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不同动物源葡萄球菌分离株的亲缘性及耐药性分析(微生物学论文) 不同动物源葡萄球菌分离株的亲缘性及耐药性分析(微生物学论文)

格式:word 上传:2023-05-06 13:07:00

《不同动物源葡萄球菌分离株的亲缘性及耐药性分析(微生物学论文)》修改意见稿

1、“.....毛小琴,刘有福,贾雄飞,等种快速检测表皮葡萄球菌的方法中国专利,杨洋,张伟,袁耀武,等内科病区临床分离株时,确定在人源金黄色葡萄球菌中呈优势型,刘建华等在研究年月年月新疆军区总院重症监护病房分离的金黄色葡萄球菌时也得出相同结论,上述现象提示在同地区分离的不同来源菌株可能存在克隆传播的情况,耐药菌会在人与动物之间相互传播,这种现象加大了临床治疗的难度,甚至不同地区菌群之间可以通过耐药质粒的转导转化和接合等方式传递耐药性导致临床上选择合适的抗菌药物用以预防和治疗细菌感染的难度成倍增加。新疆焉耆县不同动物源耐药表皮葡萄球菌遗传背景较为复杂,表明耐药菌株来源并非单,结果高度分化,提示细菌获得耐药性的风险较大。且不同养殖场不同动物源细菌之间可能存析本研究对新疆焉耆县不同动物源株金黄色葡萄球菌进行分型分析......”

2、“.....其中均发现株为相对优势型,其余型均只含有株菌,菌株母源和进化情况较为复杂。通过型种群图无法直观看出各金黄色葡萄球菌菌株之间的联系,但是可以确定菌株型和型互为,且其他型均独立于各自的谱系组中,相互关系并不密切。通过进化树分析发现部分菌株有较近的亲缘性关系,而菌株自成体,与其他菌株亲缘性较远。通过聚类分析我们发现鸡源菌与其他动物源菌之间同源性关系不大,而羊源菌猪源菌和牛源菌之间联系十分密切,相互之间有较近的遗传不同动物源葡萄球菌分离株的亲缘性及耐药性分析微生物学论文他未检测或未知的耐药基因,或者是存在其他的耐药机制。表皮葡萄球菌分子分型结果分析新疆焉耆县不同动物源株表皮葡萄球菌分型结果发现存在种图谱,其中半以上被检菌株属于簇和簇,为优势谱型。董志民等对同地区不同养殖场株牛源耐药表皮葡萄球菌中发现种不同谱型。表明耐药菌株来源并非单,结果高度分化......”

3、“.....猪源菌和牛源菌的相似度接近,猪源菌和羊源菌的相似度接近,猪源菌和羊源菌的相似度接近,提示在相同地区不同农场的不同动物源菌存在克隆传播。曾淑仪在年发现在相同地区不同动物源之间发基因及引物结果细菌鉴定及耐药性结果经鉴定,株葡萄球菌中株为表皮葡萄球菌,株为金黄色葡萄球菌。药敏试验结果表明,以上菌株均为高度耐药菌株,株表皮葡萄球菌仅在庆大霉素和阿米卡星种药物中表现较低的耐药性,株金黄色葡萄球菌仅对庆大霉素阿米卡星和氧氟沙星种药物表现出较低的耐药性,对其他药物均呈高度耐药表。耐药基因检出情况株表皮葡萄球菌中基因的检出率较低,仅在株菌中检出,检出率为,其余基因检出率均在以上株金黄色葡萄球菌中基因基因和基因检出率较低,检出率依次为和,其余基因检出率均在以上表。不同动物源葡萄球菌分离株的亲缘性及耐药性分析微生物学素......”

4、“.....表皮葡萄球菌分子分型结果因细菌在繁殖过程中其所携带的遗传物质极易发生变异,故而在判定菌株同源性时有部分差异的存在是被允许的。等提出在使用判断菌株同源性时,若重合度大于则判定为同种基因指纹图谱,若重合度大于则判定为同型别基因指纹图谱,若重合度低于则判定为流行病学不相关。如图所示,本文根据上述原则得到类基因指纹图谱,分别以簇进行命名,簇包含菌株,其中株猪源表皮葡萄球菌,株牛源表皮葡萄球菌簇包含菌株,其中株猪源表皮葡萄球菌,株羊源表皮葡萄球菌簇包含菌株鸡源表培养基及试剂培养基,北京奥博星生物技术有限公司产品琼脂基础亚碲酸盐卵黄增菌液甘露醇氯化钠琼脂培养基,青岛海博生物技术有限公司产品氯化钠,天津市光复科技发展有限公司产品电泳缓冲液电泳缓冲液缓冲液缓冲液蛋白酶缓冲液蛋白酶冲洗缓冲液溶菌酶缓冲液胶块模板溶葡萄球菌酶缓冲液限制性内切酶低融点琼脂糖......”

