之间固定长度序列呈指数扩增。细胞内复制与技术比较细胞内复制不同点解旋在解旋酶作用下，边解旋边复制高温解旋，双链完全分开酶解旋酶聚合酶聚合酶引物或温度体内温和条件高温相同点需提供复制模板四种脱氧核苷酸为原料子链延伸方向都是从端到端易考明示分子复制人工控制解开螺旋在时，双螺旋打开，形成两条单链，称为变性。恢复螺旋在左右时，两条单链重新形成双螺旋结构，称为复性。复制条件缓冲液模板四种脱氧核苷酸热稳定聚合酶和两种引物。反应场所仪。技术中引物含义引物是小段单链或分子。作用为聚合酶提供合成端起点。种类扩增个分子需要种引物。数目引物数目等于新合成子链数目。与母链关系两种引物分别与母链端通过碱基互补配对结合。命题预测本部分内容在近几年高中命题中较少出现，但考查频率有升高趋势。考向预测实验原理过程北京理综关于高中生物学实验基本原理，叙述不正确是噬菌体须在活菌中增殖培养是因其缺乏代谢系统提取组织是利用不同化合物在溶剂中溶解度差异成熟植物细胞在高渗溶液中发生质壁分离是因为细胞壁具有选择透过性呈指数扩增片段是因为上轮反应产物可作为下轮反应模板解析噬菌体必须在活菌中增殖培养是因其没有细胞结构，缺乏代谢系统没法完成各项生命活动，正确提取组织是利用不同化合物在溶剂中溶解度不同进行萃取，正确成熟植物细胞发生质壁分离是由于存在浓度差原生质层和细胞壁全透且伸缩性差，细胞壁不具有选择透过性，错误呈指数扩增是因为半保留复制，所以上轮产物可作为下轮模板，正确。答案考向预测二实验操作注意事项多聚酶链式反应技术是项在生物体外复制特定片段核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答过程高温使变性解旋，对该过程原理叙述正确是。该过程用到耐高温解旋酶破坏氢键该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键该过程不需要解旋酶作用该过程与人体细胞过程完全相同过程要用到酶是耐高温。这种酶在高温下仍保持活性，因此在扩增时可以加入，需要不需要再添加。反应除提供酶外，还需要满足基本条件有。如果把模板两条链用标记，游离脱氧核苷酸不做标记，控制温度循环次，则在形成子代中含有标记占。解析高温所起作用类似于解旋酶，使双链变为单链。过程是技术延伸阶段，当系统温度上升到左右，溶液中四种脱氧核苷酸在耐高温聚合酶作用下合成新链。这种聚合酶在高温下不变性，所以次性加入即可。技术遵循半保留复制特点。经过三次循环，共产生个分子，其中有个分子含有标记。答案聚合酶次不需要模板两种引物四种脱氧核苷酸，通过控制温度使复制在体外反复进行考点三血红蛋白提取和分离常用蛋白质分离方法凝胶色谱法核心突破蛋白质项目相对分子质量大相对分子质量小凝胶内部不能进入能进入运动方式垂直向下垂直向下和无规则扩散运动经过路程较短较长洗脱次序先流出后流出电泳法原理在定下，蛋白质分子些基团解离后带上正电或负电。在电场作用下，带电分子会向着与其所带电荷相反电极移动。由于待分离样品中各种分子带电性质差异以及分子本身大小形状不同，使带电分子产生不同迁移速度，从而实现样品中各种分子分离。分离技术分离蛋白质比较分离技术分离蛋白质实验原理浓度溶液中溶解度不同，且不溶于冷酒精利用热变性原理体外扩增依据相对分子质量大小不同来分离蛋白质实验过程选取材料破碎细胞释放除杂析出与鉴定变性复性延伸样品处理凝胶色谱操作实验结果获得较纯净获得大量相对分子质量不同蛋白质得以分离实验意义为研究打下基础解决了研究中材料不足问题为蛋白质研究和利用提供了原材料比较琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳从载体上看，利用琼脂糖凝胶作为载体是琼脂糖凝胶电泳，利用聚丙烯酰胺凝胶作为载体是聚丙烯酰胺凝胶电泳。从依据上看，利用了分子带电性质差异和分子大小是琼脂糖凝胶电泳，仅利用了分子大小是聚丙烯酰胺凝胶电泳。从优点上看，琼脂糖凝胶电泳操作简单，电泳速度快，样品不需处理，电泳图谱清晰，分辨率高，重复性好聚丙烯酰胺凝胶电泳消除了净电荷对迁移率影响，使电泳迁移率完全取决于分子大小。