1、“.....见图。当模板为时，值为，从而认为该方法的检测极限约为。标将标准品稀释至初始浓度对应拷贝数为，连续倍梯度稀释，从，并设臵无模板对照，按照上述反应体系及反应条件进行步法，从而确定检测最低拷贝数的极限。为了评估该标准品的重复性和稳定性，每个稀释度设臵个复孔。选取上述个稀释度对应拷贝数的对数和循环阈值值，系统自动生成标准曲线。探索方法在柯萨奇病毒组探索方法在柯萨奇病毒组型检测中的应用病毒学论文的检测。参考文献王楷宬，王素春，朱琳，等禽流感病毒实时荧光定量检测方法的建立中国动物检疫，代海丽，高铁磊，朱琳，等柯萨奇病毒的实时荧光定量检测方法的建立中国卫生检验杂志，胡晓星，彭杰，冯悦，等以主要流行基因高度保守区为靶点的荧光定量检测方法的建立生命科学研究，蔡丽娟，陈瑶，杜红延......”。

2、“.....另外，与李洋等建立的探针检测方法不同的是，本研究将构建好的重组质粒进步线性化，并通过体外转录获得为标准品。在检测反应体系中，标准品与待检测的样品同步进行，步法完成逆转录及的过程，保证了每个样品的扩增效率致，对病毒进行定量时也尽可能地降低了试验误差。并且，在内可以同步完成孔样品的扩增及常用的普通特异度虽强，但易污染且只能进行定性分析。病毒与其他肠道病毒结构类似，其中基因相对保守，常被用作病毒血清型鉴定以及进化分析的靶基因。本研究选择的基因比对后的保守区域设计引物和探针，构建步法检测方法，为进步提高引物和探针与靶基因结合位点的保守性。另外，探针与模板特异度互补，极大提高了反应的特异度。利用该方法检测图乳鼠组织病毒载量检测结果注为乳鼠各组织及标准品各稀释度扩增曲线为乳鼠各组织病毒载量......”。

3、“.....作为近十年来引起的主要病原体之，严重危害儿童的健康。感染可引起全身性水疱疹侵蚀性皮疹和紫癜损伤等非典型临床症状，部分感染可导致无菌性脑膜炎和脑干脑炎等严重疾病，。而且感染容易与其他出疹性疾病，如水痘麻疹等混淆，致使临床医生小动物实验部提供，实验动物操作经中国医学科学院医学生物学研究所动物伦理委员会批准批准编号。仪器与试剂荧光定量仪，美国病毒提取试剂盒美国病毒扩增试剂盒琼脂糖凝胶回收试剂盒美国加尾试剂盒载体质粒小量提取试剂盒体外转录试剂盒核酸稀释液步法实时荧光定量试剂盒等。表组内重复性试验特异度中国动物检疫，代海丽，高铁磊，朱琳，等柯萨奇病毒的实时荧光定量检测方法的建立中国卫生检验杂志，胡晓星，彭杰，冯悦，等以主要流行基因高度保守区为靶点的荧光定量检测方法的建立生命科学研究，蔡丽娟，陈瑶，杜红延......”。

4、“.....李洋，张相萍，翟明强，等柯萨奇病毒检测方法不同的是，本研究将构建好的重组质粒进步线性化，并通过体外转录获得为标准品。在检测反应体系中，标准品与待检测的样品同步进行，步法完成逆转录及的过程，保证了每个样品的扩增效率致，对病毒进行定量时也尽可能地降低了试验误差。并且，在内可以同步完成孔样品的扩增及检测，产物无需凝胶电泳检测和测序分析，极大地节约了时间和成本。当然，该检测方法似，其中基因相对保守，常被用作病毒血清型鉴定以及进化分析的靶基因。本研究选择的基因比对后的保守区域设计引物和探针，构建步法检测方法，为进步提高引物和探针与靶基因结合位点的保守性。另外，探针与模板特异度互补，极大提高了反应的特异度。利用该方法检测和病毒核酸时，仅有核酸出现扩增曲线......”。

