葡萄糖淀粉脑心浸液胶体硫或甘油等，均有助于本菌的生长。普通琼脂培养基培养小时后，形成中等大小圆形或近似圆形表面光滑无色半透明边缘整齐的菌落。普通肉汤培养基生长良好，均等浑浊。抗原构造沙门氏菌具有复杂的抗原结构，般可分为种，即菌体抗原，又称为抗原鞭毛抗原，又称为抗原表面抗原，又称为抗原以及菌毛抗原。抵抗力沙门氏菌对热及外界环境的抵抗力属于中等，作用即被杀死。沙门氏菌的发病机理沙门氏菌引起食物中毒时，需要感染大量病菌才能致病。沙门氏菌随第章文献综述食物进入消化道以后，在小肠和结肠里繁殖，附着于肠黏膜上皮并侵入粘膜下组织，使肠黏膜发炎，从而抑制了肠黏膜对水和电解质的吸收，并引起水肿出血等。随后在通过肠黏膜上皮细胞之间侵入粘膜固有层，在固有层内引起炎症。未被吞噬细胞杀灭的沙门氏菌，经淋巴系统进入血液，而出现时性菌血症，引起全身感染。同时活菌在肠道或血液内崩解出毒力较强的大量的菌体内毒素，而引起全身中毒症状。沙门氏菌的临床症状沙门氏菌食物中毒的临床症状是由活菌和内毒素的协同作用引起的，以急性胃肠炎型为最多，潜伏期般，有时可短至或长至，开始时症状为头痛全身乏力发冷和恶心等，以后出现呕吐腹痛和全身酸痛。病人发，菌体生长代谢旺盛，繁第章材料与方法殖力抗不良环境和噬菌体的能力强，活力最佳，最适合进行试验研究。故本试验采用处于对数生长期的沙门氏菌进行研究。试验步骤沙门氏菌的活化及分离纯化将沙门氏菌接入营养琼脂平板中，倒置于恒温培养箱中培养。取出活化后的平板，挑取单个菌落，划线接种于营养琼脂培养基培养。沙门氏菌种子液的制备挑取纯化培养后的沙门氏菌单个菌落，将其接种于装有营养肉汤培养基的三角瓶中，振荡培养。比浊法测定沙门氏菌的生长曲线取支大试管，用记号笔标明培养时间，即。在超净工作台中，用移液枪准确吸取培养后的沙门氏菌种子液，移于装有营养肉汤培养基的大三角瓶中，快速摇匀。立即分装于已编号的支大试管中，每支试管装，将分装后的试管置于摇床上，振荡培养。分别在将编号为对应时间的试管取出，立即放冰箱中贮存，最后同测定光密度值。以未接种的营养肉汤液体培养基作空白对照，选用波长进行光电比浊测定。按编号从小到大的顺序依次进行测定。沙门氏菌全细胞细胞壁细胞质的制备按照方法进行沙门氏菌细胞的活化和分离纯化，由结果与分析中所得结论选择进行沙门氏菌种子液的制备，之后离心分离湿菌体，以定体积无菌水分三次洗涤沉淀部分，充分震荡摇匀使菌体分散开来，平板菌落计数法进行菌落计数结果为亿。另用移液枪移取菌液于大试管中，加入无菌水，充分振荡摇匀形成倍稀释菌悬液，然后逐级进行次倍稀释，制成组个浓度梯度的沙门氏菌全细胞悬液，浓度梯度值呈比差为的等差序列，备用。用超声波细胞粉碎仪破碎沙门氏菌的全细胞，破碎参数选为破碎间隔实际破碎总时间进行沙门氏菌细胞破碎，之后离心分离，沉淀部分为细胞质上清液为细胞质。将细胞质悬液第章材料与方法充分震荡摇匀，用移液枪移取菌液于大试管中，加入无菌水，充分振匀形成倍稀释菌悬液，然后逐级进行次倍稀释过程，制成组浓度梯度的沙门氏菌细胞质悬液，个浓度梯度值呈比差为的等差序列，备用。组个浓度梯度的沙门氏菌细胞壁悬液的制备同细胞质悬液制备过程。