上升下降,分别在和达到最大。基因全长,氨基酸与杂种百合川百合海枣耧斗菜油棕唐松草芭蕉龙舌兰氨基酸全长或部分序列致性分别达到和。基因包含个完整的开放阅读框糖进入各种代谢途径,催化如下可逆反应蔗糖磷酸尿苷果糖尿苷磷酸葡萄糖......”

5、“.....为淀粉合成提供底物及能量。活性直接反映了植物体内蔗糖合成的能力,可通过降低活性减少其同化物向蔗糖的分配,从而降低蔗糖合成的效率。淀粉是植物体中碳水化合物的主要储存形式,主要储存于块根块茎鳞茎种子中,在鳞茎类植物发育过程中提供大量能源,夏宜平等通过放射性同位素法和扫描电镜探测到淀粉颗粒的数量随郁金香鳞茎的发育快速增加,百合中也有通过类似结果,在马铃薯种植中也有通过释放膨大剂增加块茎中淀粉含量进而增加产量的方法。由于植物生长发育周期较长,近年研究中常使用分子手段干预淀粉合成。淀粉合成通路中腺苷磷酸葡萄糖焦磷酸化酶作为限速酶,参与淀粉合成的第步反应,颗粒结合淀粉合酶参与直链淀粉合成,可溶性淀粉合酶和淀粉分支酶协作合成支链淀粉。总的提取浙贝母总的琼脂糖凝摘要为了培育高品质浙贝母鳞茎,本研究以浙贝号为材料......”

6、“.....使用实时荧光定量测定各基因表达量并进行相关性分析。结果发现,鳞茎中淀粉含量在成熟期达到最大值,可溶性总糖和蔗糖含量在鳞茎发育初期和末期最高,在鳞茎中表达量最高,在根中表达量最高,个基因均与淀粉含量显著相关相关系数分别为和,主要表达部位为鳞茎,为叶片,者均与蔗糖含量呈显著相关性相关系数为和。本研究为淀粉蔗糖代谢基因功能验证,以及浙贝母分子育种与分子调控鳞茎发育相关研究奠定了基础。关键词基因克隆基因表达浙贝母淀粉蔗糖鳞茎浙贝母为百合科贝母属多年生草本植物,其鳞茎中所含甾体类生物碱贝母甲素和贝母乙素具有非常广泛的生物因可直接影响直链淀粉含量研究发现转入反义基因可中止相应器官合成直链淀粉进而降低淀粉含量。荸荠中基因在块茎中表达量较高,黄芪中基因在毛状根及根中表达量高于茎和叶......”

7、“.....百合中基因在鳞茎表达量较高,浙贝母中基因在鳞茎中表达量也远高于其他部位,可见基因在鳞茎发育中具有重要作用。基因共同参与支链淀粉合成,在水稻小麦玉米马铃薯大麦拟南芥中将基因表达敲低后作物中支链淀粉及总淀粉含量明显降低。水仙中基因在花器发育期高表达,莲藕根状茎伸长过程中基因表达量不断变化,表明基因与植物发育密切相关。浙贝母发育过程中和基因均在鳞茎中高表达,且与淀粉含量呈显著正相关,表达量随鳞茎发育逐渐增大,仅在发育末期下降,原因可能为鳞茎在成熟时发育速率减慢且需降低生理活性为进入休眠期做及木薯在块茎中表达量最高的结果致,甜菜中基因在根部大量表达,柑橘中基因高表达部位为果汁囊,以上结果说明基因主要在蔗糖积累部位高表达。浙贝母鳞茎中基因的表达量与蔗糖含量变化致,为初期降低中期升高末期降低,推测原因可能为浙贝母鳞茎发育初期新老鳞茎营养转化......”

8、“.....蔗糖合成速率较低,糖类配合淀粉合成促使鳞茎迅速膨大发育中期鳞茎发育趋势平稳,蔗糖淀粉共同增加,此时主要行使蔗糖合成功能末期植株发育基本停滞,鳞茎为进入休眠期储存能量,则行使蔗糖分解功能,分解蔗糖为葡萄糖并输送至淀粉体用于淀粉合成。等通过转录因子影响木薯块茎中基因表达进而调控淀粉积累,以及等通过超表达基因提高水稻中淀粉积累,都证明了基因可分解蔗糖,从而为淀粉合成提供底物。蔗糖合成过程中酶的生化功能是催化果糖磷酸和葡萄糖转化为蔗糖磷酸,再含量使用高效液相法测定蔗糖含量参照刘欣等的方法,色谱柱为美国沃特世公司,流动相为乙腈内含乙胺,流速,柱温,进样量,所用标样为色谱纯级蔗糖。总提取质量与产率检测使用多糖多酚植物总提取试剂盒天根生化科技有限公司,北京,参考试剂盒说明方法提取总。使用微型分光光度计上海美谱达仪器有限公司测定所提取浓度以及吸光度比值和,取溶液与混匀......”

9、“.....引物设计及序列克隆选取中已注册物种序列进行多序列比对,通过软件设计上下游克隆所需基因保守端序列,使用软件设计引物并通过试剂盒,宝日医生物技术北京有限公司获取序列,在块茎中表达量较高,黄芪中基因在毛状根及根中表达量高于茎和叶,木薯中基因只在块茎成长时期表达,百合中基因在鳞茎表达量较高,浙贝母中基因在鳞茎中表达量也远高于其他部位,可见基因在鳞茎发育中具有重要作用。基因共同参与支链淀粉合成,在水稻小麦玉米马铃薯大麦拟南芥中将基因表达敲低后作物中支链淀粉及总淀粉含量明显降低。水仙中基因在花器发育期高表达,莲藕根状茎伸长过程中基因表达量不断变化,表明基因与植物发育密切相关。浙贝母发育过程中和基因均在鳞茎中高表达,且与淀粉含量呈显著正相关,表达量随鳞茎发育逐渐增大,仅在发育末期下降,原因可能为鳞茎在成熟时发育速率减慢且需降低生理活性为进入休眠期做准备......”

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