1、“.....室温固定。弃去固定液后，用含脱脂奶的溶液于封闭。加入脱脂奶稀释的抗，于结合。清洗细胞次，再加入脱脂奶稀释的抗，于结合。清洗细胞次，用稀释，于室温孵育细胞。最后观察蛋白在细胞内的定位。关键词信号肽病毒血凝素载体构建重组蛋白表达血凝素，是型流感病毒，的囊膜蛋白，是引发定位，因此在抗病毒药物的研究中可以通过干扰信号肽序列影响蛋白的功能，进而影响子代病毒的产生及传播。总之，在本文中发现信号肽会影响蛋白的表达及定位，这为进步对蛋白进行生物学分析奠定了基础。参考文献刘文，胡巍，王洪海酵母表达基因工程产物特性分析中国生物工程杂志，林洪羽人类信号肽介导卵清蛋白基因在真核细胞的高效分泌表达全国动物生理生化第届全国代表大会暨第十次学术交流会，沈阳，苏艳，张宝江，申煜，等信号肽序列对禽流信号肽序列对型流感病毒蛋白表达影响研究病毒学论文于不含信号肽的蛋白......”。

2、“.....未发生完全剪切。这可能是由于细胞内的剪切酶活力不足以应对快速合成的新蛋白，这种不完全剪切在外源性表达酵母基因工程产物的过程中也会出现。但引起不完全剪切的具体原因，还需要更多的试验予以探明。荧光显微镜检查结果显示，蛋白的信号肽序列会影响蛋白在细胞内的定位，其中，含有信号肽的主要定位在胞膜上，而不含信号肽的主要定位在胞质中。此外，有数据表明信号肽的有无会影更好的分析。因此，成功构建的重组载体可以用来进行免疫共沉淀及间接免疫荧光试验，检测外源性表达的病毒蛋白，节省病毒蛋白抗体的经费支出。信号肽位于新生多肽链的末端，介导蛋白质向内质网转移。信号肽在序列和长度上各有不同，通常为含有特征性结构的至个氨基酸残基端带正电荷，具有亲水性中间部分包含数个疏水残基端具有信号肽酶切割位点。除了可以将蛋白质靶向转运至内质网膜，信号肽还可以调节蛋白质的分泌效率......”。

3、“.....利用分别检测蛋白表达情况，结果如图图所示，蛋白大小存在明显差异，并且含有信号肽的蛋白表达量低于不含信号肽的蛋白表达量。图重组载体菌液鉴定结果图鉴定重组蛋白表达情况信号肽对蛋白在细胞内定位的影响为了研究信号肽对蛋白定位的影响，进行了间接免疫荧光试验，检测在细胞内的定位情况。结果发现，含有信号肽序列的蛋白主要集中在胞膜位臵图，而不含信号肽的主要试剂公司，鼠单抗公司，辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠抗标记的羊抗鼠荧光抗公司，基因扩增高保真酶试剂盒和连接酶南京诺威赞生物科技有限公司，质粒小提试剂盒天根生物公司其他常用试剂为国产分析纯。结果基因扩增及质粒的构建信号肽引导蛋白方法菌株载体及细胞大肠杆菌感受态细胞和细胞来自本实验室保存细胞。型流感病毒株为本实验室保存材料，通过日龄鸡胚扩毒，病毒的毒价为。重组质粒的构建扩增目的基因后，进行清洁回收。回收产物进行双酶切......”。

4、“.....酶切，回收酶切产物，然后利用连接酶连接。连接过夜，取连接产物转化感验过程中可以利用信号肽来控制外源性蛋白的表达，但引起蛋白减少的具体原因还有待研究。有研究显示，信号肽序列部分氨基酸的缺失将会影响蛋白糖基化成熟以及红细胞凝集的功能，而在本试验中发现信号肽会影响蛋白的表达及定位，因此在抗病毒药物的研究中可以通过干扰信号肽序列影响蛋白的功能，进而影响子代病毒的产生及传播。总之，在本文中发现信号肽会影响蛋白的表达及定位，这为进步对蛋白进行生物学分析奠定了基础。参考文献刘文，胡标签连接到未去除信号肽的蛋白的羧基端，意在探讨信号肽对蛋白在细胞中表达的影响。虽然信号肽在引导蛋白到达细胞内合适的位臵后会被切除，结果仍能检测到部分含有信号肽的蛋白，并且大小明显大于不含信号肽的蛋白，表明信号肽在指导蛋白合成以及定位后，未发生完全剪切......”。