单增李斯特菌全细胞细胞壁细胞质的制备单增李斯特氏菌样品的制备对单增李斯特氏菌进行细胞的活化和分离纯化，选进行单增李斯特氏菌种子液的制备，之后离心分离湿菌体，以定体积无菌水分三次洗涤沉淀部分，充分震荡摇匀使菌体分散开来，平板菌落计数法进行菌落计数结果为亿。选择超声波破碎参数为破碎间隔实际破碎总时间进行单增李斯特氏菌细胞破碎，之后离心分离，沉淀部分为细胞壁上清液为细胞质。三组倍稀释浓度梯度的单增李斯特氏菌细胞壁细胞质悬液的制备同沙门氏菌。沙门氏菌全细胞细胞壁细胞质的光谱采集主成分分析方法介绍主成分分析，是多元统计中的种数据压缩技术，该方法广泛用于化学实验数据的统计分析，是化学计量学中的基础方法。是对多变量数据进行统计处理的种数据线性投影方法，它在尽可能保留原有信息的基础上将高维空间中的样本映射到较低维的主成分空间中。通过分析原始数据的相互关系，采用坐标变换的方法对数据进行正交变换，消除数据间的相关关系，具有分析多变量主次关系的功能。近红外光谱带严重重叠，可造成分析的困难，而在不丢失主要光谱信息的前提下选择为数较少的新变量来代替原来较多的变量，可有效解决光谱重叠的问题，从而提取所需的化学信息。试验参数选择分辨率仪器的分辨率影响近红外光谱的分析，而且对不同组分的影响是不同的，对于光谱重叠严重的部分，提高分辨率有利于光谱的分析，但过高会大大增加试验和数据处理工作量。有研究表明，当分辨率大于时，部分样品信息损失，较低的分辨率可以保证信噪比，综上本试验设分辨率为。扫描次数扫描次数是在次测量过程中对光谱的累加，累加后的光谱除以扫描次数即为每个样本菌能够区分开来。因此，通过不同浓度梯度的沙门氏菌单增李斯特菌细胞的红外光谱来获得沙门氏菌单增李斯特菌的近红外光谱信息，继而研究沙门氏菌单增李斯特菌的近红外光谱的鉴别方法，将有可能对有害微生物的鉴别测定提供种快速简便的检测方法，具有较好的应用前景。此外，近红外光谱分析技术在微生物学方面的应用，又可能为人类疾病的早期诊断提供科学依据。研究近红外光谱分析技术来检测食品中常见的致病菌，具有极大的经济和和社会此后的年间，用于从食品中分离沙门氏菌的方法实质上与那些用于临床病料的方法是相结果与分析沙门氏菌的分离培养结果单增李斯特菌的分离培养结果沙门氏菌的生长曲线比浊法测定的吸光度生长曲线的绘制沙门氏菌单增李斯特菌的鉴别方法研究沙门氏菌全细胞细胞壁细胞质的光谱图单增李斯特菌全细胞细胞壁细胞质的光谱图沙门氏菌单增李斯特菌全细胞的鉴别分析沙门氏菌单增李斯特菌细胞壁的鉴别分析沙门氏菌单增李斯特菌细胞质的鉴别分析第章结论总结展望参考文献致谢前言前言沙门氏菌是种人畜共患和食源性疾病的致病菌。人畜感染后可呈无症状带菌状态，也可表现为有临床症状的致死疾，它可能加重病态或死亡率，或者降低动物的繁殖生产力。自世纪后期，沙门氏菌首次被鉴定为人类自世纪后期，沙门氏菌首次被鉴定为人类的种病原以来，检测方法都是建立在采取感染病人的粪便或血液作为临床病料的基上。呈无症状带菌状态，也可表现为有临床症状的致死疾，它可能加重病态或死亡率，或者降低动物的繁殖生产力。献致谢前言前言沙门氏菌是种人畜共患和食源性疾病的致病菌。