物质扩增方法研究实时定量是指在指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来实时测定特异性产物的量。张小海等利用实时荧光定量技术检测珠子参基因，采用试剂盒提取，的琼脂凝胶电泳和超微紫外分光光度计检测总量，反转录得到，然后对内参基因基因进行扩增。优化扩增条件结果显示，当模板浓度为引物浓度为时为的最优扩增条件，扩增效率最高。此条件可以为后续的珠子参及其近缘种的分子生药学分析奠定良好的理论基础和科学依据。分子标记研究分子标记技术可以用于研究植物资源遗传多样性鉴别遗传结构，与传统方法相比其具有不受环境和地理因素影响的优势。竹节参珠子参等人参属植物药用价值高药用部位外形相似，所以传统方法不易准确鉴别，多种分子标记技术如随机的比率来看，竹节参与西洋参的亲缘关系较远。遗传物质提取及扩增方法研究遗传物质提取方法研究珠子参等参类植物中含有较高含量的多酚多糖类成分，还有许多的水解酶和色素，会影响其的提取效果。宋小妹等采用新型植物基因组提取试剂盒提取珠子参基因组，采用琼脂糖凝胶电泳以为标准检测提取的完整性，在紫外分光光度计上测定值确定的质量和浓度。结果在，电泳条带集中整齐清晰明亮无拖尾无弥散，说明此方法提取的基因组纯度和完整性较好，可满足扩增要求。黄文静等比较了法改良法改良法和高盐低法这种方法提取新鲜和干燥的珠子参根茎的效果。结果不同方法提取效果有明显差异，从新鲜根茎中提取总浓度最高的是法，其次依次是改良法改良法高盐低法从干燥根茎中提取总浓度高低依次是法改良法改良法和高盐珠子参及其近缘种竹节参的分子生药学研究进展药学综合论文物质。珠子参及其近缘种竹节参的分子生药学研究进展药学综合论文。分子标记技术标记是年在微卫星的基础上提出的分子标记方法。宋小妹等采用正交设计实验优化了珠子参反应体系。通过对影响反应的主要因素聚合酶和模板浓度等进行筛选及优化，根据扩增后琼脂糖凝胶电泳结果所显示的条带清晰度及条带数量等指标进行直观分析，得到进行反应的优化体系。该体系对大多数引物都适用，只需适当调整扩增过程中的退火温度就能达到较好的扩增效果。王薇等利用该体系对陕西川云南等省境内个区域个珠子参样本的分子标记进行了研究，对扩增的多样性条带进行聚类分析和主坐标分析建立遗传图谱，结果两者均按不同地理位臵分类，说明珠子参样本之间的遗传多样性水平较高，种质间的亲缘关系和地理位臵生长习情生态分布有定的相关性。标记技术标记是以或标记为基础建立增出的条多态性条带，绘制出种植物的。遗传物质提取及扩增方法研究遗传物质提取方法研究珠子参等参类植物中含有较高含量的多酚多糖类成分，还有许多的水解酶和色素，会影响其的提取效果。宋小妹等采用新型植物基因组提取试剂盒提取珠子参基因组，采用琼脂糖凝胶电泳以为标准检测提取的完整性，在紫外分光光度计上测定值确定的质量和浓度。结果在，电泳条带集中整齐清晰明亮无拖尾无弥散，说明此方法提取的基因组纯度和完整性较好，可满足扩增要求。黄文静等比较了法改良法改良法和高盐低法这种方法提取新鲜和干燥的珠子参根茎的效果。结果不同方法提取效果有明显差异，从新鲜根茎中提取总浓度最高的是法，其次依次是改良法改良法高盐低法从干燥根茎中提取总浓度高低依次是法改良法改良法和高盐低法。从竹节参的基因插入烟草毛状根的基因组中，结果外源的竹节参基因能促进皂苷类化合物在烟草毛状根中的合成，含量测定显示转基因毛状根系中的总皂苷含量明显高于野生型毛状根和野生烟草。说明基因在烟草毛状根中超量表达能够提高总皂苷含量，如果再与其他萜皂苷合成酶联合使用可能在竹节参毛状根中超量表达提高人参皂苷类的合成效果。