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A型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫检测方法建立研究(病毒学论文) A型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫检测方法建立研究(病毒学论文)

格式:word 上传:2023-05-06 03:32:00

《A型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫检测方法建立研究(病毒学论文)》修改意见稿

1、“.....易感动物的呼将包被板在吸水纸上拍干,直至孔内无残留洗涤液封闭每孔加入封闭液,置于封闭。摘要为建立动物血清中的型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法,通过获得的型口蹄疫病毒融合蛋白与相关单克隆抗体建立了型口蹄疫病毒抗体竞争化学发光检测试剂盒。该方法能够特异性的定量检测猪牛羊血清中的型口蹄疫病毒蛋白抗体,敏感性高,特异性强,对其他相关的偶蹄类动物病原无交叉反应,批内变异系数小于,批间变异系数小于,具有良好的重复蛋白作为包被抗原,包被于化学发光反应板上,待检血清与酶标单抗同时加入到反应板中,者竞争性的与蛋白上的相应表位结合,最后加入化学发光底物,读取发光值,回算出口蹄疫型抗体计量值,从而反映出动物血清中口蹄疫型抗体含量,判断阴阳性结果,。由检测结果判定被检动物体内的型口蹄疫病毒抗体含量,具有较高的实用价值和推广价值......”

2、“.....加入的胭脂红色素,搅拌均型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫检测方法建立研究病毒学论文物易感程度有差别,以年幼动物发病最严重病死率高。该病年季均可发生,以春秋两季易流行。另外,易感畜群的口蹄疫有周期性暴发流行的趋向。目前我国现有的口蹄疫病毒抗体检测国标主要涉及口蹄疫病毒的病毒分离鉴定病毒核酸的分子生物学方法以及病毒抗体的酶联免疫吸附试验。口蹄疫诊断技术在国内外也有大量学者研究报道,并相继建立了多种口蹄疫诊断方法,主要包括传统的病毒分与鉴定血清学试验和分子生物学方法等传统方法,。其中病的型口蹄疫抗体检测试剂盒进行了比较,阳性样品符合率为,阴性样品符合率为,总符合率为。建立的型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法,特异性高,敏感性强,操作简单快速,具有较高的应用推广价值。关键词型口蹄疫病型口蹄疫病毒免疫分析检测方法病毒口蹄疫......”

3、“.....引起的偶蹄动物的种高度接触性传染病。人也可感染,是种人兽公司阴性与阳性样本血清由中国动物疫病预防控制中心农业农村部兽医诊断中心保存。主要仪器化学发光免疫分析仪,购自洛阳现代生物技术研究院有限公司洗板机,购自深圳市汇松科技发展有限公司分析天平,购自赛多利斯科学仪器北京有限公司。方法口蹄疫型单克隆抗体的制备杂交瘤细胞繁殖从种子库取出生产用细胞株,进行细胞复苏。用含有胎牛血清的高糖型培养液制成细胞悬液,置含培养箱中培养,细胞最低检出量试验将阳性质控血清按∶∶∶∶∶∶∶和∶进行稀释,将阴性质控血清按∶进行稀释,用化学发光免疫分析检测法对上述血清进行检测,同时用国家参考实验室的口蹄疫型抗体检测试剂盒对阳性质控血清进行不同稀释度的检测,比较两种试剂盒的最低检出量。重复性试验采用建立的化学发光免疫分析检测方法对份经过鉴定的阳性血清在同批次板和不同批次板上分别进行检测......”

4、“.....计算批内批间变异系数。符合性试验采用建立的化学发光免疫分试验建立的化学发光方法批内变异系数小于,批间变异系数小于,该方法具有良好的重复性。结果详见表。阳性检出率试验口蹄疫型抗体阳性血清份,经国家参考实验室口蹄疫型液相阻断抗体检测试剂盒检测为阳性。采用化学发光免疫分析检测方法检测上述份阳性血清记录检测结果。阴性检出率检测口蹄疫型抗体阴性血清份,由中国动物疫病预防控制中心采集保存,经国家参考实验室口蹄疫型液相阻断抗体检测试剂盒检测为阴性。采用化学发光免疫疫型病毒阳性血清羊口蹄疫型病毒阳性血清口蹄疫亚洲型病毒阳性血清猪瘟病毒阳性血清猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒阳性血清大肠埃希菌阳性血清进行检验,设立猪口蹄疫型病毒阳性血清牛口蹄疫型病毒阳性血清羊口蹄疫型病毒阳性血清作为对照检验,记录检测结果......”