人畜感染后可沙门氏菌全细胞细胞壁细胞质的光谱采集单增李斯特菌全细胞细胞壁细胞质的光谱采集第章结果与分析沙门氏菌的分离培养结果单增李斯特菌的分离培养结果沙门氏菌的生长曲线比浊法测定的吸光度生长曲线的绘制沙门氏菌单增李斯特菌的鉴别方法研究沙门氏菌全细胞细胞壁细胞质的光谱图单增李斯特菌全细胞细胞壁细胞质的光谱图沙门氏菌单增李斯特菌全细胞的鉴别分析沙门氏菌单增李斯特菌细胞壁的鉴别分析沙门氏菌单增李斯特菌细胞质的鉴别分析第章结论总结展望参考文献致谢前言前言沙门氏菌是种人畜共患和食源性疾病的致病菌。人畜感染后可呈无症状带菌状态，也可表现为有临床症状的致死疾，它可能加重病态或死亡率，或者降低动物的繁殖生产力。自世纪后期，沙门氏菌首次被鉴定为人类的种病原以来，检测方法都是建立在采取感染病人的粪便或血液作为临床病料的基上。此后的年间，用于从食品中分离沙门氏菌的方法实质上与那些用于临床病料的方法是相同的。虽然这些方法本身证明是可靠的，但却很费力耗时，需要天才能完成。单核细胞增生李斯特菌也是种人畜共患病的病原菌。感染后主要表现为败血症脑膜炎和单核细胞增多。单增李斯特菌在各年龄段人群中均可发病，尤其免疫机能低下者和新生儿孕妇老年人等，病死率高达。应用常规方法检验耗时费力，程序复杂。采用聚合酶链反应法检测，也需要小时才能完成检测过程，仍然满足不了实时检测的需要。进入年代，近红外分析技术逐步受到分析化学家的重视，应用逐步扩展到石油化工医药生物化学烟草纺织品等领域，现已发展成为种的分析技术活跃在光谱分析领域。傅立叶变换近红外光谱分辨率高，不仅能提供分子基团特征的振动吸收谱带，而且能敏锐地探测分子基团及周围环境的变化。细胞的近红外光谱能够反映核酸蛋白质糖蛋白和生物膜等分子在细胞内的含量构型构象及其所发生的变化。通过建立其近红外光吸收模型，找到食品中对数期的沙门氏菌单增李斯特菌的近红外特征吸收光谱，使得不同致病菌能够区分开来。因此，通过不同浓度梯度的沙门氏菌单增李斯特菌细胞的红外光谱来获得沙门氏菌单增李斯特菌的近红外光谱信息，继而研究沙门氏菌单增李斯特菌的近红外光谱的鉴别方法，将有可能对有害微生物的鉴别测定提供种快速简便的检测方法，具有较好的应用前景。此外，近红外光谱分析技术在微生物学方面的应用，又可能为人类疾病的早期诊断提供科学依据。研究近红外光谱分析技术来检测食品中常见的致病菌，具有极大的经济和和社会效益。第章文献综述第章文献综述沙门氏菌的概论沙门氏菌属是群形态和培养特性都类似的肠杆菌科中的个大属，它包括多个血清型。病原学认为，沙门氏菌是种人畜共患和食源性疾病的致病菌。世界各地的食物中毒中，英国中国沙门氏菌食物中毒居首位，美国居第二位。食源性致病菌作为个严重的公共卫生问题是影响食品安全的主要原因之，它严重危害着人们的生命健康从而造成重大经济损失。因此，对致病性细菌的快速检测直是相关研究的热点。沙门氏菌的病原学特性形态与染色沙门氏菌为革兰氏阴性，较为细长的杆菌，大小为，不产生芽孢，般无荚膜，但在黏液样变异时，可见菌体黏液层增厚。培养特性沙门氏菌为需氧或兼性厌氧菌。生长温度为，最适温度为。适宜为。对营养要求不高，般在普通培养基上均能良好生长。在培养集中若加入硫代硫酸钠胱氨酸血清内。建立行之有效的规章制度，定期检查安全卫生措施，建立安全档案，把安全事故的隐患消除在萌芽之中。抗震设计镇水源地保护工程可行性研究报告设计依据建筑抗震设计规范建筑物抗震设计规范中国地震烈度区划图及使