1、“.....不但对样品过滤效果较好,而且层析速度相对快速,检测线显色明显。这种直接向酶标板孔中滴加样品的模式,操作简便。所以,选择作为样品垫,并采用插条模式进行检测。层析条件的选择包被稀释液和包被条件的筛选分别用种不同配方的稀释液将包被原玉米赤霉烯酮半抗原做定梯度稀释,在膜上点样后烘干,组装试纸条检测阴性豆粕样品,观察显色情况,结果见表。表包被稀释液筛选结果包被原浓度包被液由表可知,使用不同的包被稀释液,试纸条显色结果有定差异,其中包被稀释液在稀释至,膜上点样着色照样很深,而其他包被稀释液在稀释至,颜色很淡或不显色,故选择按相关规定进行定比例的抽查检测表样品垫选择结果样品垫型号样品吸收情况吸收不完全吸收不完全吸收完全检测线显色情况由表可知,采用插条方式进行检测时对豆粕中各组分吸收效果依然较差,虽然检测线稍有显色,但显色很浅。作为样品垫在插条模式中显示出了极大的优势......”。

2、“.....而且层析速度相对快速,检测线显色明显。这种直接向酶标板孔中滴加样品的模式,操作简便。所以,选择作为样品垫,并采用插条模式进行检测。层析条件的选择包被稀释液和包被条件的筛选分别用种不同配方的稀释液将包被原玉米赤霉烯酮半抗原做定梯度稀释,在膜上点样后烘干,组装试纸条检测阴性豆粕样品,观察显色情况,结果见表。表包被稀释液筛选结果包被原浓度包被液由表可知,使用不同的包被稀释液,试纸条显色结果有定差异,其中包被稀释液在稀释至,膜上点样着色照样很深,而其他包被稀释液黄豆玉米豆粕花生粕从表中可见,种饲料原料样品中玉米赤霉烯酮添加浓度时,检大米黄豆玉米豆粕花生粕饲料及饲料原料中玉米赤霉烯酮的快速筛查 胶体金快速定量法编制说明度为的甲醇氯仿乙醇,涡动,室温以上离心取上清液加入,取进行检测,结果见表。表样品提取液的选择添加浓度提取液甲醇氯仿乙醇由表可知,氯仿作为提取液时......”。

3、“.....线显色浅采用甲醇提取液,线显色深浅适中且梯度明显,为最优方案。蒸除溶剂,柱层析纯化后得到羧丙基玉米赤霉烯酮,即为玉米赤霉烯酮半抗原。人工抗原的合成及鉴定免疫原的合成将玉米赤霉烯酮半抗原与进行偶联得到免疫原。具体操作如下取半抗原,溶解于甲基甲酰胺中取戊醛水溶液,加入半抗原溶液中,室温下搅拌,即可得到反应液称取,使之充分溶解在中,将反应液逐滴缓慢滴加到溶液中,并于室温下搅拌,用的硼氢化钠水溶液进行还原反应,用透析,每天换透析液次,得到玉米赤霉烯酮免疫原。包被原的合成将玉米赤霉烯酮半抗原注表示阳性,表示阴性。表表同此注释。结果表明种饲料原料样品添加浓度为时,本检测方法的测定结果均为阳性,因此可以确定该方法检测限为。假阳性率取空白小麦大米黄豆玉米豆粕花生粕样品各份,玉米赤霉烯酮添加的小麦大米黄豆玉米豆粕花生粕样品各份,经样品前处理后进行检测,结果见表。统计假阳性数......”。

4、“.....样品垫的末端与膜的始端相连,膜的末端与吸水垫的始端相连,样品垫的始端与底板的始端对齐,吸水垫的末端与底板的末端对齐试纸黏贴有保护膜,保护膜覆盖在样品垫上,为检测端,上面印有字样。试纸条检测过程的优化样品提取方法的研究在研制本方法的过程中,尽量简化样品前处理的步骤,力求方法更加简单快速。对于饲料原料样品,般需要简单的过筛粉碎过程。试验摸索中发现,粉碎后的饲料原料样品,需加入提取液进行提取,将提取后的上清液加入到磷酸盐缓冲液中,混匀后,点样。具体试验过程如下样品提取液的选择取阴性豆粕样品......”。

5、“.....经过筛和粉碎后,各称取到离心管中,分别加入金标抗体,孵育,之后插入试纸条,液体流动时开始计时,反应后观察结果。检测方法技术参数的确定检测限取空白小麦大米黄豆玉米豆粕花生粕样品各份,按表添加至工作浓度,经样品前处理后进行检测,结果见表。表添加样品准备添加浓度小麦大米黄豆玉米豆粕花生粕份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份份合计份份份份份份份表检测限确定样品添加浓度测定结果小麦大米黄豆膜上结合停留,除抗原点样处为红色外,膜其他位置都为白色。封闭液封闭后得到的斑点颜色也很深,但膜上呈深浅不的粉红色,降低了斑点同背景的反差。封闭液封闭后得到的斑点颜色较浅。说明封闭液的封闭效果比其他种封闭液封闭效果好。包被抗原点样后,用封闭液以不同的封闭时间分别在室温条件下进行封闭,组装试纸条检测阴性豆粕样品,观察胶体金在膜上的层析情况及检测线的显色情况,结果见表......”。

