1、“.....是我国重要的出口农产品，在国际市场上占有重要地位。我国是核桃的原产地之，已有多年的栽培历史，核桃在我国分布广泛，全国个省区都有栽培和分布，其面积和产量均居世界首位。我国核桃栽培主要是普通桃核和铁核桃，铁核桃又称漾濞核桃﹑泡核桃，主要分布在云南﹑贵州全境和四川﹑湖南﹑广西的西部及西藏南部而其他地区栽培的都是普通核桃。核桃栽培历史悠久，在长期的进化与栽培过程中表现出特有的优良性状，如早实特性和孤雌生殖特性，蕴藏着许多非常宝贵的控制优良性状的基因资源。由于核桃寿命长且主要采用嫁接繁殖，不同地域间经常交换品种，导致同名异物和同物异名现象严重，研究快速有效的品种身份鉴定，保证品种真实性致性，对于栽培植物品种的知识产权保护，确保品种在生产上的大力推广具有重要意义......”。

2、“.....利用分子标记技术进行核桃种品种及种属鉴别和多样性分析已有报道，但采用标记鉴定核桃品种的研究较少。广义的分子标是指可遗传的并可检测的序列或蛋白质。蛋白质标记包括种子贮藏蛋白和同工酶指由个以上基因位点编码的酶的不同分子形式及等位酶指由同基因位点的不同等位基因编码的酶的不同分子形式。狭义的分子标记概念只是指标记，而这个界定现在被广泛采纳。本文中也将分子标记概念限定在标记范畴。分子标记能在水平上反映植物遗传基础的差异，是植物遗传育种领域内的项新兴技术。，简单重复序列就是当今四大分子标记技术之。年，个独立的研究小组几乎同时建立了这技术，并且证实它作为位点特异遗传标记具有巨大潜力。技术的特点是呈共显性遗传在数量方面没有生物学上的限制其标记带型简单，记录的条带致客观明确采用技术进行检测只需少量样品，且质量要求不高......”。

3、“.....当今世界上四大标记系统的综合效用大小比较关系为。简单序列重复，亦称微卫星是建立在基础上的第二代分子标记，它是类短的串连重复序列个核苷酸，均匀地分布在整个真核生物基因组中，侧面有保守的序列。为共显性标记，兼具和的优点，克服了它们的不足，多态性比丰富，而且简便快速稳定性好，其重复性和可信度比高，适合植物品种鉴定。本研究采用技术用筛选出的对多态性引物应用到多个核桃品种，并在此基础上进行了遗传多样性分析，以期建立套采用分子标记鉴定核桃品种的有效方法。本文主要对的发现原理特点以及在作物遗传育种中的应用作简要概述。分子标记的发现又称微卫星标记，关于微卫星最早的报道是年等在研究寄居蟹的序列时发现了些类似于的简单重复序列，但在当时并没有引起很大注意。直到年，等首次将合成的微卫星寡聚核苷酸用于人的指纹分析，微卫星才被关注年......”。

4、“.....人类遗传学家和研究了几个位点上的个等位基因时发现，这些序列中有个或个核苷酸重复的序列，并将其命名为即微卫星。这技术经问世，便很快在动植物的遗传分析中得到广泛应用。分子标记技术的原理和特点分子标记技术的原理在真核生物的基因组中，每个序列的基本单元重复次数在不同基因型间差异很大，因此形成其座位的多态性，并且每个座位两端有段保守的序列，可以根据此保守序列设计引物，利用技术进行扩增，然后用高浓度琼脂糖凝胶或变性聚丙稀酰胺凝胶电泳进行分析。由于多态性是由简单序列重复次数的差异引起的，因此在扩增的带上会出现小片段或不连续的带。由此可见，分子标记的基本原理就是要了解座位两侧的核苷酸序列，寻找其中的特异保护区。分子标记技术的特点标记的优越性体现在遗传信息量大，个座位最多可以检测到个等位基因呈孟德尔共显性遗传，可以鉴别纯合基因型和杂合基因型，提供完整的遗传信息态性丰富，数量充足可靠性强......”。

5、“.....受外界因素干扰小等实验程序简单，耗时短，结果重复性好。此外，该技术还有交流方便等优点。但是标记技术也具有不足之处，主要的缺点是必须依赖每类两端序列测序设计引物，但总的来说它还是种比较理想的分子标记技术。技术试验流程技术试验流程主要包括提取引物设计扩增电泳及染色观察结果及统计分析等步骤。提取可采用常规方法提取用于分析的样品，如法或常规的酚氯仿提取。目前研究发现用改进的法提取的片段大而完整且无污染也未发生明显的降解现象并能成功地进行扩增，可以考虑用改进的方法代替传统的方法来提取和纯化。提取完毕将样品保存在下备用。引物设计检测标记的关键在于必须设计出对特异的引物，而开发引物序列首先要建立文库，筛选鉴定微卫星克隆，然后测定这些克隆的侧翼序列，最后根据两侧序列在同物种内高度保守的特性设计引物。在这过程中，了解座位两侧的核苷酸序列，寻找其中的特异保守区是重点所在。另外......”。

