论上推测,第二轮循环产物中含有引物的片段占在第二轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的片段引物之间或引物自身发生碱基互补配对则不能扩增目的基因耐热的聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到端解析基因扩增中引物通常是小段或片段,从理论上推测,第二轮中含引物的比例为,第三轮中占,正确由于题图中的引物和引物均不在该片段的端点,因此第轮循环后,得到的两片段中两条脱氧核苷酸链都不等长通过绘图可推知,第二轮中亦不会出现等长的引物,所以在第二轮循环产物中不会出现两条脱氧核苷酸链等长的片段,错误引物和引物必须与目的基因配对,如果引物之间或引物自身发生碱基互补配对则不能扩增目的基因,正确由于复制过程子链的合成方向是从子链的端向端延伸,所以耐热的聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到端,正确。答案跟踪练习下列关于文库和基因组文库的说法中,不正确的是文库中的来源于的反转录过程如果种生物的文库中的个基因与该生物的基因组文库中的个基因控制的性状相同,则这两个基因的结构也完全相同文库中的基因都没有启动子种生物的文库可以有许多种,但基因组文库只有种解析由书中定义可知,是指以为模板,由逆转录酶催化形成的互补,文库中的基因来自反转录,正确是由基因中的外显子转录形成的,因此文库中的基因不包含启动子和内含子等结构,与该生物的基因组文库中的基因结构不同,错误文库中的基因都没有启动子,只包含基因中的外显子,正确由于文库中只含有种生物的部分基因,因此该种基因文库可能有多种,而基因组文库中含有种生物的全部基因,因此只有种,正确。答案知识点二目的基因与载体结合重组分子细解教材构建基因表达载体构建的目的使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下代,同时使目的基因能够表达和发挥作用。基因表达载体的组成目的基因启动子终止子标记基因。目的基因人们获得的基因进入受体细胞并发挥作用,应该有相应的载体运输,因而表达载体必须有目的基因。这也是对载体进行改造的原因之。目的基因就是外源分子的有效片段。启动子是位于基因首端的段有特殊结构的片段,是聚合酶识别和结合的部位。启动子能驱动基因转录出,最终获得所需要的蛋白质。终止子是位于基因尾端的段有特殊结构的短片段,可以使转录在所需要的地方停止下来。标记基因可以鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来,如抗生素抗性基因。形成重组分子目的基因与载体结合的过程,实质上是不同来源的分子重新组合的过程,是基因工程的核心,其基本过程如下以质粒为载体用定的限制酶切割质粒,使质粒出现个切口,露出黏性末端。用同种限制酶切割含目的基因的分子,获得目的基因,并具有与质粒相同的黏性末端。将切下的目的基因片段与质粒混合,加入适量的连接酶,二者的黏性末端就可能因碱基互补配对而结合,从而形成个重组分子也叫重组质粒。南昌期末在基因表达载体的构建中,下列说法不正确的是个表达载体的组成包括目的基因启动子终止子有了启动子才能驱动基因转录出终止子的作用是使转录在所需要的地方停止所有基因表达载体的构建是完全相同的解析个表达载体的组成包括目的基因启动子终止子标记基因等,故错误启动子能启动转录过程,即有了启动子才能驱动基因转录出,故正确终止子的作用是使转录在所需要的地方停止,故正确不同的基因表达载体构建方法不同,故错误。综上所述,符合题意。答案跟踪练习对基因表达载体构建的些说法,不正确的是需要限制酶和连接酶参与基因表达载体中含有启动子和内含子标记基因通常是抗生素抗性基因基因表达载体的构建是基因工程的核心解析构建基因表达载体需要限制酶切割目的基因和运载体,用连接酶把相同黏性末端的目的基因和运载体连接形成重组,故正确基因表达载体含有启动子终止子标记基因和目的基因,不定含有内含子,故错误通常用抗生素基因作为标记基因,便于目的基因的鉴定和筛选,故正确基因表达载体的构建是基因工程的核心,在细胞外进行,使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下代并表达和发挥作用,故正确。答案知识点三将目的基因导入受体细胞细解教材转化目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。转化的实质将目的基因整合到受体细胞的染色体基因组中。常用的受体细胞大肠杆菌枯草杆菌土壤农杆菌酵母菌和动植物细胞等。将目的基因导入受体细胞的方法比较细胞类型方法说明特点农杆菌转化法目的基因插入到质粒的上含重组质粒的农杆菌农杆菌进入植物细胞将目的基因插入到植物细胞中染色体的上目的基因表达经济有效,适合于双子叶植物和裸子植物基因枪法目的基因包裹在微小的金粉粒子或钨粉粒子表面用基因枪高速射入到受体细胞或组织中目的基因表达成本较高,是单子叶植物中常用的种基因转化方法植物细胞花粉管通道法含目的基因的溶液滴加在柱头上或用含目的基因的溶液处理花粉粒花粉粒吸入目的基因授粉目的基因表达简便经济,我国科学家独创动物细胞显微注射技术目的基因片段受精卵的核内注射了目的基因的受精卵,经胚胎早期培养段时间后,再移植到雌性动物的输卵管或子宫内使其发育成转基因动物最为有效的种将目的基因导入动物细胞的方法微生物细胞氯化钙法处理微生物细胞感受态细胞将基因表达载体在缓冲液中与感受态细胞混合在定温度下促使感受态细胞吸收分子简便经济有效特别提醒利用以上几种方法,将目的基因导入受体细胞之前,都必须进行目的基因表达载体的构建,也就是说导入受体细胞的必须是重组分子,而不能直接导入目的基因。常用植物受精卵或体细胞经组织培养动物受精卵般不用体细胞微生物大肠杆菌酵母菌等作为受体干扰素蛋白解析检测到细菌的抗虫基因并未产生蛋白质,错误检测到人胰岛素基因及其并未产生蛋白质,错误检测到人生长激素序列并未产生蛋白质,错误提取到人干扰素蛋白,是蛋白质,正确。