1、“.....向无菌平皿中倒入大约完全培养基,备用。犃盐水犃组成氯化钠犛犖犜版权所有禁止翻制电子发售蒸馏水犃制备将氯化钠溶解于水中,分装,高压灭菌。犃氢氧化钾溶液犃成分氢氧化钾盐溶液犃制备将氢氧化钾溶解于盐溶液中,分装。高压灭菌,备用。储存液为氢氧化钾,配制好后保存于。用氯化钠溶液做∶稀释形成氢氧化钾使用液。犃牛肉浸膏犃组成小牛肉浸出液脱水酶消化酪蛋白氯化钠蒸馏水犃制备将各组分溶解于水中,加热溶解,调节值,使灭菌后时值至。将培养基分装于试管中,乳糖葡萄糖硫酸铁水合亚硫酸钠酚红琼脂犛犖犜版权所有禁止翻制电子发售蒸馏水犃制备将各组分或脱水完全培养基溶解于水中并煮沸。出口食品小肠结肠炎耶尔森氏菌检验方法。氢氧化钾盐溶液见。牛肉浸膏见。无菌甘油见。取样保证实验室收到的样本真正具有代表性,在运输储存中没有损坏改变。虽然耶尔森氏菌是由冷冻产品中复活的,但是不建议在试验分析前冷冻样品......”。
2、“.....样品采集和处理见,样品采集后应尽快送检。犛犖犜版权所有禁止翻制电子发售检测样品的制备样品的制备要符合此类产品检验的国家标准。如果没有提供具体的标准,建议有关各方来就此问题达成协议。检验程序小肠结肠炎耶尔森氏菌检验程序见图。图小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验程序犛犖犜版权所有禁止翻制电子发售操作步骤稀释液的制备不同类食品初电子发售氯苯酚溶液新生霉素溶液犃制备无菌操作将抗生素溶液添加到基础培养基冷却到中并混匀,将大约的完全培养基倒入无菌平板中,静置。犃沙门氏菌志贺氏菌琼脂含脱氧胆盐氯化钠犛犛犇犆琼脂犃成分酵母提取物牛肉浸膏动物蛋白胨酶消化乳糖胆盐脱氧胆盐钠氯化钙柠檬酸钠水合硫代硫酸钠柠檬酸铁铵煌绿中性红琼脂蒸馏水犃制法将各组分或脱水完全培养基溶解于水中并煮沸。调整值到不用灭菌。将培养基冷却到左右,向无菌平板倒入约,静置。如果提前制备,琼脂平板应放于塑料袋中,黑暗保存周。不要在冷藏......”。
3、“.....影响使用。犃营养琼脂犃成分牛肉浸膏蛋白胨琼脂蒸馏水犃制法将各组分或脱水完全培养基溶解于水中并煮沸。灭菌后调整值到,到肉汤中,得到稀释倍的增菌培养液。增菌将培养基摇瓶培养,或静止培养。倍稀释培养基培养。分离培养取增菌液划线接种于琼脂平板以获得单菌落,倒置培养。使用无菌吸管,吸取增菌液加入到的氢氧化钾溶液中混匀。后,将混合液立即划线接种于琼脂平板以获得单菌落,倒置培养。取增菌液划线接种于琼脂平板以获得单菌落,倒置培养。犃氯酸钾溶液犿犵犿犔犃成分氯酸钾蒸馏水犃制备将氯酸钾溶解于水中。过滤灭菌。犃完全培养基犃成分基础培养基替卡西林溶液氯苯酚溶液氯酸钾溶液犃制备无菌操作将替卡西林氯苯酚氯酸钾溶液添加到基础培养基冷却到中并混匀。将培养基无菌操作分装于试管中,每管,或者分装于锥形瓶中,每瓶,以获出口食品小肠结肠炎耶尔森氏菌检验方法......”。
4、“.....犛犖犜版权所有禁止翻制电子发售附录犆资料性附录小肠结肠炎耶尔森氏菌生物型表犆小肠结肠炎耶尔森氏菌的生物型生化试验生物型吐温酯酶叶苷吡嗪酰胺酶吲哚木糖海藻糖非致病性。通常现象很弱或延时。犛犖犜版权所有禁止翻制电子发售附录犇资料性附录致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌检测方法犇菌落的选择犇在生化确证试验基础上,选择赖氨酸脱羧酶阴性鸟氨酸脱羧酶阳性鼠李糖发果穿刺接种葡萄糖阳性为黄色葡萄糖阴性为红色或不变产生硫化氢为黑色有气泡和裂缝为葡萄糖产气斜面接种乳糖阳性为黄色乳糖阴性为红色或不变。犛犖犜版权所有禁止翻制电子发售氧化酶检测用玻璃棒或铂铱接种环,不要使用镍铬合金接种环,将选取的典型菌落划线于浸有氧化酶试剂的滤纸上,内滤纸的颜色没有变为淡紫色紫色或深蓝色表示反应为阴性......”。
