1、“.....其中原位包埋法是对贴壁细胞原始形态与结构保存较为完好的种方法在观察些特殊结构如神经元的超薄切片技术探讨天津医科大学学报，白焕红，付洪兰，马淑芳琼脂铸模法制备透射电镜样品电子显微学报，杨怡，张飒，周涛，等透射电镜观察特定原位培养细胞样品的制备军事医学科学院院刊，钱晶晶，管怀进，朱昌来体外培养细胞原位包埋电镜样品的制作方法南京医科大学学报自然科学版，王旭，孔妤，杨侃，王玲玲，张宾不同固定方式对贴壁细胞形态和超微结构的影响电子显微学报，基金上海市科委项目中国科学院青年创新促进会项目。细胞收集先固定后刮取收集法用吸管轻轻移去培养液，磷酸缓冲液冲洗细胞，吸去磷酸缓冲液后，迅速加入戊醛，室温固定，固定后于倒置显微镜下观察并记录固定后细胞的形态，用细胞铲像的分辨率不足以识别细胞内部的结构......”。

2、“.....另外，在些实验中，先固定后刮除的方法，还可能将细胞外基质与细胞交联固定在起，难以将其去除。而先刮除后固定和胰酶消化法得到的细胞可以离心为较为紧实的团块，得到的细胞密度高，同时圆形胞体在电镜下容易放入同个视野图和，更容易对细胞内各细胞器的超微结构进行比较观察。总体而言，先固定后刮除得到的细胞形态和结构更接近于细胞的贴壁状态，而先刮除后固定和胰酶消化法得到的细胞，虽然偏离了正常贴壁细胞的形态，但细胞密度相对较高，观察也相对方便。因此，采用何种细胞样品的收集与固定方法最好根据实验者的具体要求来确定，如对细胞的形探究贴壁细胞形态和超微结构与固定方式的关联性细胞学论文成纤维细胞。结果发现无论是上皮细胞还是成纤维细胞，采用先固定后刮除方法处理，在刮除之前，细胞形态基本没有明显变化，固定后的细胞即使仅仅固定，刮下后仍能基本保持贴壁时的形态特点......”。

3、“.....细胞形态发生了明显的变化。推其原因，对于先固定后刮除方法处理的细胞，戊醛已将贴壁状态下细胞中的蛋白质和糖类等物质交联固定，固定后的细胞在被刮下时也就不会发生明显的变形。采用先刮除后固定和胰酶消化法处理的细胞，在离开贴壁状态后，仍是活细胞，在失去贴壁支持的情况下会迅速发生变形，此时再将细胞固定，只能获得游离后变形的细胞，而无法保留细胞的原始贴壁形态。从超微结构看，种不同固定方法得到的细胞，不体高尔基体内质网以及细胞核等结构清晰，未发现有明显的细胞损伤图，。采用先刮取后固定方法图，和胰酶消化法图，得到的细胞类似，在电镜下多呈圆形或卵圆形，细胞分布较为密集，通常数个细胞紧贴在起图细胞内线粒体内质网等超微结构清晰可辨，无明显细胞损伤图，。图细胞透射电镜图片，分别采用先固定后刮取法和，先刮取后固定法和和胰酶消化法和进行处理。细胞核内质网线粒体......”。

4、“.....其中原位包埋法是对贴壁细胞原始形态与结构保存较为完好的种方法在观察些特殊结构如神经元细胞间的突触前后连接神经元细胞的态贴壁细胞贴壁细胞电镜超微结构贴壁培养的细胞是透射电镜制样中常见的样品之，贴壁细胞透射电镜制样的前处理方法主要有种原位包埋法刮除离心法和消化离心法，。原位包埋法，是将细胞培养在玻璃或塑料载片上，然后连同载片起进行固定脱水渗透和包埋，适用于单层细胞，以观察细胞原有形貌和细胞间的连接关系，。除原位包埋的方法外，其它方法都需要将细胞样品悬浮和固定后，才能进行下步制样操作。刮除离心法通常是将培养的贴壁细胞用细胞铲轻轻刮下，然后离心成米粒状的小团块。根据戊醛固定的顺序不同，刮除离心法又可以分为先固定后刮取和先刮取后固定两种不同的方法。消化离心法是将培养的细胞用胰酶消化下来，收集离心团块，。种不同的细胞处理方法各第天将烘箱温度调至聚合......”。

5、“.....在超薄切片机，徕卡上用钻石刀，瑞士戴通进行超薄切片，切片收集在有支持膜的铜网上，厚度为。经醋酸铀和柠檬酸铅染色后，在透射电镜下观察并采集图片。结果不同固定方法对细胞形态的影响。探究贴壁细胞形态和超微结构与固定方式的关联性细胞学论文。摘要为探索和优化贴壁细胞透射电镜制样方法，本试验以鼠肾细胞系和小鼠成纤维细胞系的贴壁培养细胞为材料，采用种不同的固定方法，分别为先固定后刮取细胞先刮取细胞后固定和胰蛋白酶消化后固定，对细胞进行固定和收集紧密图。采用先固定后刮取方法，加入戊醛固定后，细胞形态未发生明显的变化图，将细胞刮下后，可见细胞聚集呈片状分布，细胞仍呈梭形，细胞之间保持贴壁状态下的紧密排列图。戊醛固定后，所表现出的特点与固定后的细胞类似，细胞形态无显著变化，呈梭形，细胞刮下后，聚集呈片状分布，细胞形态仍为梭形图，离心后，细胞沉淀呈絮状......”。

