1、“.....种植于川农业大学温江教学试验基地。田间收取成熟红花的种子及红花幼嫩根茎叶和花植物器官臵于液氮冷冻的离心管中，臵于冰箱备用。总提取及过对红花热胁迫相关转录因子进行克隆及序列分析，利用荧光定量来测定其在不同发育时期红花种子中和不同植物组织中表达情况。该研究对改良红花品质，探究其抗逆性具有重要意义。结果与分析基因克隆以样品总反转录合成的为模板进行扩增，电泳结果显示在的位臵上有清晰的条带图。将该条带回收纯化后与载体进行连接，涂布于含有氨苄青霉素抗性的培养基上，培养。运用菌落鉴定阳性克隆。随机挑取个单独菌斑送往擎科测序，中国。测序结果显示，目的片段大小，与电泳结果致。蛋白的理化性质和跨膜结构分析基因全长，预测蛋白质相对分子质量。该基因编码个氨基酸的级结构蛋白的同源性分析选取莴苣刺菜蓟向日葵等种植物的基因序列，通过进行多源序列比对，然后用构建系统进化树......”。

2、“.....结果显示在氨基酸序列段具有典型的结构域图，其是具有的特征结构域，。系统发育树结果表明整个发育树可分为大支，小果咖啡普通烟草林烟草和马铃薯分为大支，牵牛花单独为支，刺菜蓟红花等植物分为大支，其中红花与刺菜蓟进步分为分支，表明红花基因与刺菜蓟的亲缘关系最近。网站分析结果显示，红花基因列与其他植物基因序列均含基序基序基序基序，虽然红花中基序和基序位分析红花热激转录因子的克隆及其表达情况农业生物学论文，预测蛋白质相对分子质量。该基因编码个氨基酸，等电点为。最丰富氨基酸为亮氨酸，带正电残基个，带负电残基个。预计其在哺乳动物中的半衰期为，在酵母中为以上，在大肠杆菌中为以上，红花的不稳定指数为，性质不稳定，脂肪指数为。平均亲水性系数为，属于不稳定的亲水性蛋白。使用在线工具对红花蛋白的疏水性和亲水性进行预测分析，精氨酸具有最低分值，亲水性最强......”。

3、“.....疏水性最强。亲水氨基酸分布都比较均匀，并且数量大于疏水氨基酸图。利用在线工具对红花热激转录因子基因进行跨膜分析表明不含跨膜结构域，由此推断为可溶性蛋白。分析红花热激转反向引物，。首先将相同组分混匀配成混合液，之后分别加入不同体系中，以保证反应条件致性。再加入差异组分。反应条件是下，随后进行个循环的通过熔解曲线分析监测扩增的特异性，反应程序从到速度，对产物进行测序分析。在反应过程中，设定以纯水为模板的其他条件均致管作为阴性对照。每个荧光定量反应重复次。数据通过相对定量法对基因进行表达水平分析。表试验中所用基因引物序列，名称及用途参考文献段硕楠，李国良，张园园，郭秀林，植物热激转录因子家族的多样性和复杂性研究进展，中国农学通报，付晨熙，肖自华，高飞，周宜君，植物应答非生盒回收目的片段，连接到载体上，涂布于含氨苄青霉素抗性的培养基上，培养。挑取单独菌斑送往公司测序，中国......”。

4、“.....利用中对测序结果进行分析。使用对蛋白质的相对分子质量平均疏水性等电点等进行分析。利用软件对红花热激转录因子氨基酸序列功能结构域进行预测。使用在线分析工具对红花热激转录因子氨基酸序列进行信号肽的可能性分析。使用在线工具对红花蛋白的疏水性和亲水性进行预测分析。使用软件进行氨基酸多源序列比对的分析。使用软件构建关关于红花中热激转录因子在抗逆性过程中所发挥的作用及分子机理还有待于进步探究。目前本试验正在进步构建关于基因的过表达载体，并将重组载体转化拟南芥植株，对转基因植株的抗逆性进行评价。并根据前期转录组数据，初步对转录因子调控的下游基因进行筛选。为后续开展红花逆境相关转录因子的机理研究做铺垫，同时也为植物抗逆性状的改良提供研究基础。材料与方法试验材料供试材料为川红号红花品种，经川农业大学吴卫教授鉴定......”。

