子的分离，实现了酶的重复利用，节约了生产成本。不是。固定化酶的反应柱能进行化学反应，凝胶色谱柱不能进行化学反应。新课堂互动探究知识点血红蛋白的提取和分离的原理蛋白质分子在凝胶中的运动情况分析相对分子质量大相对分子质量小直径大小大于凝胶颗粒空隙直径小于凝胶颗粒空隙直径运动方式垂直向下运动无规则的扩散运动运动速度较快较慢运动路程较短较长洗脱顺序先从凝胶柱中洗脱出来后从凝胶柱中洗脱出来电泳方法琼脂糖凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳由于琼脂糖本身不带电荷，各种分子在电场中迁移速度决定于所带电荷性质的差异及分子的大小形状的不同在凝胶中加入，使蛋白质解聚成单链，与各种蛋白质形成蛋白质复合物，使其迁移速度完全取决于分子的大小特别提醒琼脂糖凝胶电泳操作简单，电泳速度快，样品不需要事先处理电泳后区带易染色，样品极易洗脱，便于定量测定。测定蛋白质的相对分子质量常用聚丙烯酰胺凝胶电泳，这是因为该方法分离蛋白质完全取决于分子的大小，而非所带电荷的性质和分子的形状。典例精析邛崃月考利用凝胶色谱法分离蛋白质的原理是蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小蛋白质相对分子质量的大小蛋白质所带电荷的多少蛋白质溶解度的大小解析凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。答案跟踪练习凝胶色谱法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是改变蛋白质分子通过凝胶时的路径吸附部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度将酶或细胞固定在细胞中与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速率解析凝胶是些微小的多孔的球体，较小的蛋白质分子进入凝胶内部，所经过的路径长，所以洗脱出来较慢，而较大的蛋白质分子则相反，并且，由于凝胶种类多，孔径大小不同，可进步改变进入凝胶内部不同大小蛋白质的路径。答案知识点二蛋白质提取和分离的实验过程样品处理及粗分离凝胶色谱操作纯度鉴定聚丙烯酰胺凝胶电泳判断纯化的蛋白质是否达到要求，需要进行蛋白质纯度的鉴定。鉴定的方法中，使用最多的是聚丙烯酰胺凝胶电泳。特别提醒样品处理分离与纯化的目的不同目的红细胞洗涤去除杂质，如血浆蛋白血红蛋白释放使红细胞破裂，释放血红蛋白分离血红蛋白溶液经过离心使血红蛋白与其他杂质分离开透析除去样品中相对分子质量较小的杂质纯化除去相对分子质量较大的蛋白质典例精析雅安中学月考红细胞中含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带和，可选用猪牛羊或其他哺乳动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题血红蛋白提取和分离的程序可分为四步和。实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是。以上所述的过程即是，它包括分离血红蛋白溶液和透析。样品处理粗分离纯化纯度鉴定防止血液凝固样品处理红细胞的洗涤血红蛋白的释放然后通过凝胶色谱法将样品进步纯化，最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定。样品纯化的目的是。电泳法利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。通过凝胶色谱法将相对分子量大的杂蛋白除去分子的大小解析血红蛋白提取和分离的程序可分为四步，分别是样品处理粗分离纯化纯度鉴定。在实验中加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固样品处理包括红细胞的洗涤血红蛋白的释放分离血红蛋白溶液和透析四步。样品纯化的目的是通过凝胶色谱法将相对分子量大的杂蛋白除去，进而使聚丙烯酰胺凝胶电泳法中迁移速率只取决于分子大小。电泳法利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子的大小形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。跟踪练习下图甲乙表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请回答下列问题血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有功能。甲装置中，是血红蛋白溶液，则是乙装置中，溶液的作用是不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于电荷的多少分子的大小肽链的多少分子形状的差异解析使用聚丙烯酰胺电泳的过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小。答案红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的。我们可以选用猪牛羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题分离蛋白质分子的种常用方法是凝胶色谱法，也叫做，是根据分离蛋白质的有效方法。血红蛋白提取和分离的程序可分为和纯度鉴定。分配色谱法相对分子质量样品处理粗分离纯化洗涤红细胞的目的是，以利于后续步骤的分离强化。采集的血样要及时分离红细胞，分离时采用低速短时间，然后用胶头吸管吸出上层透明的，将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯，再加入洗涤，如此重复，直至上清液中没有黄色。将洗涤好的红细胞倒入烧杯中，加入和充分搅拌，红细胞破裂，释放出血红蛋白。去除杂蛋白离心黄色血浆五倍体积的生理盐水蒸馏水体积的甲苯解析凝胶色谱法也叫分配色谱法，其依据是相对分子质量的大小血红蛋白提取和分离的步骤为样品处理粗分离透析纯化和纯度鉴定红细胞洗涤目的是去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化洗涤红细胞是采用低速短时间离心血红蛋白释放时要加入蒸馏水和甲苯，分离血红蛋白是采用高速长时间离心的方法。