标记分解为和。解析幽门螺杆菌含有脲酶，能以尿素为氮源，在加入尿素和酚红指示剂培养基中培养，由于尿素经脲酶降解可产生碱性，能使培养基中酚红由红黄色变成红色，故菌落周围会出现红色环带。由于尿素加热会分解，对尿素溶液进行灭菌最好用玻璃砂漏斗过滤。微生物分离和培养步骤是配制培养基灭菌倒平板接种培养。为获得单菌落，接种操作前应先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上即可。微生物培养时需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中，若不倒置培养，则无法形成单菌落。幽门螺杆菌能将标记尿素分解为和，故临床上常用呼气试验检测人体内幽门螺杆菌存在。答案脲酶红接种涂布单恒温培养箱无法形成单菌落尿素归纳拓展选择培养基及应用实例选择培养基在培养基中加入种化学物质，以抑制不需要微生物生长，促进所需要微生物生长。目是培养分离出特定微生物。选择培养基应用实例培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。培养基中加入高浓度食盐可得到金黄色葡萄球菌。培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物，因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。当培养基种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。如石油是唯碳源时，可以抑制不能利用石油微生物生长，使能够利用石油微生物生存，达到分离能消除石油污染微生物目。改变微生物培养条件，也可以达到分离微生物目，如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温微生物。考向预测二微生物数量测定新课标Ⅱ为了调查河流水质状况，研究小组测定了该河流水样中细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后空平板先行培养了段时间，这样做目是然后，将水样稀释倍，在个平板上用涂布法分别接入稀释液经适当培养后，个平板上菌落数分别为和。据此可得出每升水样中活菌数为。该小组采用平板划线法分离水样中细菌。操作时，接种环通过灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上次末端开始划线。这样做目是。示意图和中，表示是用稀释涂布平板法接种培养后得到结果。该小组将得到菌株接种到液体培养基中并混匀，部分进行静置培养，另部分进行振荡培养。结果发现振荡培养细菌比静置培养细菌生长速度快。分析其原因是振荡培养能提高培养液含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高利用率。解析为了确定培养基灭菌是否合格，微生物学实验般会设置空白对照，随机取若干灭菌后空平板培养段时间，观察培养基上是否有菌落生成利用平板菌落计数法计算公式估算水样中活菌数接种计数结果平均值接种体积稀释倍数接种时接种环需要灼烧灭菌在第二次及以后划线时，总是从上次末端开始划线，这样做目是通过划线次数增加，使每次划线时菌体数目逐渐减少，以便得到菌落。由题图可知图为平板划线法接种结果菌落相对均匀分布。震荡培养可以增加液体培养基氧气含量，促进好氧型微生物生长另外震荡培养还可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质利用率。答案检测培养基平板灭菌是否合格灼烧将聚集菌体逐步稀释以便获得单个菌落溶解氧营养物质考点三分解纤维素微生物分离两种菌株筛选原理比较核心突破土壤中分解尿素细菌分解纤维素微生物选择培养基成分尿素作为唯氮源鉴定方法在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，升高，说明细菌能分解尿素选择培养基成分纤维素作为唯碳源鉴定方法刚果红染色法，即刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，培养基出现以纤维素分解菌为中心透明圈选择培养基与鉴别培养基比较种类制备方法原理用途举例选择培养基培养基中加入些化学物质依据些物质或环境条件嗜好抗性而设计从众多微生物中分离所需微生物加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌鉴别培养基培养基中加入种指示剂或化学药品依据微生物产生种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显特征变化而设计鉴别不同种类微生物伊红美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌分离纤维素分解菌几个关键步骤分离纤维素分解菌实验中先用选择培养基，再用鉴别培养基。选择培养基为液体培养基，以纤维素作为碳源和能源微生物可以正常生长，而其他绝大多数微生物不能正常生长因培养基中无凝固剂，为液体培养基，利用液体培养基能使营养成分充分消耗，以增加纤维素分解菌浓度。鉴别培养基含琼脂，为固体培养基，因为要在培养基上形成我们肉眼可见菌落。刚果红染色法应用就是此培养基。易混易错对选择培养基选择方法区分不清在培养基中加入种化学物质。例如，加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌加入高浓度食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里加入是在主要营养成分完整基础上加入。改变培养基中营养成分。例如缺乏氮源时可以分离出固氮微生物石油作为唯碳源时，可以分离出能消除石油污染微生物。改变微生物培养条件。例如，将培养基放在高温环境下培养，可以得到耐高温微生物。命题预测微生物分离计数与鉴定是微生物技术领域重点内容之，广泛应用于食品加工，微生物污染测定等行业，具重要实践价值，相关内容在近年高考中多有体现，应高度重视。考向预测纤维素分解菌分离与鉴定新课标Ⅰ植物秸秆中纤维素可被些微生物分解。回答下列问题分解秸秆中纤维素微生物能分泌纤维素酶，该酶是由种组分组成复合酶，其中葡萄糖苷酶可将分解成。在含纤维素培养基中加入刚果红时，可与纤维素形成色复合物。用含有该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌菌落为中心。