1、“.....在此我对他们深表谢意。感谢所有参加答辩的老师的指导。入含的醋酸醋酸钠缓冲液，混匀，恒温水浴，加入试剂，沸水中煮沸，冷却后定容到，在下比色，测出值，查阅标准曲线后，求出溶液中的葡萄糖含量。个酶活国际单位等于酶促反应中每分钟生成葡萄糖的酶量。实验中为了便于比较将酶活单位重新定义为酶促反应中每分钟生成葡萄糖的酶量。酶活力其中为反应后待测液中的葡萄糖含量，为酶液的稀释倍数，为酶液体积，为水解时间。发酵条件优化选取分离的两株菌中降解纤维素能力较强菌株的进行发酵条件优化不同碳源对产酶条件的影响在发酵产酶培养基的基础上，以上述条件改变碳源种类，添加量为，考察碳源对产酶的影响。其中碳源主要有葡萄糖，滤纸，麸皮，羧甲基纤维素钠。不同氮源对产酶条件的影响在碳源确定基础上改变氮源种类，比例为，考察氮源对产酶的影响。其中氮源主要有酵母膏，蛋白胨尿素......”。

2、“.....以及蛋白胨。不同值对产酶条件的影响在碳源氮源确定的基础上，调节培养基的初始值为，，，，，。在上述条件下测定纤维素酶活。最佳温度的确定在碳源氮源值确定的基础上，在不同温度条件，下摇瓶发酵培养，测定酶活，确定最佳发酵温度。氮源添加量的优化在碳源氮源值及温度确定的基础上改变氮源的比例，分别为，，，，，。摇瓶发酵培养测定酶活。时间对产酶的试验从发酵的第天开始，每隔抽样进行酶活测定，直至第天结束，比较时间对产酶的影响。结果与分析富集培养的结果将从不同环境中采集的土样按照实验方法进行处理后，分别接种于富集培养基，另外，取土壤悬液，不经富集，直接涂布分离平板。平板培养观察结果。不经富集，直接取土壤悬液涂布分离平板，虽然出发浓度很高，但是分离平板上长出的菌落很少，平均每个平板只有个以下的菌落长出。经过富集培养后，取三个浓度涂布分离平板，三个浓度都有大量的菌落长出......”。

3、“.....所有菌落几乎连成片，很难区分单菌落。次之，涂布的平板上的菌落平均个左右，菌落形态色泽呈现明显的差异。从外观，可以初步判断它们是不同的菌。此结果是由于经过段时间富集培养使土壤中的纤维素降解菌呈现优势状态，增加了纤维素降解菌的浓度。刚果红染色结果经过固体培养基培养，刚果红染色，再用脱色，从两种不同的土壤样品所分离的降解纤维素菌株中各取株水解圈大的菌，标为号长春和号东北农业大学校园内，两株菌的水解圈情况如图图刚果红染色后的水解圈测得水解圈直径，见表由刚果红染色，依据测得的水解圈大小来判断，可初步得出长春土样中分离的号菌降解纤维素的能力强些。这可能是由于长春土样的采集地点富含丰富的纤维素，更适合降解纤维素较强的菌生存，所以较易筛出降解纤维素强的菌。标准曲线的绘制按照实验方法，取支比色管，按表顺序分别加入各种试剂，将各管溶液混匀......”。

4、“.....在处，测定光密度值。所得值见表菌株水解圈直径培养天数菌落直径测试项目葡萄糖液蒸馏水含糖总量光密度表葡萄糖标准溶液光密度测定结果表水解圈直径情况由上述测得的数值绘制葡萄糖标准曲线，葡萄糖含量为横坐标，值为纵坐标。葡萄糖标准曲线如图发酵条件优化结果选取分解纤维素能力较强的号菌株进行发酵条件优化，号菌的菌落形态为绒毛状，初为白色后变为绿色，属于真菌。不同碳源对产酶条件的影响碳源是构成菌体细胞物质和代谢产物的主要成分，同时也是能量来源。按照的方法其他条件不变改变碳源种类，分别以葡萄糖滤纸麸皮羧甲基纤维素钠作为唯的碳源进行发酵实验并测定酶活，不同的碳源使酶活不同，影响结果如图所示。图葡萄糖标准曲线由图可看出，不同种类的碳源对纤维素酶的产生有很大的影响，以作为碳源时的产酶能力最强。可能是因为是可溶性碳源，没有结晶区，纤维素酶对其分解比较容易......”。