红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带和，我们可以选用猪牛羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，加入柠檬酸钠的目的是。洗涤红细胞时要用填溶液反复洗涤离心。要让红细胞破裂，释放血红蛋白时要加入。得到的血红蛋白溶液装入透析袋中透析，即血红蛋白的粗分离，目的是。然后通过填方法将样品进步纯化，最后进行纯度鉴定，使用最多的是填方法。防止血液凝固生理盐水蒸馏水和甲苯去除样品中相对分子质量较小的杂质凝胶色谱法聚丙烯酰胺凝胶电泳解析提取和分离血红蛋白时，新鲜的血液加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固。洗涤红细胞时要用生理盐水反复洗涤离心。要让红细胞破裂，释放血红蛋白时要加入蒸馏水和甲苯。得到的血红蛋白溶液装入透析袋中透析，即血红蛋白的粗分离，目的是除去样品中相对分子质量较小的杂质。通过凝胶色谱法可将样品进步纯化，最后进行纯度鉴定，使用最多的是聚丙烯酰胺凝胶电泳。新视点名师讲座蛋白质的理化性质具有酸碱两性蛋白质是由氨基酸通过肽键形成的高分子化合物，在肽链的两端分别有个和个，因此蛋白质的性质同氨基酸致，也分别显示了的碱性和的酸性，具有酸碱两性。水解反应在定浓度的酸碱液中或在蛋白酶的催化作用下，蛋白质可水解为小分子的肽或多种氨基酸，该过程有水参与。溶解性蛋白质可溶于水中，形成溶液。蛋白质的水溶液具有胶体的性质。盐析蛋白质溶液中加入少量电解质等，能促进蛋白质溶解如果向溶液中加入高浓度的电解质液，可以使蛋白质从溶液中析出，而出现盐析现象。盐析得到的蛋白质仍可以溶于水，而不影响其原来的理化性质，这过程是可逆的。借助这原理，可以采用盐析的方法分离提纯蛋白质。蛋白质变性在高温强酸强碱重金属盐或紫外线照射的条件下，蛋白质结构可以发生不可逆的改变而凝结固，这种变化叫做蛋白质的变性，蛋白质变性凝固后，就失去了原有的理化性质，失去原有的生理作用，也称作变性失活。颜色反应蛋白质可跟许多试剂发生颜色反应，如蛋白质中的肽键可以与双缩脲试剂产生紫色反应蛋白质溶液中滴加浓硝酸，可以使溶液呈现黄色的颜色反应。故以此原理鉴定蛋白质。新情境激趣引航血红蛋白是红细胞的主要成份。每个血红蛋白分子由个血红素基团与珠蛋白构成，每个血红素又由个吡咯环组成，在环中央有个铁原子。血红蛋白中的铁在二价状态时，可与氧呈可逆性结合氧合血红蛋白，如果铁氧化为三价状态。血红蛋白则转变为高铁血红蛋白，就失去了载氧能力。新课堂互动探究学习目标尝试对血液中血红蛋白的提取和分离。体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法。了解色谱法，电泳法等分离生物大分子的原理。新知预习分离蛋白质的原理与方法分离蛋白质的原理蛋白质特性的差异分子的形状和大小所带电荷的性质和多少溶解度吸附性质对其他分子的亲和力分离蛋白质的方法凝胶色谱法概念根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，也叫分配色谱法。过程及原理凝胶形态微小的多孔球体组成大多数由多糖类化合物构成结构内部有许多贯穿的通道分离的过程分离原理依据相对分子质量的不同而将蛋白质分离。电泳法电泳的概念指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。原理利用了待分离样品中各种分子的带电性质的差异分子本身的大小以及形状的不同，使带电分子在电场中产生不同的迁移速度，从而分离样品中的各种分子。分离方法琼脂糖凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳等。其中后者使用时通常加入带负电荷多的，形成“蛋白质复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子的大小。缓冲溶液组成通常由种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的使用比例，可配制不同的缓冲液。作用抵制外界的酸和碱对溶液的影响，维持基本不变。激趣应用缓冲溶液的成分是怎样的缓冲溶液中含对酸碱起缓冲作用的缓冲对，每缓冲对均由弱酸和相应的强碱盐组成。细胞外液也有酸碱缓冲对，你能回忆并说出细胞外液中的酸碱缓冲对吗提示细胞外液中主要的酸碱缓冲对有等。二凝胶色谱法的实验操作蛋白质的提取和分离步骤样品处理粗分离透析方法将血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋放入定量适宜浓度的磷酸缓冲液为中，透析目的除去样品中相对分子质量较小的杂质纯化凝胶色谱法纯度鉴定聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶色谱操作凝胶色谱柱的制作凝胶色谱柱的装填样品的加入与洗脱加样前打开下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐，关闭出口。加透析样品调整缓冲液面与凝胶面平齐。滴加透析样品用吸管将透析后的样品加到色谱柱的顶端。样品渗入凝胶床加样后，打开下端出口，等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口。洗脱打开下端出口，用的磷酸缓冲液洗脱。收集待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每收集管，连续收集。操作提示红细胞的洗涤洗涤次数离心速度与离心时间十分重要。洗涤次数过少，无法除去血浆蛋白离心速度过高和时间过长会使白细胞等同沉淀，达不到分离效果。色谱柱填料的处理商品凝胶使用前需直接放在洗脱液中膨胀，可以将加入其中的湿凝胶用沸水浴加热，加速膨胀。凝胶色谱柱的装填在装填凝胶柱时，不得有气泡存在。气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。蛋白质的分离如果红色区带均匀致地移动，说明色谱柱制作成功。激趣应用凝胶色谱柱和固定化酶的反应柱有何区别凝胶色谱柱和固定化酶的反应柱都装填有不能通过“柱”下端多孔板或多孔筛板的