1、“.....切取立方厘米的小块菌肉，移放在斜面培养基中央。如已开伞的种菇则选菌盖与菌柄交界处的菌肉。将试管放在恒温箱中培养中恒温避光培养。待组织块周围萌发出菌丝，并向培养基蔓延生长后，再挑取生长健壮的菌丝进行转管培养，得到纯的蜜环菌菌株。黄年来，菌索分离法选用生长旺盛，白嫩的蜜环菌菌索，先经升汞水或酒精表面消毒后。用无菌水冲洗并用无菌纱布擦去表面水分。用无菌解剖刀将菌索切成小段，然后，移放在斜面培养基中央。放在恒温箱中培养中恒温避光培养。待组织块周围萌发出菌丝，并向培养基蔓延生长后，再挑取生长健壮的菌丝进行转管培养，得到纯的蜜环菌菌株。无菌操作无菌操作需要对接种室消毒灭菌，按每平方米用量计算的甲醛溶液，高锰酸钾进行熏蒸。先关闭窗户，取甲醛溶液装入容器中，再放入高锰酸钾，人随之离开接种室，关闭房门，熏蒸即可。熏蒸后应隔使用。无菌操作接种时......”。

2、“.....开启紫外灯灭菌后即可工作。超净工作台或接种箱开启紫外灯灭菌后，再进行操作，操作时需在酒精灯火焰附近进行。供试菌株活化将供试菌株大方九龙开及开号用接种钩取玉米粒大小的菌种块放入平板培养基中央，每组个重复，用封口膜封口后放人恒温生化培养箱中培养，待菌索和菌丝发育后，直到长满平皿为止，备用。蜜环菌菌落特征观察将个活化后的供试菌株，用打孔器打成直径为的琼脂块。取块琼脂块接种于平板培养基中，用封口膜密封后放入生化培养箱中恒温培养。然后，每隔观察次菌丝萌动情况。待菌丝萌动后，每天观察记录蜜环菌菌索的生长方式，菌索出现时间，菌索分枝出现的时间，分枝数以及菌索生长点长度等，知道菌索出现第二次分枝。每个菌株个重复。蜜环菌菌丝菌索生长速度研究将个活化后的供试菌株，用打孔器打成直径为的琼脂块。取块琼脂块接种于平板培养基中......”。

3、“.....然后，每隔观察次菌丝萌动情况。待菌丝萌动后，用记号笔以菌种块为中心画菌落生长十字架，然后每隔就用记号笔沿着菌落边缘在十字架的线条上画出菌落直径的边缘线并记录画线时间，直到菌丝长满整个平板为止，最后，用直尺测量菌丝菌落或者菌索的生长的直径与距离，计算出蜜环菌菌丝和菌索在平板培养基上的平均生长速度。每个菌株个重复。结果与分析蜜环菌菌落特征以及菌丝菌索生长特性蜜环菌菌落特征以及菌丝菌索生长特性如表和图所示由此可知，蜜环菌生长过程中主要以菌索方式存在，菌索幼嫩时呈黄白色或浅黄色，成熟后呈黄褐色或深褐色，不同菌株之间菌索的密集度粗细以及颜色有所差异。用低浓度的乙醇溶液滴加到蜜环菌菌丝中菌索发生荧光反应。蜜环菌在液体摇瓶中培养先形成菌丝球，静置培养段时间后就会形成菌索。在五个不同的供式菌株中，菌株在培养基上生长最好，菌丝密集程度高，粗壮......”。

4、“.....在天麻种植中，具有很大的利用价值。表蜜环菌菌落特征菌株编号菌索密集程度菌索粗细菌索颜色较粗菌索幼嫩时呈黄白色或浅黄色，成熟后呈黄褐色或深褐色较粗菌索幼嫩时呈黄白色，成熟后呈黄褐色或深褐色较粗菌索菌索幼嫩时呈白色或黄白色轿稀粗菌索菌索幼嫩时呈白色或浅黄色，成熟后呈深黄色，培养基外为深褐色密较粗菌索幼嫩时呈白色或黄白色，注菌索较密菌索较粗菌索密菌索粗菌索稀。图天麻蜜环菌在固体培养基和液体培养中的菌落形态部分照片蜜环菌菌丝菌索生长特性蜜环菌菌丝菌索生长特性如表和图所示由此可知，蜜环菌接种到培养基蜜环菌菌种时，组织块或者菌索段先萌发形成菌丝，然后菌丝通过生理成熟逐渐形成菌索，菌索生长初表现出白色或者黄白色，随着菌索的不断伸长，菌索颜色逐渐变深为深黄色，衰老时呈棕黑色。同时，在菌索形成的后菌索的尖端进行分枝，形成新的菌索......”。