6、“.....王化俊，王汉宁玉米基因组的提取及分析玉米科学高志红，章镇，韩振海技术及其在果树上的应用果树学报王红梅，张正英，陈玉梁标记技术及其在植物遗传学中的应用西北师范大学学报黄秦军，苏晓华，张香华分子标记与林木遗传育种世界林学研究致谢衷心感谢我的指导老师老师。本文的研究工作是在老师的悉心指导下完成的，从论文的选题研究计划的制定技术路线的选择到结果的统计分析，各个方面都离不开老师热情耐心的帮助和教导。在实习阶段的日子里，老师认真的工作态度，诚信宽厚的为人处世态度，都给我留下了难以磨灭的印象，也为我今后的工作树立了优秀的榜样。三个月的学习和科研工作，不仅使我的知识结构和科研能力上了个新台阶，更重要的是，各方面的素质得到了提高。而这切，都要归功于老师的深切教诲与热情鼓励。值此论文顺利完成之际，我首先要向我尊敬的指导老师老师表达深深的敬意和无以言表的感谢......”。

7、“.....感谢和我个实验室的和山东农业大学的和同学。她们灵活考虑问题的方式，严谨的解决问题的态度，扎实的专业知识功底，认真的科研态度都给我留下了深刻的印象，没有他们无私的帮助，我是无法完成论文工作的。最后深深的感谢呵护我成长的父母。每当我遇到困难的时候，父母总是第个给我鼓励的人。回顾多年来走过的路，每个脚印都浸满着他们无私的关爱和谆谆教诲，年的在外求学之路，寄托着父母对我的殷切期望。他们在精神上和物质上的无私支持，坚定了我追求人生理想的信念。父母的爱是天下最无私的最宽厚的爱。大恩无以言报，惟有以永无止境的奋斗，期待将来辉煌的事业让父母为之骄傲。我亦相信自己能达到目标。最后，向所有关心我的亲人师长和朋友们表示深深的谢意。库或已发表的有关文献中查询，使用亲缘关系比较接近的其他物种的引物也是获得所需引物的有效途径。目前，般的实验室都是利用现成的商业化的引物进行扩增的......”。

8、“.....由于不同引物不同材料的扩增条件存在着差异，这就需要对引物浓度酶浓度值变性温度退火温度等进行优化，以便获得清晰准确便于统计的电泳图谱。在这里值得提的是最好选用家公司同批次的酶以便增加可比性，减小不必要的误差。由于是聚合酶的激活剂，所以它的浓度不仅影响酶的活性和合成的可靠性而且还影响引物与模板的结合效率和产物的特异性。高浓度的虽然可以保证反应的顺利进行，但有时产物带有明显的背景，适当降低浓度则可以有效地消除背景，其作用比提高退火温度更明显在实验时要根据引物材料的不同确定合适的浓度。退火温度是指引物与模板特异结合的最佳温度，是任何反应最重要的参数。退火温度对影响也较大，退火温度低，引物和模板结合特异性较差，出现的条带可能增多退火温度高，引物和模板结合特异性增加。并且在扩增反应中，不同的材料，引物浓度不相同相同的材料，由于引物浓度的差异......”。

9、“.....所以在试验时要设计几个不同的温度梯度，反复调试，选择最佳退火温度。目前，般试验采用的退火温度在左右。电泳及染色产物需经电泳分离染色显示后才能进行谱带观察统计。用于分离琼脂糖凝胶电泳的类型可以分为垂直型和水平型两种，前者由于制胶简单，加样方便，可操作性强等优点而更受欢迎。电泳系统对温度的要求不是很高，但是对浓度的要求比较严格，电泳琼脂糖浓度般在之间，聚丙烯酰胺常用浓度为染色可用同位素银染或等方法，在大多数实验室中，常用硝酸银或荧光染料溴化乙锭染色，染色后在可见光银染或紫外光染色下进行观察记录，般而言，聚丙烯酰胺和银染的分辨效果比琼脂糖和溴化乙锭要高。最后利用相关软件进行有关的数据分析。在植物育种方面的应用遗传作图在大麦中已研究了个，鉴定出个位点，其中个位点与位点共分离，增加了个新位点到图谱中，这些位点主要分布在大麦第条染色体上......”。