5、“.....田间收取成熟红花的种子及红花幼嫩根茎叶和花植物器官臵于液氮冷冻的离心管中，臵于冰箱备用。总提取及第链诱导了基因表达。曾有研究表明干旱等非生物胁迫导致植物脱水可诱导大量热激蛋白的表达段硕楠等，而热激蛋白表达需要依靠热激转录因子与启动子区热激元件相结合，故在红花种子发育可检测到相关基因表达。基因在根中高表达，推测因为该基因主要在根中发挥生物学功能，因此该基因在红花根受到胁迫伤害时发挥重要功能。虽然国内外已有关于基因功能的相关研究，然而不同植物中基因功能具有较明显差异。近年来国内外分别在棉花，水稻，等植物中克隆得到了基因，经组织表达分析发现其在种子中具有特异表达性。有研究曾在测定车前根组织中热激蛋白有积累，推测热激蛋生作用，可能与些转录因子或蛋白协同作用，当烟草中缺失后，些基因表达会下调，并且同另外的些基因起控制基因的表达，从而影响种子寿命，......”。

6、“.....因此推测还存在个或几个种子特异转录因子或其他修饰蛋白可以与和相互作用，从而调控等基因的表达，。近年来，关于转录因子的研究报道越来越多。转录因子与顺式元件作用从而调控相关基因表达的分子机理是研究基因在些环境条件下发挥功能的重要内容黎帮勇等，。热激转录因子分析及表达分析，初步鉴定红花热激转录因子基因。基因序列全长，编码个氨基酸。基因在多个植物中存在较高的同源性。多序列同源比对和进化树分析表明该基因具有典型结构域。与刺菜蓟的同源性较近。同时结果表明基因在脱水时期的种子发育和根中相对表达量最高，叶次之，花中最低。分析可能的原因为的种子处于快速脱水的时期，种子的脱水信号诱导了基因表达。曾有研究表明干旱等非生物胁迫导致植物脱水可诱导大量热激蛋白的表达段硕楠等，而热激蛋白表达需要依靠热激转录因子与启动子区热激元件相结合，故在红花种子发育可检测到相关基因表达。正向引物......”。

7、“.....。首先将相同组分混匀配成混合液，之后分别加入不同体系中，以保证反应条件致性。再加入差异组分。反应条件是下，随后进行个循环的通过熔解曲线分析监测扩增的特异性，反应程序从到速度，对产物进行测序分析。在反应过程中，设定以纯水为模板的其他条件均致管作为阴性对照。每个荧光定量反应重复次。数据通过相对定量法对基因进行表达水平分析。表试验中所用基因引物序列，名称及用途参考文献段硕楠，李国良，张园园，郭秀林，植物热激转录因子家族的多样性和复杂性研究进展，中国农学通报，付晨熙，肖自华，高飞，周宜君，植分析红花热激转录因子的克隆及其表达情况农业生物学论文白的积累除受高温脱水影响外，也有可能因脱落酸等物质刺激而引起热激转录因子发挥功能，。随着研究的深入，将进步对不同热激转录因子的协同作用进行探索。有研究发现基因在植物体内发生作用，可能与些转录因子或蛋白协同作用，当烟草中缺失后......”。

8、“.....并且同另外的些基因起控制基因的表达，从而影响种子寿命，。试验发现和没有直接的相互作用，因此推测还存在个或几个种子特异转录因子或其他修饰蛋白可以与和相互作用，从而调控等基因的表达，的转录受和的正向调节，受的负向调节。同时研究发现可以通过直接与的启动子相互作用从而调控的表达，。本试验在红花中克隆热激转录因子基因，通过序列分析及表达分析，初步鉴定红花热激转录因子基因。基因序列全长，编码个氨基酸。基因在多个植物中存在较高的同源性。多序列同源比对和进化树分析表明该基因具有典型结构域。与刺菜蓟的同源性较近。同时结果表明基因在脱水时期的种子发育和根中相对表达量最高，叶次之，花中最低。分析可能的原因为的种子处于快速脱水的时期，种子的脱水信号胶回收试剂盒回收目的片段，连接到载体上，涂布于含氨苄青霉素抗性的培养基上，培养。挑取单独菌斑送往公司测序，中国......”。

9、“.....利用中对测序结果进行分析。使用对蛋白质的相对分子质量平均疏水性等电点等进行分析。利用软件对红花热激转录因子氨基酸序列功能结构域进行预测。使用在线分析工具对红花热激转录因子氨基酸序列进行信号肽的可能性分析。使用在线工具对红花蛋白的疏水性和亲水性进行预测分析。使用软件进行氨基酸多源序列比对的分析。使用，是调控热激蛋白在逆境中表达的类转录因子，他们在基因启动时可以与其启动子区的原件结合，从而调控热激蛋白的转录。转录因子属于家族的员，具有典型的结构域可以激活蛋白的表达，参与植物的抗逆过程。研究发现，在烟草中异位过表达向日葵种子中的基因，可以激活叶片中原本低丰度的小分子量热激蛋白的转录，提高的量子产率，保护和蛋白，保护光合膜，使转基因烟草具有抵抗极端干旱和氧化胁迫的能力......”。