6、“.....抗原点样后,封闭和室温条件下封闭均能得到着色较深背景较浅的斑点。为缩短试验时间减少外界因素对试验的影响,选择的封闭条件为封闭。金标抗体稀释液和干燥条件的筛选分别用种不同配方的稀释液将金标抗体做稀释后,组装试纸条检测阴性豆粕样品,观察显色情况,结果见表。饲料及饲料原料中玉米赤霉烯酮的快速筛查 胶体金快速定量法编制说明。显色时间的研究把金标抗体冻干在微孔中,组装试纸玉米豆粕花生粕表样品垫选择结果样品垫型号样品吸收情况吸收不完全吸收不完全吸收完全检测线显色情况由表可知,采用插条方式进行检测时对豆粕中各组分吸收效果依然较差,虽然检测线稍有显色,但显色很浅。作为样品垫在插条模式中显示出了极大的优势,不但对样品过滤效果较好,而且层析速度相对快速,检测线显色明显。这种直接向酶标板孔中滴加样品的模式,操作简便。所以,选择作为样品垫,并采用插条模式进行检测......”。

7、“.....在膜上点样后烘干,组装试纸条检测阴性豆粕样品,观察显色情况,结果见表。表包被稀释液筛选结果包被原浓度包被液由表可知,使用不同的包被稀释液,试纸条显色结果有定差异,其中包被稀释液在稀释至,膜上点样着色照样很深,而其他包被稀释液在稀释至,颜色很淡或不显色,故选择测限方法的准确率,通过对经验证的阴阳性样品进行检测,得到本检测方法的假阴性率和假阳性率,盲样测定与仪器方法的结果进行比对,确保本方法的检测结果可靠方法的特异性,运用本方法对饲料原料中常见的其他真菌毒素进行检测,确保本方法能特异性地检测饲料原料中玉米赤霉烯酮残留。在技术指标完成试验工作之后,严格按照标准的格式,起草编写标准文本内容和编制说明内容......”。

8、“.....有关技术内容是在参考国外有关标准及文献的基础上经研究改进和验证后制定的。标准技术内容和技术指标的论证技术原理本方法应用了竞争抑制免疫层析原理。将氯金酸用还原法制成定直径的金溶胶颗粒,标记抗体。硝酸纤维素膜为载体,利用了微孔膜的毛细管作用,滴加在膜条端的液体慢慢向另端渗移。在移动的过程中,会发生相应的抗原抗体反应,并通过免疫金的颜色而显示出来。样本中的玉米赤霉烯酮在流动的过程中与胶体金标记的特异性抗体结合,抑制了抗体和硝测偶联物的光吸收值,按公式计算两种物质在偶联物中的摩尔浓度比,即偶联比偶偶偶偶蛋白含量的测定将偶联物稀释到适当倍数后,测定和的分光光度值,按公式计算蛋白的浓度即偶联物的浓度蛋白质免疫原和包被原的鉴定结果通过紫外扫描法鉴定半抗原与载体蛋白的偶联是有效偶联,根据玉米赤霉烯酮半抗原载体蛋白偶联物在特定波长的摩尔吸光系数估算半抗原与载体蛋白的结合比分别为和,偶联效果较好......”。

9、“.....然后按免疫原半抗原与弗氏佐剂的比例充分乳化制成油乳剂疫苗。首次免疫用弗氏完全佐剂疫苗,对周龄小鼠进行免疫,颈背部皮下多点注射,免疫剂量为只。天后免,采用弗氏不完全佐剂,免疫剂量同上天后免,采用弗氏不完全佐剂,免疫剂量同上天后加强免,不加佐剂,直接采用玉米赤霉烯酮半抗原免疫。免疫过程见表。表动物免疫过程免疫过程免疫原免疫剂量只间隔时空白豆粕空白花生粕空白检测份阴性样品份空白和份玉米赤霉烯酮添加样品,结果显示本检测方法对种饲料原料样品检测的假阳性率为。假阴性率取玉米赤霉烯酮添加的小麦大米黄豆玉米豆粕花生粕样品各份,玉米赤霉烯酮添加的小麦大米黄豆玉米豆粕花生粕样品各份,经样品前处理后进行检测,结果见表。统计假阴性数,按照下列公式计算假阴性率假阴性率假阴性数表假阴性率测定结果检测样品测定结果小麦玉米豆粕花生粕度为的甲醇氯仿乙醇,涡动......”。