解惑“血红蛋白提取和分离实验”中注意事项红细胞洗涤洗涤次数不能过少，否则无法除去血浆蛋白要低速短时离心，否则会使白细胞等同沉淀，达不到分离效果。凝胶预处理用沸水浴法不但节约时间，而且除去凝胶中可能带有微生物，排除胶粒内空气。色谱柱装填装填时尽量紧密，减小颗粒间隙无气泡洗脱液不能断流。色谱柱成功标志红色区带均匀致地移动。命题预测本考点高考命题较少涉及，为冷考点，复习时还应熟悉血红蛋白提取和分离程序和原理。考向预测蛋白质提取和分离原理已知样品中存在甲乙丙丁戊五种蛋白质分子，其分子大小所带电荷性质和数量情况如下图所示，下列有关该样品中蛋白质分离叙述正确是将样品装入透析袋中透析，若分子乙保留在袋内，则分子丙也保留在袋内若用凝胶色谱柱分离样品中蛋白质，则分子甲移动速度最快若将样品以速度离心，分子戊存在于沉淀中，则分子甲也存在于沉淀中若用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中蛋白质分子，则分子甲和分子戊形成电泳带相距最远解析分子甲分子量最小，进入凝胶内部通道而移动速度慢分子乙留在透析袋内，说明其相对分子质量比较大，分子丙比分子乙相对分子质量大，所以分子丙也留在袋内分子戊比分子甲相对分子质量大，故离心后分子甲可能不存在于沉淀物中聚丙烯酰胺凝胶电泳中样品，其电泳迁移率完全取决于分子大小，相对分子质量相差越大，形成电泳带相距越远。答案考向预测二血红蛋白提取和分离程序和原理红细胞中含有大量血红蛋白，我们可以选用猪牛羊或其他脊椎动物血液进行实验来提取和分离血红蛋白。下列对血红蛋白提取和分离叙述，错误是血红蛋白提取和分离般按照样品处理粗分离纯化纯度鉴定顺序进行纯化过程中要用生理盐水充分。培养酵母菌时，培养基中蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌提供和。从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和，以防止胡萝卜素分解萃取过程中宜采用方式加热以防止温度过高萃取液浓缩前需进行过滤。其目是。纸层析法可用于鉴定所提取胡萝卜素。鉴定过程中需要用胡萝卜素标准品作为。解析微生物接种常用稀释涂布平板法和平板划线法，为了防止其它杂菌污染，接种过程要进行无菌操作，接种前对接种环灼烧是为了杀灭接种环上微生物。蔗糖主要提供碳源，也可作为能源物质，硝酸盐含氮元素，可提供氮源。胡萝卜素不是很稳定，温度过高，干燥时间过长会导致其分解，由于萃取剂往往具有挥发性，且易燃烧，如果直接加热挥发出来有机溶剂遇明火易燃烧爆炸，萃取后需将原料中固体物滤去。用标准样品可以对照检查提取出来胡萝卜素纯度。答案稀释涂布平板法灭菌防止杂菌污染碳源氮源时间水浴滤去不溶物实验对照考向预测二植物芳香油提取与鉴定海南单科根据生物相关知识，回答胡萝卜素提取和酶应用方面问题从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前将胡萝卜粉碎和，以提高萃取效率水蒸气蒸馏法填“适合”或“不适合”胡萝卜素提取，原因是鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用法，并以样品作为对照。若要提高衣物上血渍去除效果，可在洗衣粉中加入酶，因为该酶能将血红蛋白水解成可溶性或若要提高衣物上油渍去除效果，洗衣粉中可添加酶使用加酶洗衣粉时，水温过低或过高时洗涤效果不好原因分别是。解析萃取是将粉碎干燥植物原料用有机溶剂浸泡，使芳香油溶解在有机溶剂中。水蒸气蒸馏法是植物芳香油提取常用方法，它原理是利用水蒸气将挥发性较强芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层。胡萝卜素粗品通过纸层析进行鉴定，如果萃取样品中出现了和标准样品样层析带，说明提取胡萝卜素实验成功。血渍中含有蛋白质，可用含蛋白酶洗衣粉洗涤。