答案跟踪练习下列哪项表述说明了目的基因表达成功用探针检测目的基因出现杂交带用探针检测出现杂交带用抗原抗体杂交检测蛋白质出现杂交带以上都不能说明解析目的基因表达成功需从两个方面检测是分子水平检测,包括检测转基因生物染色体上是否插入了目的基因,检测目的基因是否转录出,检测目的基因是否翻译成蛋白质。二是个体水平的检测。如抗虫或抗病的目的基因导入植物细胞后,是否赋予了植物抗虫或抗病特性,需要做抗虫或抗病的接种实验。选项只是分子水平检测的方面,故选。答案新思维随堂自测涟水中学期中目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过鉴定与检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是检测受体细胞中是否有致病基因检测受体细胞中是否有目的基因检测目的基因是否转录出了检测目的基因是否翻译成蛋白质解析目的基因不定是致病基因,错误采用分子杂交技术检测受体细胞中是否有目的基因是鉴定和检测的关键步骤,正确检测目的基因是否转录出了,以及检测目的基因是否翻译成蛋白质是在分子水平上检测目的基因是否表达,故正确。因此,项正确,项错误。答案质粒上有,这种可以转移到受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的上。这种质粒存在于大肠杆菌农杆菌酵母菌苏云金芽孢杆菌解析质粒上有,这种可以转移到受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的上这种质粒存在农杆菌中,故正确,错误。答案限制性内切酶的作用实际上就是把上些化学键打断,种能对专识别的限制酶,打断的化学键是与之间的键与之间的键与之间的键磷酸与脱氧核糖之间的键解析限制酶的作用部位是磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键,而条链中相邻两个碱基之间的化学键为脱氧核糖磷酸脱氧核糖,而不能作用于碱基对之间的氢键,正确。答案淮安中期中应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题Ⅰ年,科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的分子重组,并且在大肠杆菌中表达成功,如下图。下列黏性末端属于同种限制酶切割而成的是。基因表达载体中能使人胰岛素在大肠杆菌中特异性表达的结构叫,其上有酶的结合位点。过程常采用的操作方法是填字母代号。感受态法农杆菌转化显微注射细胞融合为检测人胰岛素是否成功表达,可采用技术。启动子聚合抗原抗体杂交解析同种限制酶切割产生的黏性末端相同,故正确。在基因表达载体中,启动子是聚合酶识别并结合的位臵,是转录开始的地方。将目的基因导入大肠杆菌中的方法是先用钙离子处理,使大肠杆菌成为感受态细胞。检测目的基因是否成功表达的方法是抗原抗体杂交法。文昌中学段考质粒上有ⅠⅢⅠ三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示,请回答下列问题。在构建重组质粒时,应选用两种限制酶对进行切割,然后进行连接,以保证重组序列的唯性。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,应在培养基中加入,理由是。Ⅰ和Ⅲ质粒和含抗盐基因的氨苄青霉素重组质粒中含抗氨苄青霉素基因而抗四环素基因被破坏解析在构建重组质粒时,应保证质粒中的标记基因至少保留个不被破坏,且切割后质粒与目的基因具有的末端,还要避免质粒自身相连,所以应选用Ⅰ和Ⅲ两种限制酶对质粒和抗盐基因的进行切割,然后进行连接,以保证重组序列的唯性。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,应在培养基中加入氨苄青霉素,理由是重组质粒中含抗氨苄青霉素基因而抗四环素基因被破坏。新视点名师讲座启动子是段有特殊结构的片段,位于目的基因的首端,它是聚合酶识别和结合的部位,有了它才能驱动基因转录出,最终获得所需要的蛋白质。终止子位于目的基因的尾端,也是段有特殊结构的短片段。终止子相当于盏红色信号灯,使转录在所需要的地方停止下来。起始密码子中决定多肽链合成起始的相邻的三个碱基,可编码氨基酸。终止密码子中作为翻译多肽链终止信号的三联合密码子,可终止蛋白质合成,不编码氨基酸。特别提醒启动子和终止子均为段有特殊结构的片段,且长度远不止三个碱基,都与基因的转录过程相关联。起始密码子和终止密码子均位于中,且均只含三个碱基,都与的翻译过程相关联。新情境激趣引航基因工程是在分子生物学和分子遗传学综合发展基础上于世纪年代诞生的门崭新的生物技术科学。这个定义表明,基因工程具有以下几个重要特征首先,外源核酸分子在不同的寄主生物中进行繁殖,能够跨越天然物种屏障,把来自任何种生物的基因放置到新的生物中,而这种生物可以与原来生物毫无亲缘关系,这种能力是基因工程的第个重要特征。第二个特征是,种确定的小片段在新的寄主细胞中进行扩增,这样实现很少量样品“拷贝”出大量的,而且是大量没有污染任何其它序列的绝对纯净的分子群体。科学家将改变人类生殖细胞的技术称为“基因系治疗”,通常所说的“基因工程”则是针对改变动植物生殖细胞的。无论称谓如何,改变个体生殖细胞的都将可能使其后代发生同样的改变。新课堂预习探索学习目标简述基因工程原理。掌握基因工程基本操作程序的四个步骤。重难点尝试设计转基因生物的研制过程。新知预习基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定。目
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