5、“.....生化确证试验用接种环将根据选择的经培养的典型菌落,接种于下列培养基进行生化反应。赖氨酸脱羧酶培养基将菌体接种于培养基液体以下,用凡士林加热,然后冷却以便形成液体状态或无菌矿物油对接种试管进行覆盖。培养,培养后紫色表示阳性反应,黄色表示阴性反应。出口食品小肠结肠炎耶化钾盐溶液犃制备将氢氧化钾溶解于盐溶液中,分装。高压灭菌,备用。储存液为氢氧化钾,配制好后保存于。用氯化钠溶液做∶稀释形成氢氧化钾使用液。犃牛肉浸膏犃组成小牛肉浸出液脱水酶消化酪蛋白氯化钠蒸馏水犃制备将各组分溶解于水中,加热溶解,调节值,使灭菌后时值至。将培养基分装于试管中,每管,高压灭菌。犃无菌甘油将甘油分装于瓶中,每瓶,高压灭菌......”。
6、“.....对小肠结肠炎耶尔森菌的生物型进行测定,生化反应参见附录。小肠结肠炎耶尔森菌生物型和均已知具有致病性。犇小肠结肠炎耶尔森菌抗原对于流行病学有很重要的意义。通过抗血清对致病性小肠耶尔森氏菌进行血清分型,通常为∶,∶,∶和∶,。犛犖犜版权所有禁止翻制电子发售。培养后,观察平板上有无典型菌落形态。琼脂平板上,典型的小肠结肠炎耶尔森菌菌落光滑,直径,红色中心,半透明边缘。用有斜透射光源的立体显微镜观察菌落无晕圈,呈细小颗粒状。在琼脂平板上,典型的小肠结肠炎耶尔森菌菌落,直径,灰白色,边缘模糊无晕圈,用有斜透射光源的立体显微镜观察菌落可看到呈精细颗粒状......”。
7、“.....如果没有形成典型菌落,可继续培养至,然后再进行鉴定。鉴定从每附录犆资料性附录小肠结肠炎耶尔森氏菌生物型表犆小肠结肠炎耶尔森氏菌的生物型生化试验生物型吐温酯酶叶苷吡嗪酰胺酶吲哚木糖海藻糖非致病性。通常现象很弱或延时。犛犖犜版权所有禁止翻制电子发售附录犇资料性附录致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌检测方法犇菌落的选择犇在生化确证试验基础上,选择赖氨酸脱羧酶阴性鸟氨酸脱羧酶阳性鼠李糖发酵阴性蔗糖发酵阳性及柠檬酸水解阴性的菌落进行致病性检测。犇用接种环将根据选择的经培养的典型菌落,按照的培养基进行生化反应。犇叶苷发酵试验犇斜面划线接种培养基培养。犇菌落边缘带有黑环的表示阳性反应。注此叶苷发酵试验相当于水杨苷的发酵试验。犇吡嗪酰胺酶检测犇大面积斜面划线接种于吡嗪酰胺酶检测酪蛋白大豆琼脂培养。犇加的硫酸铵铁溶液,种选择性培养基中各选取个平板,每个平板选择个典型或可疑菌落小于个全选,接种到营养琼脂平板上......”。
8、“.....质粒决定了耶尔森氏菌的毒力和致病性,温度高于或者温度低于,经过长时间的培养和运输,质粒都可能丢失。因此,应立即将纯菌进行亚培养培养,然后添加的无菌甘油,混匀,在冷冻条件下保存,最好保存于。筛选试验尿素酶检测将培养物接种到尿素酶吲哚的培养基液面下,培养,最好放入水浴箱中培养。紫色或粉红色的颜色表示尿素酶反应为阳性。小肠结肠炎耶尔森菌的阳性尿素酶反应几乎在。橘黄色表示尿素酶反应为阴性。如果培养基没有接种到足够的菌体,可能出现假阴性反应。吲哚检测向培养基试管中添加的吲哚检测试剂,反应时间,培养基液面变红表示反应为阳性。双糖铁琼脂检测将培养物穿刺接种和划线接种至双糖铁琼脂,培养。观察培养结犃葡萄糖溶液犃成分葡萄糖蒸馏水犃制备将葡萄糖溶解于水中。过滤灭菌。犃完全培养基犃成分基础培养基氯化镁溶液草酸钠溶液葡萄糖溶液犃制备基础培养基冷却至左右,无菌条件下,将氯化镁草酸钠和葡萄糖添加其中并混匀......”。
9、“.....备用。犃盐水犃组成氯化钠犛犖犜版权所有禁止翻制电子发售蒸馏水犃制备将氯化钠溶解于水中,分装,高压灭菌。犃氢氧化钾溶液犃成分氢氧化钾盐溶液犃制备将氢氧化钾溶解于盐溶液中,分装。高压灭菌,备用。储存液为氢氧化钾,配制好后保存于。用氯化钠溶液做∶稀释形成氢氧化钾使用液。犃牛肉浸膏犃组成小牛肉浸出液脱水酶消化酪蛋白氯化钠蒸馏水犃制备将各组分溶解于水中,加热溶解,调节值,使灭菌后时值至。将培养基分装于试管中,进行培养基的制备与性能测试。蛋白胨山梨醇胆盐肉汤见。氯苯酚替卡西林氯酸钾肉汤见。头孢磺啶氯苯酚新生霉素琼脂见。沙门氏菌志贺氏菌琼脂含脱氧胆盐氯化钠琼脂见。营养琼脂见。调整值到,高压灭菌。犃完全培养基犃成分基本培养基吐温山梨醇单油酸酯犃制备添加吐温于液体基础培养基中,均质。灭菌。将培养基分装于试管中,每管。将试管倾斜放置制成斜面......”。
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