1、“.....若倒管中分之以上充满气体并且有黑色沉淀物则可判定为阳性。当倒管中产生的气体不足分之时，立即以无数检验方法。本标准适用于出口食品中产气荚膜梭状芽孢杆菌的检验。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本包括所有的修改单适用于本文件。分析实验室用水规格和试验方法培养基制备指南第部分实验室培养基制备质量保证通则培养基制备指南第部分培养基性能测试实用指南术犿狆犲狉犳狉犻狀犵犲狀狊犻狀犳狅狅犱犳狅狉犲狓狆狅狉狋发布实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前言本标准按照给出的规则起草。本标准代替出口食品中产气荚膜梭状芽孢杆菌检验方法。本标准与相比......”。

2、“.....在标准中增加乳糖亚硫酸起草人顾鸣韩伟谢小珏王赢陈立。犛犖犜出口食品中产气荚膜梭状芽孢杆菌计数方法范围本标准规定了出口食品中产气荚膜梭状芽孢杆菌犆犾狅狊狋狉犻犱犻狌犿狆犲狉犳狉犻狀犵犲狀狊的计数检验方法。全自动微生物鉴定系统。由法国生物梅里埃公司提供的产品的商品名。给出这信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些出口食品中产气荚膜梭状芽孢杆菌计数方法状芽孢杆菌计数方法。犛犖犜操作步骤样品的稀释无菌操作称取检样放入无菌均质器或均质袋中，加入蛋白胨水，均质，制成∶样品匀液。吸取∶样品匀液，加入到蛋白胨水中，混合均匀，制成∶样品匀液。必要时，按此法将样品作进步的倍递增稀释。接种与培养选择个个适宜稀释度的样品匀液液体样品可包括原液，每个稀释度分别吸取样品匀液加入到两个无菌平皿内。将维持在或均质杯......”。

3、“.....本标准代替出口食品中产气荚膜梭状芽孢杆菌检。分别加试剂甲与试剂乙于缓冲动力硝酸盐培养基中以检查亚硝酸盐的存在。出现橙红色者，表明有菌株将硝酸盐还原成了亚硝酸盐。若内未出现颜色变化，则添加少许金属锌粉，放置。如果加锌粉后出现橙红色，表明菌株不能还原硝酸盐。若出现微弱的亚硝酸盐反应如浅粉色则应排除，因为产气荚膜梭状芽孢杆菌的反应比较剧烈而且迅猛。出口食品中产气荚膜梭出口食品中产气荚膜梭状芽孢杆菌计数方法。本标准适用于出口食品中产气荚膜梭状芽孢杆菌的检验。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件......”。

4、“.....凡是不注日期的引用文件，其最新版本包括所有的修改单适用于本文件。分析实验室用水规格和试验方法培养基制备指南第部分实验室培养基制备质量保证通则培上琼脂。待其完全凝固后，厌氧条件下培养，获得纯培养菌落。如有必要，可重复上述步骤，以获得完全分离的，典型的黑色菌落。犛犖犜接种将挑取的纯菌落分别穿刺接种缓冲动力硝酸盐培养基和乳糖明胶培养基，厌氧条件下培养。动力硝酸盐试验观察在透射光下检查缓冲动力硝酸盐培养基试管中细菌沿穿刺线生长情况，有动力的菌株沿着穿刺线呈扩散基制备指南第部分培养基性能测试实用指南术语和定义下列术语和定义适用于本文件。产气荚膜梭状芽孢杆菌犮犾狅狊狋狉犻犱犻狌犿狆犲狉犳狉犻狀犵犲狀狊在特定的选择性培养基上，细菌菌落生长呈现黑色特点亚硫酸盐降解为硫化物而形成黑色沉淀物，并使菌落呈现黑色，分解乳糖产酸产气，内能液化明胶的细菌。设备和材料无菌吸管和......”。

5、“.....无菌培养皿直径。均质器及均质袋乳糖亚硫酸盐试验确证接种将琼脂上的典型或可疑菌落接种到液体硫乙醇酸盐培养基中，厌氧环境下下培养。以无菌吸管移取硫乙醇酸盐培养物滴加入到乳糖亚硫酸盐培养基中。水浴中需氧条件下培养。观察观察倒管内有否气泡产生及试管底部是否变黑亚硫酸铁沉淀，若倒管中分之以上充满气体并且有黑色沉淀物则可判定为阳性。当倒管中产生的气体不足分之时，立即以无菌操作称取检样放入无菌均质器或均质袋中，加入蛋白胨水，均质，制成∶样品匀液。吸取∶样品匀液，加入到蛋白胨水中，混合均匀，制成∶样品匀液。必要时，按此法将样品作进步的倍递增稀释。接种与培养选择个个适宜稀释度的样品匀液液体样品可包括原液，每个稀释度分别吸取样品匀液加入到两个无菌平皿内。将维持在的琼脂倾注平皿，转动平皿使其混合均匀......”。

