1、“.....鸡胚购自北京勃林格殷格翰维通生物技术有限公司批号,总提取试剂购自天根生化科技北京有限公司批号,聚合酶购自公司,胶回收试剂盒购自公司。方法样品检测将采集的猪鼻拭子样品经型流感病毒通用型荧光试剂盒检测,阳性样品用于病毒的分离。王建,赵洪进上海地区猪流感病毒的分离与鉴定畜牧与兽医,基金上海市科技兴农重点攻关项目沪农科基字第号。关于猪流感病毒上海分离株的鉴定和病毒特性研究病毒学论文。图病毒的电镜观察图和基因片段的基因进化树注黑色实心角代表分离株红细胞凝集试验在测试分离株对种红细胞凝集作用的试验中,连续代病毒都对鸡红细胞人型红细胞和猪红细胞有凝集作用,牛羊关于猪流感病毒上海分离株的鉴定和病毒特性研究病毒学论文研究,但是病毒是否会在猪群中持续演化和重配进而传染给人,以及是否会对猪造成更严重的致病性有待于进步的研究。参考文献付新亮,方博,王丽芳......”。
2、“.....唐续,杨焕良,鄢明华,等株人源亚型猪流感病毒的进化分析与生物学特性研究中国预防兽医学报,赵朴,郑玉姝,贾贝贝,等猪流感病毒河南株的分离鉴定和生物学特性华北农学报,汪琪,刘晓敏,杨海明,等源重组亚型猪流感病耐受性,且对鸡胚低致病性的型亚型猪流感病毒。根据以往的分离与鉴定的经验,本研究将待分离样本首先进行细胞培养,再进行鸡胚传代,获得了分离株。临床实践中,猪群感染多为过性,且日龄鸡胚购买后还需要继续孵化,样本保存时间较长不利于的分离,使用进行初步的培养有利于提高分离效率。同时在细胞中增殖滴度没有在鸡胚中高,且病毒的血凝活性容易丢失,因此病毒的增殖第代尿囊液的为。表血凝素热稳定性试验注,表示处理后的分离株接种鸡胚后其尿囊液阳性数,表示鸡胚的接种数......”。
3、“.....对阳性样品进行了病毒分离,并分离到株,选择其中株将其命名为。采用血凝试验电镜观察血凝素和神经氨酸酶测序等方法对该病毒特性研究红细胞凝集试验测定分离株对鸡人型牛猪兔绵羊和马等红血球的凝集活性。血凝素热稳定性试验将分离株分为组,分装于个灭菌离心管中,臵水浴中分别处理及过夜,处理后离心管迅速臵于冰箱,分别测定其血凝效价。血凝素热稳定性判定方法设定血凝活性下降个滴度的时间为,当时为热不稳定型当时为中等热稳定型当时为热稳定型。耐热性试验分离株分为个组,每组,于水浴作用份阳性猪鼻拭子样品进行病毒分离,其细胞培养液和鸡胚尿囊液均有血凝性,选择其中株病毒命名为,经测试后其血凝价分别为和。关于猪流感病毒上海分离株的鉴定和病毒特性研究病毒学论文。和序列的测定参照文献提供的方法扩增分离株的和片段,节段的引物序列为节段的引物序列为热稳定型。耐热性试验分离株分为个组......”。
4、“.....于水浴作用和,水浴作用和,每个处理接种枚鸡胚,培养,收集死亡或未死亡鸡胚的尿囊液,测定血凝效价。病毒耐热性判定方法设定水浴作用的时间为,当病毒存活,则判定为该温度下耐热,否则为不耐热。和序列的测定参照文献提供的方法扩增分离株的和片段,节段的引物序列为及其特性中国兽医科技,温纳相,吴德铭,宋延华,等猪流感病毒的分离与鉴定畜牧与兽医,张发明,郑杰,王文泉,等草鸡源亚型禽流感病毒的分离与鉴定中国畜牧兽医,黄良宗,顾万军,王淑敏,等亚型猪流感病毒分离与鉴定动物医学进展,段震,刘景华动物病毒学版北京科学出版社,刘健,杨显超,葛菲菲,李鑫,杨德全,沈海潇,鞠厚斌,王建,赵洪进上海地区猪流感病毒的分离与鉴定畜牧与兽医,基金上海市科技兴农重点攻关项目沪农科基字第毒的滴度,为今后的分离提供了帮助。猪被认为是禽流感病毒对人的适应过程的中间宿主或是作为遗传学上重配病毒的混合器......”。
5、“.....加强猪群中流感病毒的检测,制定合理科学的防治措施,具有重要的公共卫生学意义。本研究从上海地区的猪群中分离到类禽型型亚型,虽然进行了初步的病毒特性研究,但是病毒是否会在猪群中持续演化和重配进而传染给人,以及是否会对猪造成更严重的致病性有待于进步关于猪流感病毒上海分离株的鉴定和病毒特性研究病毒学论文,其中片段大小为,片段大小为。将产物电泳,经凝胶回收,按载体说明书进行连接转化,阳性克隆送桑尼生物有限公司测序。和核苷酸序列同源性分析和遗传演化分析将和核苷酸序列经检索,进行同源性分析借助软件中的程序进行进化分析并绘制系统发育树,确定病毒和亚程序进行进化分析并绘制系统发育树,确定病毒和亚型。鸡胚半数感染量的测定病毒用缓冲液倍倍比稀释至,接种日龄鸡胚,每个稀释度接种枚,培养,每隔照胚次,收集死亡或未死亡鸡胚的尿囊液,分别测定血凝效价......”。
