1、“.....重组大鼠白细胞介素重组大鼠干细胞因子和重组大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子均购自公司。荧光倒臵显微镜购自公司，培养箱购自公司。方法大鼠的培养与鉴定大鼠培养与鉴定参考课题组前期所用的方法。简述如下自大鼠股骨或胫骨获得骨髓细胞，使用全骨髓结合差速贴壁法纯化扩增。取第代进行鉴定，包括体外多向诱导分化和流式细胞术检测组镜下均可见表达阳性细胞，荧光强度较均匀，细胞膜呈现绿色荧光的细胞是细胞图，细胞膜呈现红色荧光的细胞是细胞图。图经不同条件培养基诱导培养出现的漂浮细胞及计数图各处理组诱导，漂浮细胞的形态染色，对照组和联合处理组，未见有类似血细胞样细胞组组和组，均见有类似血细胞样细胞，图示为组单核细胞样细胞淋巴样细胞图体外诱导向造血细胞分化的细胞表达免疫荧光细胞化学染色......”。

2、“.....其中诱导向造血细胞分化效率较优，与上述两项研究的结果致。后期，我们将从质和量的角度，进步评估是否为模拟体内造血微环境的最优体外诱导向造血细胞分化的条件。参考文献陈晓，高素君，李薇，等体外诱导人骨髓间充质干细胞向造血细胞分化的研究中国实验诊断学，邹维艳，赵洁，李仪，等体外培养大鼠与小鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性比较细胞与分子免疫学杂志，邹维艳，赵洁，李仪，胡腾飞，王莹，储晓曦，王俊斌骨髓间充质干细胞向造血细胞分化的体外诱导体系构建及优化细胞与分子免疫学均接种于培养瓶中，通过细胞换液去除血细胞造血干细胞或祖细胞等悬浮细胞，于贴壁生长的细胞汇合达以上，更换无血清的细胞培养液培养，收集上清，将其与基础培养基按比例混合作为诱导条件培养基......”。

3、“.....尽可能地保留的核心成分造血基质细胞，其在造血过程中不仅起造血支架作用，还能分泌多种造血因子。有研究报道，对和组织进行细胞培养，经过多次传代可纯化出，检测获得的第或代细胞免疫表型，和呈阳性，且表达率较高。这表明经过多次传代后，部分种类的造血基质细胞会被丢失。而本研究从原代培养的细胞获取学较稳定，且向成骨细胞分化的能力较强。因此，本研究选用大鼠作为前体细胞用于实验。个体造血活动在发育过程中，不同阶段，造血发生的部位不同，表明造血需要相应的造血微环境来调控不同阶段造血细胞的发育分化，即阶段性和时序性调控过程。为适时模拟不同阶段造血部位的微环境，本研究严格按照时间节点完成小鼠的合笼与分笼，获得妊娠天数准确的孕鼠，分别于及，取胚胎的和组织进行细胞培养。显微镜下取材时，发现小鼠胚胎的与较易剥离获取，与人胚分布的位臵相同，而的位臵与人的不同，鼠胚是包裹于羊膜和胎体外侧......”。

4、“.....而是附染色检测分化细胞的形态收集各诱导组培养液中的漂浮细胞进行涂片，风干后，用染色，显微镜下观察并拍照。免疫荧光细胞化学染色检测收集各诱导组培养液中的漂浮细胞，使用洗涤次后涂片，风干。用预冷的丙酮固定，分别加入荧光基团标记的抗体和孵育，洗涤次，倒臵荧光显微镜观察并拍照。图集落形成实验检测不同诱导条件诱导后，集落形成计数分析对照组联合处理组处理组处理组处理组讨论本研究采用全骨髓结合差速贴壁法体外纯化扩增，传代至第代时，相差显微镜附着于中心。为圆盘状结构，镜下观察胎儿面中央呈鲜红色，周边颜色较浅。位于心脏下方，呈鲜红色，结构清晰可辩。染色结果显示图细胞核被染成深蓝紫色，细胞质被染成红色细胞排列呈不规则索条状，索条连接成网，与肝血窦相互交错，血窦形状不规则，腔内含有大量原始血细胞边缘不规则，细胞较少，可见有小血岛，内含有大个核的血细胞为盘型......”。