6、“.....过滤除菌。存放于，周内用完。犃制备将基础培养基各成分加热溶解在水中，调节使灭菌后室温下，分装到适宜容量的烧瓶中，高压灭菌。倒平皿前，将基础培养基冷却方法。本标准与相比，主要技术变化如下变更为推荐性标准检测方法部分参考了食品和动物饲料微生物产气荚膜梭状芽孢杆菌计数菌落计数技术内容，在标准中增加乳糖亚硫酸盐试验作为确证试验，减除了含卵黄的琼脂和培养基的使用补充了商品化的全自动微生物鉴定仪。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位中华人民共和国上海出入境检验检疫局。本标准主要基制备指南第部分培养基性能测试实用指南术语和定义下列术语和定义适用于本文件。产气荚膜梭状芽孢杆菌犮犾狅狊狋狉犻犱犻狌犿狆犲狉犳狉犻狀犵犲狀狊在特定的选择性培养基上，细菌菌落生长呈现黑色特点亚硫酸盐降解为硫化物而形成黑色沉淀物，并使菌落呈现黑色，分解乳糖产酸产气......”。

7、“.....设备和材料无菌吸管和，分刻度分别为和。无菌培养皿直径。均质器及均质袋状芽孢杆菌计数方法。犛犖犜操作步骤样品的稀释无菌操作称取检样放入无菌均质器或均质袋中，加入蛋白胨水，均质，制成∶样品匀液。吸取∶样品匀液，加入到蛋白胨水中，混合均匀，制成∶样品匀液。必要时，按此法将样品作进步的倍递增稀释。接种与培养选择个个适宜稀释度的样品匀液液体样品可包括原液，每个稀释度分别吸取样品匀液加入到两个无菌平皿内。将维持在条件下培养，获得纯培养菌落。如有必要，可重复上述步骤，以获得完全分离的，典型的黑色菌落。犛犖犜接种将挑取的纯菌落分别穿刺接种缓冲动力硝酸盐培养基和乳糖明胶培养基，厌氧条件下培养。动力硝酸盐试验观察在透射光下检查缓冲动力硝酸盐培养基试管中细菌沿穿刺线生长情况，有动力的菌株沿着穿刺线呈扩散生长没有动力的菌株......”。

8、“.....再覆盖上琼脂，待其完全凝固。翻转平板，放入厌氧罐或其他适宜容器中，厌氧环境下下培养。培养时间过长可能会导致平板颜色过黑。平板计数选取菌落数的平板，计数每个平板上的黑色菌落数，记录稀释倍数。每个平板挑取个典型或可疑菌落小于个时应全部挑选进行确证。出口食品中产气荚膜梭状芽孢杆菌计数方状芽孢杆菌计数方法。犛犖犜操作步骤样品的稀释无菌操作称取检样放入无菌均质器或均质袋中，加入蛋白胨水，均质，制成∶样品匀液。吸取∶样品匀液，加入到蛋白胨水中，混合均匀，制成∶样品匀液。必要时，按此法将样品作进步的倍递增稀释。接种与培养选择个个适宜稀释度的样品匀液液体样品可包括原液，每个稀释度分别吸取样品匀液加入到两个无菌平皿内。将维持在，将培养基分装适宜的试管内，每管，高压灭菌。在使用前，此培养基中应加热煮沸减氧。为保证培养基的质量，应按的规定进行培养基的制备与性能测试......”。

9、“.....过滤除菌，当天使用。犛犖犜操作步骤样品的稀释琼脂上的典型或可疑菌落接种到液体硫乙醇酸盐培养基中，厌氧环境下下培养。以无菌吸管移取硫乙醇酸盐培养物滴加入到乳糖亚硫酸盐培养基中。水浴中需氧条件下培养。观察观察倒管内有否气泡产生及试管底部是否变黑亚硫酸铁沉淀，若倒管中分之以上充满气体并且有黑色沉淀物则可判定为阳性。当倒管中产生的气体不足分之时，立即以无菌吸管从先前的培养基中吸取滴，加过滤除菌的环丝氨酸溶液。当琼脂培养基平板被用来作纯化菌落时动力硝酸盐试验和乳糖明胶试验时，可直接取冷却到的基础培养基倾注平板。存放于，可保存星期。犃硫乙醇酸盐液体培养基胰酪胨胱氨酸葡萄糖酵母膏氯化钠硫乙醇酸钠或硫乙醇酸刃天青琼脂将各成分加热溶解在水中......”。