5、“.....另外还可看出，以纤维素原料为碳源的产酶效果优于以葡萄糖为碳源的产酶效果，可以说明纤维素酶的确是诱导酶，所以应该在培养基中提供纤维素材料的碳源来诱导纤维素酶的合成。不同氮源对产酶条件的影响氮是组成蛋白质和核酸的主要元素。酶的本质是蛋白质，微生物的生长代谢也离不开氮源。虽然氮源并不作为纤维素酶的诱导物，但对菌体的迅速增长有很重要的作用，有助于缩短培养时间，因此氮源种类对产酶有较大的影响。分别采用不同种类的氮源实验，结果见表。氮源种类酶活尿素大豆粉硫酸铵蛋白胨硫酸铵蛋白胨酵母膏图碳源对号菌产纤维素酶的影响表氮源对号菌产纤维素酶的影响由表可以看出，菌株对有机及无机氮源均能利用，但是有机氮源的利用效果优于无机氮源，利用各种有机氮源时的酶活相差不大，以酵母膏的利用最好。其中以蛋白胨和费尚芬,鹿宁,刘坤......”。

6、“.....严建芳,吴灵英,等稻草发酵菌种得筛选与组配研究饲料研究,，刘春芬,贺稚非等纤维素酶及应用现状粮食与油脂,年第期外山信男等纤维素酶研究进展发酵工业杂志刘小洁,何国庆,陈启和康氏木霉纤维素酶发酵培养基的优化浙江大学学报吴旻,杨树林纤维素酶高产菌株的选育南京理工大学,细菌和真菌降解纤维素的机理国外畜牧科技魏亚琴,李红玉纤维素酶高产菌选育研究进展及未来趋势兰州大学学报自然科学版，,，李燕红，赵辅昆纤维素酶的研究进展生命科学,,,朱玉玺,聂麦茜纤维素优良降解菌的筛选分离及其特性研究西安建筑科技大学,曾青兰纤维素分解菌的分离筛选安徽农业科学郝月，杨翔华，洪新秸秆纤维素分解菌的分离筛选试验中国饲料邬显章酶的工业生产技术第版吉林吉林科学出版社,,刘斌，吴克，蔡敬民，等木霉木聚糖酶固态发酵中试生产条件研究生物技术致谢时间飞速流逝，短短的大学生活已临近尾声，无限感慨......”。

7、“.....本论文是在导师黄晓梅教授的精心指导下完成的，在毕业论文的完成过程中，黄老师总是给予给我真诚的鼓励，帮助我克服了很多困难，我也从她身上学共同作氮源的效果优于以为氮源，与蛋白胨为氮源效果相近不同值对产酶条件的影响培养基的值在影响微生物生长的同时也影响着产物的形成。在不同的值下测定酶活，其结果见图。由图看出，菌的最佳为。低于或高于这个值酶活都显著下降。最佳温度的确定培养温度对微生物的生长和产酶都有极大的影响。微生物的最适生长温度和产酶最适温度有时并不致。结果如图图值对号菌产纤维素酶的影响温度图温度对号菌产纤维素酶的影响在时酶活较低，随着温度升高酶活提高，到达到最高峰，酶活达到，随后，温度继续升高酶活反而开始下降。可见在菌种最适合的温度范围内酶活较高，而低于或高于这个温度，酶活就会下降......”。

8、“.....酶促反应速度加快，呼吸强度加强，最终导致细胞的生长繁殖加快，同时酶失活的速度也加快，菌体衰老提前，发酵周期缩短，对发酵生产不利，反之如果温度过低，菌体代谢缓慢，生长繁殖周期延长，也不利于提高生产效率。氮源比例的优化在氮源确定的基础上，在发酵培养基中加入不同浓度的氮源，确定氮源合适的添加量，也就是确定培养基的合适的碳氮比。结果见图。从图中我们可以看出，在所研究的浓度范围内，氮源的浓度不同对产酶的影响不同。菌的酶活随着氮源浓度到达定的水平后开始下降，说明较高浓度的氮源会抑制纤维素酶的产生，实验确定的酵母膏为最佳氮源。培养时间对产酶的影响培养时间对产纤维素酶的影响如图所示，第天酶活达到最高值，纤维素酶活为，以后酶活逐渐下降。图氮源比例对号菌产纤维素酶的影响菌株发酵初期是菌丝生长时期，培养基中营养物质主要供给菌丝体生长，发酵发酵液变稀......”。

9、“.....分解了培养基中纤维素。如图所示，纤维素酶活在发酵时酶活较低，之后随着菌丝体大量生长酶活迅速升高，在发酵时酶活达到高峰值，之后随着发酵的不断进行，营养物质逐渐消耗，酶活下降。图时间对号菌产纤维素酶的影响讨论富集培养可以使样品中的目标菌，经过段时间培养呈现优势状态，利于目标菌的分离。本实验通过富集培养成功的增加了纤维素降解菌的浓度。但是富集培养本身也存在极大的不足，富集培养仅限于可以培养的微生物，而环境中大约有都是不可培养的微生物，这些不可培养的微生物可能就是优良的纤维素降解菌的来源，但是却在富集培养的过程中给淘汰了。虽然刚果红染色的方法比较直观且为大多数研究者所用，但染色步骤多且要配置数种溶液，且染色过程中菌株易被冲掉且易染杂菌，所以事先必须做两个完全相同的菌株拷贝。利用平板刚果红染色法筛选产纤维素酶的菌株,还可以初步判定酶活性的高低，产酶越多......”。