6、“.....用细胞铲刮下的活细胞，在脱离贴壁状态后，呈片状分布图，细胞形态由梭形转变为卵圆形或圆形图，使用戊醛固定后，细胞仍然保持卵圆形或圆形的形态特征，离心处理后的细胞呈紧实的块状。胰酶消化后的细胞在脱离贴壁状态后，原本紧密分布的细胞分散呈单个分布，细科学的依据。关键词固定细胞刮取细胞学细胞形态贴壁细胞贴壁细胞电镜超微结构贴壁培养的细胞是透射电镜制样中常见的样品之，贴壁细胞透射电镜制样的前处理方法主要有种原位包埋法刮除离心法和消化离心法，。原位包埋法，是将细胞培养在玻璃或塑料载片上，然后连同载片起进行固定脱水渗透和包埋，适用于单层细胞，以观察细胞原有形貌和细胞间的连接关系，。除原位包埋的方法外，其它方法都需要将细胞样品悬浮和固定后，才能进行下步制样操作。刮除离心法通常是将培养的贴壁细胞用细胞铲轻轻刮下，然后离心成米粒状的小团块。根据戊醛固定的顺序不同......”。

7、“.....消化离心法是将培养的细胞用胰酶消化下微学报，赵刚，曾嘉，杨海贤培养细胞的超薄切片技术探讨天津医科大学学报，白焕红，付洪兰，马淑芳琼脂铸模法制备透射电镜样品电子显微学报，杨怡，张飒，周涛，等透射电镜观察特定原位培养细胞样品的制备军事医学科学院院刊，钱晶晶，管怀进，朱昌来体外培养细胞原位包埋电镜样品的制作方法南京医科大学学报自然科学版，王旭，孔妤，杨侃，王玲玲，张宾不同固定方式对贴壁细胞形态和超微结构的影响电子显微学报，基金上海市科委项目中国科学院青年创新促进会项目。摘要为探索和优化贴壁细胞透射电镜制样方法，本试验以鼠肾细胞系和小鼠成纤维细胞系的贴壁培养细胞为材料，采用种不同的固定方法，分别为先固定后刮取细胞先刮取细胞后纳入视野之下，而在更低的倍数下，成像的分辨率不足以识别细胞内部的结构......”。

8、“.....另外，在些实验中，先固定后刮除的方法，还可能将细胞外基质与细胞交联固定在起，难以将其去除。而先刮除后固定和胰酶消化法得到的细胞可以离心为较为紧实的团块，得到的细胞密度高，同时圆形胞体在电镜下容易放入同个视野图和，更容易对细胞内各细胞器的超微结构进行比较观察。总体而言，先固定后刮除得到的细胞形态和结构更接近于细胞的贴壁状态，而先刮除后固定和胰酶消化法得到的细胞，虽然偏离了正常贴壁细胞的形态，但细胞密度相对较高，观察也相对方便。因此，采用何种细胞样品的收集与固定方法最好根据实探究贴壁细胞形态和超微结构与固定方式的关联性细胞学论文形态变为卵圆形或圆形图，戊醛固定后细胞仍然保持这样的形态特征，离心处理后的细胞呈紧实的块状。探究贴壁细胞形态和超微结构与固定方式的关联性细胞学论文。培养细胞的电镜样品制备固定后离心的细胞团用低熔点琼脂糖进行预包埋，切成的小块......”。

9、“.....锇酸下后固定。分别用浓度为的乙醇以及等比例混合的乙醇和丙酮水溶液，丙酮依次梯度脱水，每个梯度，丙酮脱水次，每次。样品彻底脱水后，用包埋剂环氧树脂浸透，纯丙酮包埋剂∶室温，纯丙酮包埋剂∶室温，纯包埋剂，再换次纯包埋剂，烘箱内过色后，在透射电镜下观察并采集图片。结果不同固定方法对细胞形态的影响。培养细胞的电镜样品制备固定后离心的细胞团用低熔点琼脂糖进行预包埋，切成的小块，用磷酸缓冲液漂洗次后，锇酸下后固定。分别用浓度为的乙醇以及等比例混合的乙醇和丙酮水溶液，丙酮依次梯度脱水，每个梯度，丙酮脱水次，每次。样品彻底脱水后，用包埋剂环氧树脂浸透，纯丙酮包埋剂∶室温，纯丙酮包埋剂∶室温，纯包埋剂，再换次纯包埋剂，烘箱内过夜。小鼠成纤维细胞贴壁生长时，细胞呈梭形，排列中属于上皮细胞，而细胞属于成纤维细胞。结果发现无论是上皮细胞还是成纤维细胞......”。