5、“.....比较两种试剂盒的最低检出量。重复性试验采用建立的化学发光免疫分析检测方法对份经过鉴定的阳性血清在同批次板和不同批次板上分别进行检测,平行测定次,计算批内批间变异系数。符合性试验采用建立的化学发光免疫分析检测方法与国家参考实验室的口蹄疫型抗体检测试剂盒对送检的份血清进行检测,计算其符合率。型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫检测方法建立研究病毒学论文。阳性检出率试验口蹄疫型抗预防控制中心农业农村部兽医诊断中心制备保存型口蹄疫病毒抗体检测试剂盒购自国内市场脱脂奶粉购自美国公司酶标板购自美国公司胎牛血清细胞培养基与相关细胞培养试剂购自美国公司阴性与阳性样本血清由中国动物疫病预防控制中心农业农村部兽医诊断中心保存。主要仪器化学发光免疫分析仪......”

6、“.....购自深圳市汇松科技发展有限公司分析天平,购型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫检测方法建立研究病毒学论文分析方法检测上述份阴性血清,检测结果显示份血清记录检测结果。交叉试验用建立的化学发光方法对猪口蹄疫型病毒阳性血清牛口蹄疫型病毒阳性血清羊口蹄疫型病毒阳性血清口蹄疫亚洲型病毒阳性血清猪瘟病毒阳性血清猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒阳性血清大肠埃希菌阳性血清进行检验,设立猪口蹄疫型病毒阳性血清牛口蹄疫型病毒阳性血清羊口蹄疫型病毒阳性血清作为对照检验,记录检测结果。型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫检测方法建立研究病毒学论文盒的最低检出量。结果表明口蹄疫型液相阻断抗体检测试剂盒对阳性质控血清检测最低稀释度为∶,发光抗体试剂盒最低检出量为∶,说明该检测方法的敏感性优于液相阻断检测方法......”

7、“.....平行测定次,计算批内批间变异系数。结果表明,本鉴定血清学试验和分子生物学方法等传统方法,。其中病毒分离鉴定是世界动物卫生组织规定的诊断的金标准,该方法虽然准确,但需要耗费约几天的时间才能获得结果,并且操作技术复杂,生物安全要求高,不适用于基层兽医快速诊断需求。反转录和实时定量已经广泛用于检测。但这两种方法需要专业人员在专业的实验室内开展,也给基层人员诊断带来了定的困难。血清学试验主要以酶联免疫吸附试验为主,其稳定性与特异性具有清猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清大肠埃希菌阳性血清进行检验,设立猪口蹄疫型病毒阳性血清牛口蹄疫型病毒阳性血清羊口蹄疫型病毒阳性血清作为对照检验,检测结果全部为阴性。结果详见表。最低检出量试验将阳性质控血清按∶∶∶∶∶∶∶和∶进行稀释......”

8、“.....采用化学发光免疫分析检测方法对上述血清进行检测,同时用国家参考实验室口蹄疫型液相阻断抗体检测试剂盒对阳性质控血清进行不同稀释度的检测,比较两种试剂体阳性血清份,经国家参考实验室口蹄疫型液相阻断抗体检测试剂盒检测为阳性。采用化学发光免疫分析检测方法检测上述份阳性血清记录检测结果。阴性检出率检测口蹄疫型抗体阴性血清份,由中国动物疫病预防控制中心采集保存,经国家参考实验室口蹄疫型液相阻断抗体检测试剂盒检测为阴性。采用化学发光免疫分析方法检测上述份阴性血清,检测结果显示份血清记录检测结果。交叉试验用建立的化学发光方法对猪口蹄疫型病毒阳性血清牛口蹄赛多利斯科学仪器北京有限公司。方法口蹄疫型单克隆抗体的制备杂交瘤细胞繁殖从种子库取出生产用细胞株,进行细胞复苏。用含有胎牛血清的高糖型培养液制成细胞悬液,置含培养箱中培养,细胞能够稳定分裂增殖,可长成单层......”

9、“.....将阴性质控血清按∶进行稀释,用化学发光免疫分析检测法对上述血清进行检测,同时用国家参考实验室的口蹄疫型抗体检测试剂盒对定的局限性,。本研究采用竞争原理,将型口蹄疫病毒蛋白作为包被抗原,包被于化学发光反应板上,待检血清与酶标单抗同时加入到反应板中,者竞争性的与蛋白上的相应表位结合,最后加入化学发光底物,读取发光值,回算出口蹄疫型抗体计量值,从而反映出动物血清中口蹄疫型抗体含量,判断阴阳性结果,。由检测结果判定被检动物体内的型口蹄疫病毒抗体含量,具有较高的实用价值和推广价值。材料与方法材料主要试剂融合蛋白抗原由中国动物疫病型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫检测方法建立研究病毒学论文道消化道和损伤的皮肤黏膜都可以是感染门户。不同年龄的动物易感程度有差别,以年幼动物发病最严重病死率高。该病年季均可发生,以春秋两季易流行。另外......”

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