5、“.....北京天根生化科技有限公司产品核酸染料,上海徕创生物科技公司合成。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后经凝胶成像系统拍照分析,将目的片段进行胶回收并送生工生物工程上海有限公司测序,最后进行序列比对,确定基因型。扩增反应体系酶,上下游引物各,模板,灭菌超纯水。操作按说明书进行。常规的血清学分型法已不能达到通过分型来追朔感染源监控耐药性等目的。分子生物学分型方法中脉冲场凝胶电泳技术于年建立以来,依靠其较好的分辨力和重复性,而被誉为分子生物学分型金标准,多位点序列分型是种近年来发展起来的基于核酸序列测定的新型分子生物学分型方法,具有操作简便且结果准确的特点。目前这两种分子技公司产品台式冷冻离心机,德国公司产品。药物氨基糖苷类庆大霉素阿米卡星喹诺酮类氧氟沙星酰胺醇类氟苯尼考环素类环素林可胺类克林霉素安莎霉素类利福平内酰胺类阿莫西林克拉维酸苯唑西林头孢噻呋青霉素......”

6、“.....常规的血清学分型法已不能达到通过分型来追朔感染源监控耐药性等目的。分子生物学分型方法中脉冲场凝胶电泳技术于年建立以来,依靠其较好的分辨力和重复性,而被誉为分子生物学分型金标准,多位点序列分型是种近年来发展起来的基于核酸序列测定的新型分子生物学分型自动物肛拭子,且多来源于猪,仅株牛源菌,簇菌株则分别来自同种动物源的肛拭子和鼻拭子样。此外,从不同动物源分离株发现存在相同的基因指纹图谱,簇包含猪源菌株和牛源菌株,簇包含猪源菌株和羊源菌株。表葡萄球菌来源耐药结果及耐药基因携带情况注林霉素西林克拉维酸培养基及试剂培养基,北京奥博星生物技术有限公司产品琼脂基础亚碲酸盐卵黄增菌液甘露醇氯化钠琼脂培养基,青岛海博生物技术有限公司产品氯化钠,天津市光复科技发展有限公司产品电泳缓冲液电泳缓冲液缓冲液缓冲液蛋白酶缓冲液上菌株均为高度耐药菌株......”

7、“.....株金黄色葡萄球菌仅对庆大霉素阿米卡星和氧氟沙星种药物表现出较低的耐药性,对其他药物均呈高度耐药表。耐药基因检出情况株表皮葡萄球菌中基因的检出率较低,仅在株菌中检出,检出率为,其余基因检出率均在以上株金黄色葡萄球菌中基因基因和基因检出率较低,检出率依次为和,其余基因检出率均在以上表。表皮葡萄球菌分子分型结果因细菌在繁殖过程中其所携带的遗传物质极易发生变异,故而在判定菌株同源性时有部分差异的存在是被允许的。等提出在使用不同动物源葡萄球菌分离株的亲缘性及耐药性分析微生物学论文型方法均广泛应用于疾病感染来源的追溯耐药性传播的监控等工作。本研究通过对新疆焉耆县株不同动物源耐药表皮葡萄球菌进行分子分型,株不同动物源耐药金黄色葡萄球菌进行分子分型来研究不同动物源耐药菌株之间的亲缘关系,以期了解不同动物源耐药菌株间耐药性可能的传播方式......”

8、“.....材料与方法材料试验菌株株菌均为新疆农业大学动医学院药理实验室年从新疆焉耆县不同动物源样品中分离保存的葡萄球菌菌株,其中猪源株羊源株鸡源株牛源株。标准质控菌,购自杭州天和微生物试剂有限公司。不同动物源葡萄球菌分离株的亲缘性及耐药性分析微生物学论文葡萄球菌分离株的亲缘性及耐药性分析微生物学论文。模板制备与耐药基因的检测将葡萄球菌划线接种在固体培养基上,培养,用接种环挑取个个单菌落加入缓冲液中,煮沸,离心,取上清,臵保存备用。根据细菌耐药情况,参考相关文献报道合成介导环素类药物耐药的基因,介导内酰胺类药物耐药的基因,介导酰胺醇类药物耐药的基因介导氯霉素类林可胺类恶唑烷酮类截短侧耳素类链阳菌素类种药物耐药的基因介导红霉素和克林霉素耐药的基因等种相关耐药基因的引物序列表。引物由生工生物工程上海有药性研究中国预防兽医学报,朱娇玲,乔霞,李雪......”

9、“.....曾淑仪广东地区葡萄球菌中耐药基因的流行性研究广东广州华南农业大学,孟丹,孟庆玲,乔军,等奶牛源金黄色葡萄球菌新疆流行株的耐药特性毒力基因及分子分型畜牧兽医学报,孟丹,孟庆玲,乔军,等奶牛临床型乳房炎新疆流行株耐药基因的检测及分型研究家畜生态学报,王登峰,段新华,吴建勇,等牛源金黄色葡萄球菌耐药性及甲氧西林敏感和耐甲氧西林菌株演化相关性研究畜牧兽医学报,袁文常,常萍,李晓玲,等内科病区金黄色葡萄法,具有操作简便且结果准确的特点。目前这两种分子分型方法均广泛应用于疾病感染来源的追溯耐药性传播的监控等工作。本研究通过对新疆焉耆县株不同动物源耐药表皮葡萄球菌进行分子分型,株不同动物源耐药金黄色葡萄球菌进行分子分型来研究不同动物源耐药菌株之间的亲缘关系......”

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