为从富含纤维素土壤中分离获得纤维素染应注意事项是。解析富集培养培养基是种选择培养基，可用于具有种代谢特点微生物，本题就是为了选择出能分解对羟基苯甲酸微生物。该实验培养基碳源为对羟基苯甲酸全过程包括筛选扩大培养纯化鉴定。答案选择培养基对羟基苯甲酸利用以对羟基苯甲酸为唯碳源选择培养基，经富集培养，选择出能降解对羟基苯甲酸微生物增大分解对羟基苯甲酸微生物比例对羟基苯甲酸对照实验说明通过富集培养确得到了欲分离目标微生物单细胞挑取接种环在火焰上灼烧灭菌，烧红接种环在空气中冷却，同时打开皿盖挑取菌种接种到试管中，并塞好棉塞，接种环在火焰上灼烧，杀灭残留物真题集训限时检测高考体验江苏单科研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确是培养基分装到培养皿后进行灭菌转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线接种后培养皿须放在光照培养箱中培养培养过程中每隔周观察次解析在配制培养基过程中要先灭菌后倒平板，错误转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线，正确接种后放置在恒温培养箱中进行培养，错误培养过程中般要隔天观察次，错误。答案北京卷高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大项是将少许干酵母加入到新鲜葡萄汁中将毛霉菌液接种在切成小块鲜豆腐上将转基因植物叶片接种到无菌培养基上将土壤浸出液涂布在无菌选择培养基上解析在酿制葡萄酒过程中，如果灭菌不彻底会影响葡萄酒品质，但影响不大在制作腐乳过程中，发酵过程有多种微生物参与，所以该过程不进行严格无菌操作对结果影响不大在植物组织培养过程中，如果灭菌不彻底，杂菌产生物质会影响外植体生长，甚至杀死外植体，导致培养失败，对结果影响最大土壤浸出液本身就含有大量杂菌，另外在选择培养基上只能生存我们所要筛选细菌，所以无菌操作不严格，对结果影响也不会太大。答案上海卷图中表示四种微生物培养物在添加利福平前后细胞内含量。由此可以判断出细菌和酵母菌可能是解析利福平抑制细菌合成，使和蛋白合成停止，只能作用于细菌。而古细菌是类很特殊细菌，核糖体对利福平不敏感聚合酶和真核细胞相似，其复制转录和翻译接近真核生物利福平也对酵母菌等真核生物无效，所以加利福平前后，古细菌和酵母菌中变化不大。答案全国课标Ⅱ临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照定实验步骤操作，以确定致病菌对不同抗生素敏感性。回答下列问题为了从样本中获取致病菌菌落，可用法或法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养鉴别等步骤获得。取该单菌落适当稀释，用法接种于固体培养基表面，在培养箱中培养，使其均匀生长，布满平板。为了检测该致病菌对于抗生素敏感性，将分别含有四种抗生素滤纸片均匀置于该平板上不同位置，培养段时间后，含滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素含滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致致病菌对抗生素含滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素含滤纸片周围透明圈比含小，说明含滤纸片周围透明圈也比含小，且透明圈中出现了个菌落，在排除杂菌污染情况下，此菌落很可能是抗生素。根据上述实验结果，为达到抗菌目，最好应选择抗生素。解析分离菌落常用稀释涂布平板法或划线涂布法。取该单菌落适当稀释，用涂布法接种于固体培养基表面，适宜温度培养。含抗生素滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对该抗生素有敏感性，周围没有透明圈说明该抗生素不具有敏感性。透明圈越大敏感性越强。实验结果抗生素对该致病菌作用最好。答案划线稀释涂布或涂布涂布敏感不敏感该致病菌对敏感性比对弱耐药菌四川卷有机农药苯磺隆是种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中些微生物降解。分离降解苯磺隆菌株和探索其降解机制实验过程如图甲乙所示。微生物生长繁殖所需主要营养物质有碳源水四类，该实验所用选择培养基只能以苯磺隆作为唯碳源，其原因是。与微生物培养基相比，植物组织培养培养基常需添加生长素和，这些植物激素般需要事先单独配制成保存备用。纯化菌株时，通常使用划线工具是。划线个平板培养后，第划线区域划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域第条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能操作失误有。为探究苯磺隆降解机制，将该菌种培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验假设是，该实验设计是否合理为什么。解析微生物生长所需要主要营养物质包括碳源氮源水和无机盐。使用选择培养基是因为它是允许特定微生物生长，同时又能抑制或阻止其他微生物生长培养基。植物组织培养常需要添加植物激素有生长素和细胞分裂素。培养基成分般先分别配制成母液备用。平板划线法接种时常使用接种环划线。第二区域只有第条线无菌落，而其他划线却有菌落，很可能是因为接环在灼烧后未冷却，第次划线时将菌种烫死，而后接种环冷却，能正常划线，也可能是第次划线时划线未从第区域末端开始，使接种环上无菌种。题中实验为取得菌种培养液过滤后离心上清液，加入蛋白酶处理后，测得其对苯磺隆降解率。意为假设菌种能产生降解苯磺隆蛋白质类酶，若用蛋白酶处理后，可使该酶分解，苯磺隆降解率下降，则假设成立。但由于缺乏空白对照，不能比较蛋白酶是否降低苯磺隆降解率，该实验不能得出相应结论。答案氮源和无机盐只有能利用苯磺隆微生物能正常生长和繁殖细胞分裂素母液接种环接种环灼烧后未冷却划线未从第区域末端开始目菌株能分泌降解苯磺隆蛋白质不合理，缺少空白对照专题二微生物培养和利用考纲引领微生物分离和培养。种微生物数量测定。培养基对微生物选择作用。微生物实验室培养培养基成分和分类要点梳理夯实基础知识梳理碳源氮源水和无机盐及特殊营养物质连线无菌技术类型方法及对象凝固剂凝固