5、“.....这种不完全剪切在外源性表达酵母基因工程产物的过程中也会出现。但引起不完全剪切的具就会造成巨大的经济损失。是流感病毒不可或缺的功能性蛋白，病毒通过结合宿主受体进入细胞，参与病毒感染过程。标签通常不会影响目的蛋白的功能，本文成功构建含有标签的蛋白，这有助于对蛋白进行更好的分析。因此，成功构建的重组载体可以用来进行免疫共沉淀及间接免疫荧光试验，检测外源性表达的病毒蛋白，节省病毒蛋白抗体的经费支出。信号肽位于新生多肽链的末端，介导蛋白质向内质网转移。信号肽在序列和长度上各有不同，信号肽序列对型流感病毒蛋白表达影响研究病毒学论文受态细胞，在含有抗性的固体平板上过夜培养。挑取单克隆菌落进行菌液鉴定，选取个阳性克隆，送南京通用生物技术有限公司进行测序。将测序比对正确的菌株进行保种以备后续试验使用......”。

6、“.....材料与方法菌株载体及细胞大肠杆菌感受态细胞和细胞来自本实验室保存细胞。型流感病毒株为本实验室保存材料，通过日龄鸡胚扩毒，病毒的毒价为蛋白表达影响研究病毒学论文。主要试剂公司，鼠单抗公司，辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠抗标记的羊抗鼠荧光抗公司，基因扩增高保真酶试剂盒和连接酶南京诺威赞生物科技有限公司，质粒小提试剂盒天根生物公司其他常用试剂为国产分析纯。材料体，菌液鉴定结果如图所示。菌液所得条带均与阳性对照条带的分子量大小相符。信号肽对蛋白表达的影响获得测序正确且含有信号肽的质粒和不含信号肽的质粒后，将其转染细胞。收取细胞样品，利用分别检测蛋白表达情况，结果如图图所示，蛋白大小存在明显差异，并且含有信号肽的蛋白表达量低于不含信号肽的蛋白表达量。图重组载体菌液鉴定结果图鉴，王洪海酵母表达基因工程产物特性分析中国生物工程杂志......”。

7、“.....沈阳，苏艳，张宝江，申煜，等信号肽序列对禽流感病毒蛋白融合分子在真核细胞中表达的影响微生物学报，郑屠园，李娅慧，周继勇，胡伯里信号肽序列对型流感病毒蛋白表达的影响畜牧与兽医，基金国家自然科学基金。信号肽序列对型流感病毒原因，还需要更多的试验予以探明。荧光显微镜检查结果显示，蛋白的信号肽序列会影响蛋白在细胞内的定位，其中，含有信号肽的主要定位在胞膜上，而不含信号肽的主要定位在胞质中。此外，有数据表明信号肽的有无会影响蛋白的表达及分泌情况。本试验和间接免疫荧光结果都发现，检测到的含有信号肽的蛋白表达量比不含信号肽的蛋白表达量少，表明信号肽的存在会减少蛋白的表达量，这与苏艳等的报道是致的。因此在试通常为含有特征性结构的至个氨基酸残基端带正电荷，具有亲水性中间部分包含数个疏水残基端具有信号肽酶切割位点......”。

8、“.....信号肽还可以调节蛋白质的分泌效率。尽管已有许多关于信号肽控制蛋白的膜定位的研究，但是还没有信号肽对于流感病毒蛋白的具体表达定位的分析。本研究中将的蛋白分别引入及载体中，其中前者将标签连接到去除信号肽的的氨基端，而后者将定重组蛋白表达情况信号肽对蛋白在细胞内定位的影响为了研究信号肽对蛋白定位的影响，进行了间接免疫荧光试验，检测在细胞内的定位情况。结果发现，含有信号肽序列的蛋白主要集中在胞膜位臵图，而不含信号肽的蛋白主要分布在细胞质中图。此外，与图结果致的是含有信号肽的蛋白表达量低于不含信号肽的蛋白表达量。图荧光显微镜检测重组蛋白定位情况讨论流感病毒是造成养禽业重大损失的主要病毒之，如果防控不信号肽序列对型流感病毒蛋白表达影响研究病毒学论文加入脱脂奶稀释的抗，于结合。清洗细胞次，再加入脱脂奶稀释的抗，于结合。清洗细胞次，用稀释，于室温孵育细胞......”。

9、“.....结果基因扩增及质粒的构建信号肽引导蛋白进入内质网加工后会被切除，为了避免因信号肽切除而丢失检测标签，将标签蛋白臵于基因蛋白的端，成功构建了含有信号肽的载体，菌液鉴定结果如图所示。接着又构建了不含有信号肽序列的机体感染的重要蛋白之，对病毒的致病性以及毒力至关重要。此外，在病毒感染过程中也发挥着重要作用通过识别在宿主细胞表面受体，进而吸附在宿主细胞上还可以介导病毒囊膜与宿主细胞膜的融合，促进病毒入胞，完成感染。现如今，共发现了个亚型，其中在水禽中流行，和是从蝙蝠中分离出来的。几乎所有的蛋白质都是在细胞质中合成的，信号肽，是位于新合成蛋白质端的段的序列，可以指导蛋白质在胞质的感病毒蛋白融合分子在真核细胞中表达的影响微生物学报，郑屠园，李娅慧，周继勇，胡伯里信号肽序列对型流感病毒蛋白表达的影响畜牧与兽医，基金国家自然科学基金......”。