其原理是蛋白酶能将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸。油渍主要成分是脂肪，需用含脂肪酶洗衣粉。水温过低抑制酶活性，水温过高会使酶变性失活。答案干燥不适合水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出纸层析标准胡萝卜素碱性蛋白或蛋白氨基酸小分子肽脂肪水温过低时酶活性较低，水温过高会使酶变性失活真题集训限时检测高考体验江苏单科同学用洋葱进行粗提取和鉴定实验，操作错误是加入洗涤剂后用力进行快速充分研磨用蛋白酶纯化过滤后研磨液中加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热解析加入洗涤剂后研磨动作要轻缓柔和，否则容易产生大量泡沫，不利于后续步骤操作，错误利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取与蛋白质分开，起到纯化作用，正确加入酒精溶液，静置溶液中出现白色丝状物就是粗提取，用玻璃棒沿个方向轻缓搅拌，防止断裂，正确用二苯胺鉴定需要水浴加热，正确。答案江苏卷下列关于“粗提取与鉴定实验”叙述，正确是洗涤剂能瓦解细胞膜并增加在溶液中溶解度将丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝常温下菜花匀浆中有些酶类会影响提取用玻璃棒缓慢搅拌滤液会导致获得量减少解析洗涤剂可瓦解细胞膜，有利于释放，但不能增加在溶液中溶解度，项错误含丝状物应先溶解在物质量浓度为溶液中，再用二苯胺试剂在沸水浴条件下检测，冷却后变成蓝色，项错误常温下菜花匀浆中些酶如水解酶，其活性较高，会影响提取，项正确用玻璃棒缓慢搅拌滤液可防止分子断裂，但不影响提取量，项错误。答案广东卷以下关于猪血红蛋白提纯描述，不正确是洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少血红蛋白颜色可用于凝胶色谱法分离过程监测在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小杂蛋白移动慢解析生理盐水为猪体细胞等渗溶液，所以在洗涤红细胞时，使用生理盐水可维持细胞正常形态，项正确由于哺乳动物成熟红细胞缺少细胞核和各种细胞器，所以提纯时杂蛋白相对较少，项正确如果凝胶色谱柱装填得很成功，分离操作也正确，能清楚地看到血红蛋白红色区带均匀狭窄平整，随着洗脱液缓慢流出，所以血红蛋白颜色可用于凝胶色谱法分离过程监测，项正确当相对分子质量不同蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小蛋白质容易进入凝胶内部通道，路程较长，移动速度较慢，后洗脱出来，项错误。答案全国课标下列是与芳香油提取相关问题，请回答玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有性质。蒸馏时收集蒸馏液是不是纯玫瑰精油，而是。当蒸馏瓶中水和原料量定时，蒸馏过程中，影响精油提取量主要因素有蒸馏时间和。当原料量等其他条件定时，提取量随蒸馏时间变化趋势是。如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会，原因是。密封不严瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度地方，目是。植物花中精油相对含量随花不同生长发育时期变化趋势如图所示。提取精油时采摘花最合适时间为天左右。从薄荷叶中提取薄荷油时能不能采用从玫瑰花中提取玫瑰精油方法，理由是。解析由于玫瑰精油易挥发，难溶于水，化学性质稳定，因此可以用水蒸气蒸馏法提取，冷却后必然含有水蒸馏提取效果与蒸馏温度与蒸馏时间有关，随着蒸馏时间延长，原料中含有精油减少，提取量也会减少直至再也提不出精油。蒸馏过程中，如果不冷却，提取后混合液温度较高，由于精油易挥发，其含量会降低保存时，环境温度应