的构建基因表达载体的组成目的基因启动子终止子标记基因。基因表达载体的构建方法将目的基因导入受体细胞植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法受体细胞农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术感受态细胞法处理受精卵体细胞受精卵原核细胞目的基因的检测和鉴定类型步骤检测内容方法结果显示分子检测第步第二步第三步个体水平鉴定目的基因是否整合到受体细胞染色体的上分子杂交和之间目的基因是否转录出分子杂交技术和之间目的基因是否翻译成蛋白质抗原抗体杂交是否成功显示出杂交带根据目的基因表达出的性状判断，包括做抗虫抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度对基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较，以确定功能是否相同过程示意图类我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用的矮牵牛品种。它的表现型与上述转基因植物相似，研究发现它的细胞中基因转录正常，结合此现象推测，上述对转基因矮牵牛开白花的两种解释中第种成立的可能性更大。二解析实施基因工程的第步是获取目的基因，依题意可知，控制色素形成的基因基因为目的基因，该基因在花瓣细胞中得以表达，因此在红花矮牵牛的花瓣细胞中能提取到相应的，再经反转录获得基因第二步是基因表达载体的构建，即目的基因与运载体结合第三步是将目的基因导入受体细胞，将目的基因导入植物细胞常采用农杆菌转化法利用植物组织培养技术可将含有目的基因的植物细胞培育成转基因植株。许多转基因植株的花色为白色，说明目的基因没有在受体细胞中完成表达，所以，需要实施基因工程的第四步目的基因的检测和鉴定。检测目的基因是否转录出，可采用分子杂交技术，即以标记的基因作为探针，分别与从白花转基因植株和红花非转基因矮牵牛植株的细胞中提取的总进行杂交。若检测的结果是转基因植株中基因的减少，说明生物体外源基因目的基因的转入并未增加基因的表达，甚至连细胞的内源基因的表达也受到抑制，从而使花色为白色。基因的表达包括转录和翻译两个阶段。许多转基因植株的花色为白色的原因可能有二是聚合酶未能识别基因首端的启动子部位，从而不能进行转录，因为基因首端的启动子是聚合酶识别和结合的部位，有了它，才能驱动基因转录出，最终通过翻译过程获得所需要的蛋白质。是细胞内转录出了部分与序列互补的反义，反义与形成了双链，不但降低了游离的含量，还会抑制翻译过程，导致目的基因不能成功表达。依题意“自然界中存在种基因表达受抑制的矮牵牛品种。它的表现型与上述转基因植物相似，研究发现它的细胞中基因转录正常”，由此可推测，上述对转基因矮牵牛开白花的两种解释中第二种成立的可能性更大。基因工程的基本工具及操作程序分析策略限制酶及其切点的分析个至多个限制酶切点作为载体必须具有个至多个限制酶切点，以便与外源基因连接。每种酶个切点每种酶的切点最好只有个。因为种限制酶只能识别单切点，若载体上有个以上的酶切点，则切割重组后可能丢失些片段，若丢失的片段含复制起点区，则进入受体细胞后便不能自主复制。个载体若只有种限制酶的个切点，则酶切后既能把环打开接纳外源片段，又不会丢失自己的片段。从“基因表达”层面分析基因表达载体的必需条件基因表达载体的组成目的基因启动子终止子标记基因复制原点。启动子和终止子启动子是聚合酶结合位点，启动转录终止子是终止转录的位点。插入的目的基因只是结构基因部分，其表达需要调控序列，因而用作载体的质粒插入部位前需要有启动子，后需要有终止子。专题八现代生物科技专题命题源基因工程与细胞工程专题八现代生物科技专题最新考纲基因工程基因工程的诞生Ⅰ基因工程的原理及技术Ⅱ基因工程的应用Ⅱ蛋白质工程Ⅰ的粗提取与鉴定实验克隆技术植物的组织培养Ⅱ动物的细胞培养与体细胞克隆Ⅰ细胞融合与单克隆抗体Ⅱ基因工程的基本工具限制酶连接酶载体作用作用部位切割目的基因和载体拼接片段，形成重组携带目的基因进入受体细胞两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键限制酶连接酶载体作用特点条件识别特定的核苷酸序列在特定位点上切割连接酶只能连接黏性末端连接酶能连接黏性末端和平末端能在宿主细胞内稳定存在并大量复制有多个限制酶切割位点具有特殊的标记基因基因工程的操作程序目的基因的获取从基因文库中获取。利用技术扩增其实质是在体外对目的基因进行大量复制。用化学方法人工合成对于已知的核苷酸序列直接人工合成。可通过反转录法获取，即逆转录酶单链聚合酶双链。基因表达载体的构建基因表达载体的组成目的基因启动子终止子标记基因。基因表达载体的构建方法将目的基因导入受体细胞植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法受体细胞农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术感受态细胞法处理受精卵体细胞受精卵原核细胞目的基因的检测和鉴定类型步骤检测内容方法结果显示分子检测第步第二步第三步个体水平鉴定目的基因是否整合到受体细胞染色体的上分子杂交和之间目的基因是否转录出分子杂交技术和之间目的基因是否翻译成蛋白质抗原抗体杂交是否成功显示出杂交带根据目的基因表达出的性状判断，包括做抗虫抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度对基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较，以确定功能是否相同过程示意图类我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用法获得此目的基因或扩增目的基因。构建重组质粒时，通常要用分别切割。将重组质粒转入农杆菌时，可以用处理农杆菌，使重组质粒易于导入。化学合成或人