5、“.....经检探索方法在柯萨奇病毒组型检测中的应用病毒学论文验利用该方法检测和病毒核酸时，仅有出现阳性扩增曲线，其余病毒及检测结果均为阴性，见图。图的特异度试验乳鼠组织病毒载量检测结果用该方法检测毒株感染日龄乳鼠后各组织中的载量。其中，各样本均出现良好的扩增曲线见图。值在，根据各样本达到荧光阈值对应的值和标准曲线的公式可精确计算出各组织中病毒的载量，见图的特异度试验乳鼠组织病毒载量检测结果用该方法检测毒株感染日龄乳鼠后各组织中的载量。其中，各样本均出现良好的扩增曲线见图。值在，根据各样本达到荧光阈值对应的值和标准曲线的公式可精确计算出各组织中病毒的载量，见图。材料与方法标本和毒株由本实验室保存并提供，级别实验动物孕鼠由本单位载量。讨论为单股正链的小病毒，作为近十年来引起的主要病原体之，严重危害儿童的健康......”。

6、“.....部分感染可导致无菌性脑膜炎和脑干脑炎等严重疾病，。而且感染容易与其他出疹性疾病，如水痘麻疹等混淆，致使临床医生发生漏诊甚至误诊的情况。因此，建立种快速准确检测感染的方法，为的流行病学调探针实时荧光逆转录检测方法的建立中国病原生物学杂志，刘红波，丛山日，许丹菡，黄小琴，孙浩，杨昭庆，马绍辉柯萨奇病毒组型步法实时荧光定量方法的建立国际检验医学杂志，基金云南省科技计划项目。表组内重复性试验特异度试验利用该方法检测和病毒核酸时，仅有出现阳性扩增曲线，其余病毒及检测结果均为阴性，见图。存在些不足，例如无法检测扩增片段的大小以及各个实验室构建的标准品有所不同导致实验结果缺乏可比性，但相信随着科技的发展，这些问题终将被突破。结论本研究成功构建了用于检测并能对病毒精准定量的方法......”。

7、“.....本检测方法特异度强，灵敏度高，重复性好，能够可靠地应用于的检测。参考文献王楷宬，王素春，朱琳，等禽流感病毒实时荧光定量检测方法的建，该方法在模板范围内，均具有良好的扩增曲线，提示该方法在很大的线性范围内可对病毒核酸进行检测和定量分析。再者，通过对该方法的重复性进行分析发现，组内值在，小于，说明其重复性良好。利用该方法检测感染后乳鼠组织的病毒载量，发现各样本均出现良好的扩增曲线，根据值和标准曲线的公式可精确计算出各组织中初始病毒量。另外，与李洋等建立的探和实验室诊断均提供了可靠的检测技术。传统检测的方法以病毒分离培养和血清学诊断为主。病毒分离作为病毒性疾病诊断的金标准，常采用细胞培养对临床样品进行病毒分离。虽然，该方法特异度强，但培养周期过长，分离率低，因而，常被用于回顾性诊断......”。

8、“.....另外，目前实验室常用的普通特异度虽强，但易污染且只能进行定性分析。病毒与其他肠道病毒结构探索方法在柯萨奇病毒组型检测中的应用病毒学论文照，按照上述反应体系及反应条件进行步法，从而确定检测最低拷贝数的极限。为了评估该标准品的重复性和稳定性，每个稀释度设臵个复孔。选取上述个稀释度对应拷贝数的对数和循环阈值值，系统自动生成标准曲线。探索方法在柯萨奇病毒组型检测中的应用病毒学论文。图乳鼠组织病毒载量检测结果注为乳鼠各组织及标准品各稀释度扩增曲线为乳鼠各组织病品在的范围内具有良好的线性关系，见图系数为，扩增效率为，方程式为。探索方法在柯萨奇病毒组型检测中的应用病毒学论文。表引物和探针序列注下划线序列为启动子序列。方法的建立反应体系缓冲液，为，为，为型检测中的应用病毒学论文......”。

9、“.....方法的建立反应体系缓冲液，为，为，为，为，为，模板为，为，其中引物和探针水平为试剂盒推荧光定量快速检测方法的建立广东医学，李洋，张相萍，翟明强，等柯萨奇病毒探针实时荧光逆转录检测方法的建立中国病原生物学杂志，刘红波，丛山日，许丹菡，黄小琴，孙浩，杨昭庆，马绍辉柯萨奇病毒组型步法实时荧光定量方法的建立国际检验医学杂志，基金云南省科技计划项目。灵敏度试验根据上述拷贝数计算公式，用核酸稀释液测，产物无需凝胶电泳检测和测序分析，极大地节约了时间和成本。当然，该检测方法也存在些不足，例如无法检测扩增片段的大小以及各个实验室构建的标准品有所不同导致实验结果缺乏可比性，但相信随着科技的发展，这些问题终将被突破。结论本研究成功构建了用于检测并能对病毒精准定量的方法，为的流行病学调查和预防带来了帮助。本检测方法特异度强......”。