5、“.....如此就形成了网状的菌索。菌索老化后停止分支，分枝少的菌索比较粗，生长点越长生长力越旺盛。蜜环菌菌索的生长能力，以及菌索发育进度和生长能力的强弱对天麻的产量质量以及稳产率具有很大的决定作用。结论菌的实验室评价指标有蜜环菌菌索的颜色粗细，菌索分枝多少，菌索生长点长短，分支间距离，菌丝发光情况等。菌索越粗壮，蜜环菌的生长力越旺，但是如果生长力越旺盛，菌索的分枝就会增加，菌索就会越来越细。蜜环菌菌索生长点越长，说明菌索的生命力越强。但生命越强，菌索的分枝就会越少，老化速度就会加快。发光性越强，则菌索的生命力就越强。但是发光体不是菌索，而是菌丝及幼嫩菌索周围的菌丝，而且蜜环菌的发光性需要充足的氧气或适宜的低浓度的乙醇，低浓度的乙醇对蜜环菌菌丝不是侵湿作用，如果过湿，则会导致蜜环菌的光学性消失，加适量的乙醇后可看到荧光，保持发光时的湿度......”。

6、“.....在液体培养基内加适量的麦麸或玉米粉，摇床培养天可看到荧光，保持此适度静置培养，荧光可保持周右的时间。参考文献神农本草经北京人民出版社，徐锦堂，冉砚珠天麻栽培技术北京农业出版社，沈栋侠，等天麻种子无菌萌发的研究南京药学院学报，徐锦堂，郭顺星供给天麻种子萌发营养的真菌紫萁小菇真菌学报徐锦堂，牟春天麻原球茎生长发育与紫萁小菇及蜜环菌的关系植物学报王贺，刘俭，等天麻吸收蜜环菌营养基质的细胞学研究植物学报冉砚珠，徐锦堂蜜环菌抑制天麻种子发芽的研究中药通报张维经，李碧峰天麻与蜜环菌的关系植物学报草野俊助天麻与蜜环菌的共生联系东京帝国大学农科大学纪要秦国夫，等蜜环菌的生物学研究进展东北林业大学学报，。，李喜战，等蜜环菌的培养菌种培养食用菌熊鹰，等蜜环菌母种培养基筛选试验中国食用菌吴兴亮，等贵州蜜环菌资源及其生态研究贵州科学谭周进......”。

7、“.....郭顺星蜜环菌固体培养特性中国医学科学院学报徐锦堂天麻营养繁殖茎被蜜环菌侵染过程中细胞机构变化植物学报徐锦堂，等天麻有性繁殖方法的研究药学学报,，徐锦堂，等天麻种子发芽的营养来源及其与蜜环菌的关系中草药周铉天麻的有性繁殖植物学报郭顺星,徐锦堂,等蜜环菌的化学成分及应用研究生物学报中显现出菌丝，后开始出现菌索，菌索生长过程中经过后开始在菌索的顶端分支，形成新的菌索，刚长出的菌索颜色白色，具有很长的生长能力，这具有生长活力的菌索称之为生长点，不同的菌株具有不同的生长点，菌索分支间的距离也各不相同，菌索开始形成时间，菌索分支多少，两个分支之间的距离，以及生长点的长度都可以作为蜜环菌优良菌株的个前期判断指标......”。

8、“.....不同供试菌株之间的生长速度具有显著差异性，其中，速度生长最快，其次是和。生长最慢的是。表不同蜜环菌菌株在中的生长速度菌株编号萌动时间生长速度平均标准误差差异显著性不同蜜环菌菌株在培养基中生长速度菌株编号生长速度图不同蜜环菌菌株在中的生长速度柱状图蜜环菌菌丝菌索的发育特性通过本实验研究可知，蜜环菌菌丝菌索的发育特性为，从子实体或者菌索上分花楸树等。选粗的树干或枝桠，锯成长的木棒。在木棒的两面或三面每隔处砍鱼鳞口，砍至木质部。茵材的处理用水硝铵硫酸镁配成营养液。把菌枝菌棒放在营养液中浸泡小时捞出......”。

9、“.....栽麻天麻在生产上以营养繁殖为主块茎繁殖，这种繁殖方法是以天麻块茎作为播种材料，使其直接产生新个体，大的收获加工，小的继续做播种材料。种栽的选择不论是箭麻白麻米麻，天麻的块茎均可作播种材料。从收获块茎入药的角度讲，白麻好于米麻，米麻好于箭麻。生产上多选择中小白麻重量做播种材料，因中小白麻生长速度快，繁殖能力强，是最好的播种材料。不论什么麻种都应选择个体发育完整，色泽正常无破损和无病害的麻种为种植材料。栽麻时间天麻栽培既可以春栽也可以秋栽。春栽般在月日前后秋栽在月份以后。栽麻方法在床穴底部先放入薄薄的层树叶，将准备好的菌棒顺床穴摆入，菌棒间距左右，填上原土，使菌材半露，然后在茵棒间按八字形或斜平行摆入菌枝，菌枝两端靠近菌棒鱼鳞口，在菌枝鱼鳞口处均匀放入鸡蛋大小菌种，在菌种之间放入麻种，再盖上层树叶......”。