5、“.....其间可见较多腔面附着层内皮细胞的胎儿毛细血管以及绒毛间隙，绒毛间隙中含有母体血液。放大倍镜下，可见胎儿血管腔内富含大核的血细杂志，基金国家级大学生创新创业项目安徽省教育厅自然科学基金重点项目安徽省自然科学基金面上项目。探究如何优化与构建骨髓间充质干细胞向造血细胞分化的体外诱导体系细胞学论文。染色检测分化细胞的形态收集各诱导组培养液中的漂浮细胞进行涂片，风干后，用染色，显微镜下观察并拍照。免疫荧光细胞化学染色检测收集各诱导组培养液中的漂浮细胞，使用洗涤次后涂片，风干。用预冷的丙酮固定，分别加入荧光基团标记的抗体和孵育，洗涤次，倒臵荧光显微镜观察并拍照。体外诱导大鼠向造血细胞分化鉴定及分化效取条件诱导液，避免通过多次传代培养，造成部分基质细胞被淘汰，故可最大程度地模拟体内造血微环境。本研究初步评估各造血部位基质细胞诱导条件培养液诱导分化的效率......”。

6、“.....在造血过程中，于时期，在小鼠中急剧扩增，其数量从个扩增至个，表明在中有使扩增及分化的最有利的微环境。遵循小鼠造血发育时序性与阶段性，将移植给予致死量照射的小鼠体内，分析其造血重建情况，发现各造血部位中形成集落数最多的为，其次是。上述两项研究发现在中迅速增殖，证明中造血微环境更有利于造血细胞的发育。着在胚体上，与等解剖小鼠胚胎各部位分布致。和经染色，光镜下均可见造血细胞。壁内可见有血岛，其内含有造血细胞，体积大，有明显细胞核胎盘迷路中可见密集的胎儿毛细血管，其腔内可见丰富的有大核造血细胞肝血窦腔可见大量血细胞。这与多项研究结果致表明在和组织中存在有助于造血细胞发育的微环境。本研究体外培养和，采用原代细胞培养获取基质细胞条件培养液，作为诱导向造血细胞分化的条件。为更好地模拟体内的造血诱导微环境，我们实验具体操作是将和组织消化从中获得细胞......”。

7、“.....而母体血中的血细胞无核且比胎儿毛细血管腔中的血细胞小。探究如何优化与构建骨髓间充质干细胞向造血细胞分化的体外诱导体系细胞学论文。体外诱导大鼠向造血细胞分化鉴定及分化效率取对数生长期的第代，用，常规制备成单细胞悬液，以个的细胞数接种到孔板中，培养后更换各种诱导条件培养基，继续培养。实验分为组处理组处理组处理组联合各处理组和空白对照组。培养，倒臵相差显微镜观察细胞变化，收集培养液中的漂浮细胞，使用血球计数板计数有核细胞的数量，台盼蓝染色法检测细胞活力，然后进行以下实形或椭圆形核，核仁清晰图。成骨诱导可见典型的钙结节图。成脂诱导可见细胞间和细胞内存在红色脂滴图。流式细胞仪检测表面标志物和呈阳性表达，造血细胞表面标志与呈阴性表达图......”。

8、“.....无菌取材，胚胎胎体卵黄囊胎肝胎盘图，单个胚胎呈梨形。剥离胎膜后，可见为层富含血管的透明膜囊，包裹羊膜与胎体微镜下观察细胞呈集落样生长，形态均，为成纤维细胞样体外诱导向成骨细胞和脂肪细胞分化，镜下观察，成骨方向分化可见较典型的钙化结节，成脂方向分化镜下可见细胞中有明显脂滴，提示我们体外扩增的具有较强的多向分化潜能。采用流式细胞术检测第代细胞表面标志物的表达，发现高表达和，而低表达和，进步鉴定为，同时也表明传代至第代的纯度较好。这与既往研究扩增的的生物学特性致，。而且本研究组前期采用同样的方法获得大鼠和小鼠的，并比较了两者生物学体特点，发现大鼠外培养获得较快扩增能力强且率取对数生长期的第代，用，常规制备成单细胞悬液，以个的细胞数接种到孔板中，培养后更换各种诱导条件培养基......”。

9、“.....实验分为组处理组处理组处理组联合各处理组和空白对照组。培养，倒臵相差显微镜观察细胞变化，收集培养液中的漂浮细胞，使用血球计数板计数有核细胞的数量，台盼蓝染色法检测细胞活力，然后进行以下实验。结果大鼠的培养和鉴定采用全骨髓法结合差速贴壁法从大鼠骨髓分离。传代纯化后细胞形态趋于致，以长梭形与纺锤形为主，细胞集落排列成鱼群状或旋涡状。细胞体积较大，有个研究从各造血部位获得的基质细胞条件培养液，其中诱导向造血细胞分化效率较优，与上述两项研究的结果致。后期，我们将从质和量的角度，进步评估是否为模拟体内造血微环境的最优体外诱导向造血细胞分化的条件。参考文献陈晓，高素君，李薇，等体外诱导人骨髓间充质干细胞向造血细胞分化的研究中国实验诊断学，邹维艳，赵洁，李仪，等体外培养大鼠与小鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性比较细胞与分子免疫学杂志，邹维艳，赵洁，李仪，胡腾飞，王莹，储晓曦......”。