6、“.....按法计算。结果样品检测经型流感病毒通用型荧光试剂盒检测,份猪鼻拭子样品中有份为阳性。分离株血凝试验将兔和马红细胞无凝集活性,符合猪流感病毒特性。属于血凝素热稳定型,耐高温,但对敏感对乙醚氯仿和酸敏感,般消毒剂均能将其灭活,与已报道的猪流感病毒特性致。对鸡胚无致死性,因此认为其对鸡胚为低致病性。研究结果表明,上海地区猪群中存在对环境具有较强耐受性,且对鸡胚低致病性的型亚型猪流感病毒。根据以往的分离与鉴定的经验,本研究将待分离节段的引物序列为,其中片段大小为,片段大小为。将产物电泳,经凝胶回收,按载体说明书进行连接转化,阳性克隆送桑尼生物有限公司测序。和核苷酸序列同源性分析和遗传演化分析将和核苷酸序列经检索,进行同源性分析借助软件中的号。关于猪流感病毒上海分离株的鉴定和病毒特性研究病毒学论文......”。
7、“.....血凝素热稳定性试验将分离株分为组,分装于个灭菌离心管中,臵水浴中分别处理及过夜,处理后离心管迅速臵于冰箱,分别测定其血凝效价。血凝素热稳定性判定方法设定血凝活性下降个滴度的时间为,当时为热不稳定型当时为中等热稳定型当时为的研究。参考文献付新亮,方博,王丽芳,等株亚型猪流感病毒的分离鉴定及其遗传进化分析中国预防兽医学报,唐续,杨焕良,鄢明华,等株人源亚型猪流感病毒的进化分析与生物学特性研究中国预防兽医学报,赵朴,郑玉姝,贾贝贝,等猪流感病毒河南株的分离鉴定和生物学特性华北农学报,汪琪,刘晓敏,杨海明,等源重组亚型猪流感病毒反向遗传操作平台的建立中国动物传染病学报,王连想,毕英佐,曹永长,等猪流感病毒广东株的分离鉴定样本首先进行细胞培养,再进行鸡胚传代,获得了分离株。临床实践中,猪群感染多为过性,且日龄鸡胚购买后还需要继续孵化......”。
8、“.....使用进行初步的培养有利于提高分离效率。同时在细胞中增殖滴度没有在鸡胚中高,且病毒的血凝活性容易丢失,因此病毒的增殖和保存都在鸡胚中完成。本研究中病毒分离方法的优化有效地提高了病毒的分离效率,也保证了病关于猪流感病毒上海分离株的鉴定和病毒特性研究病毒学论文液阳性数,表示鸡胚的接种数。下同表耐热性试验表经不同方法处理后病毒对鸡胚的感染率讨论本研究对上海疑似感染的猪场猪鼻拭子样品进行了的荧光检测,对阳性样品进行了病毒分离,并分离到株,选择其中株将其命名为。采用血凝试验电镜观察血凝素和神经氨酸酶测序等方法对该分离株进行了鉴定和病毒特性研究。分离株在常温下对鸡红细胞人型红细胞和猪红细胞具有凝集活性,对牛羊图病毒的电镜观察图和基因片段的基因进化树注黑色实心角代表分离株红细胞凝集试验在测试分离株对种红细胞凝集作用的试验中,连续代病毒都对鸡红细胞人型红细胞和猪红细胞有凝集作用......”。
9、“.....表分离株对种红细胞的凝集作用血凝素热稳定性试验分离株在水浴,其血凝价未下降水浴后,其血凝价下降个滴度兔和马红细胞均无凝集作用表。表分离株对种红细胞的凝集作用血凝素热稳定性试验分离株在水浴,其血凝价未下降水浴后,其血凝价下降个滴度,其血凝素为热稳定型表。耐热性试验对进行耐热性鉴定,病毒在时都表现为耐热型表,在时表现为不耐热型表。材料与方法材料样品来源年月日,从上海猪场收集到疑似症状猪的鼻拭子份,冷藏,内送至实验室。试剂型流感病毒通用型荧毒反向遗传操作平台的建立中国动物传染病学报,王连想,毕英佐,曹永长,等猪流感病毒广东株的分离鉴定及其特性中国兽医科技,温纳相,吴德铭,宋延华,等猪流感病毒的分离与鉴定畜牧与兽医,张发明,郑杰,王文泉,等草鸡源亚型禽流感病毒的分离与鉴定中国畜牧兽医,黄良宗,顾万军,王淑敏......”。
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