遗传物质扩增方法研究实时定量是指在指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来实时测定特异性产物的量。张小海等利用实时荧光定量技术检测珠子参基因，采用试剂盒提取，的琼脂凝胶电泳和超微紫外分光光度计检测总量，反转录得到，然后对内参基因基因进行扩增。优化扩增条件结果显示，当模板浓度为引物浓度为时为的最优扩增条件，扩增效率最高。此条件可以为后续的珠子参及其近缘种的分子生药学分析奠定良好的理论基础和科学依据。关键酶基因对皂苷合成过程的影响研究研究发现，过表达人参皂苷合成途径中关键酶基因会导致人参皂苷积累量的变化。通过借助分子生物学和生物信息学的分析方法，分析珠子参竹节参皂苷合成过程中关键酶基因，有可能提高珠子参中萜皂苷的合成量或者通过外源途径合成萜皂苷。而植物体内萜类化合物的生物合成大体可分为前体物的合成萜类骨架的构建和环上官能团的修饰大过程。其中，氧化鲨烯环化酶基因家族催化，氧化鲨烯形成不同类型的萜碳环，是合成齐墩果烷型萜皂苷和达玛烷型皂苷过程中的共同物质，参与此过程关键酶有香树素合成酶达玛烷合成酶环阿屯醇合成酶等。参与皂苷合成全部过程中还包括羟基甲基戊酰辅酶还原酶法尼基焦磷酸合酶鲨烯合酶等余种的关键酶。皂苷前体物合成过程中关键酶基因表达量影响是珠子参皂苷合成途径中的第个关键催化酶，通过对基因表达的调控有可能影响珠子参皂苷的合成。刘美佳等选取珠子参愈伤组织，通过不同，与竹节参人参西洋参序列存在差异。采用最大简约法建立基因系列结合的聚类分析看出，珠子参与越南人参大叶有较近的亲缘关系，而竹节参与人参西洋参的亲缘关系较近，珠子参和竹节参亲缘关系较远，因此认为中国植物志把珠子参作为竹节参的变种的结果有争议，还有待进步确认。基于转录组测序研究即转录组测序技术，高通量方法是其中种。等采用竹节参根状茎为材料，利用测序平台进行了竹节参从头转录组组装和高通量分析，得到了完整的竹节参转录组数据，并进步研究了与竹节参皂苷类萜皂苷合成代谢相关的功能基因。结果筛选出个参与萜皂苷碳骨架生物合成的，预测了个细胞色素和个糖基转移酶参与后期皂苷骨架基团链修饰。等通过采用的测序方法分析竹节参叶花须根至年生老根茎和年新长成的嫩根茎种组织中表达的基因转录组效识别掺伪造假现象，通过遗传学研究可以很好地解决市场流通过程中的造假行为，保证用药安全。与其他主要参类植物不同的是，珠子参竹节参同时含有达玛烷型和齐墩果烷型两种结构的萜皂苷，所以药理活性更加广泛，但各成分含量较低，通过遗传学研究影响萜皂苷合成过程中关键酶的调控作用能够达到调控不同类型皂苷合成量的目的，进步研究利用转基因技术实现在其他植物中合成具有生理活性的萜皂苷，可以作为参类珍稀资源的保护和可持续利用的理论基础。有关生长环境对竹节参等的遗传特性的影响，从研究结果看，生长环境对物种进化与变异轨迹有明显的影响，也会影响萜皂苷在甲羟戊酸循环中多种关键催化酶基因表达量而影响主要活性物质萜皂苷的合成，最终会影响竹节参的遗传和进化特征，也会影响该类植物的遗传多样性特征。虽然对竹节参珠子参的遗传学作了大量的研究，但部分研究成果之间存在结果不致的现象，如有些研究认为珠子参与人参亲缘关系较近，而另些研究成果认为其与有较近的亲缘关系，也有对相关的基因进行调控有可能影响珠子参或同属其他物种皂苷合成，缩短生长周期，有利于缓解珍稀药材资源紧张的情况。环境因子对遗传特性的影响研究环境因子对珠子参表观遗传特性的影响生长环境的变化会影响珠子参的遗传变异属性，从而会影响到珠子参中生物活性成分的合成。研究发现珠子参也存在丰富的表观遗传变异多样性的特征，其叶子形状变异较大，根据这些差异可以初步分析推测该物种进化与变异轨迹，并以此为基础进行遗传学分类与多样性研究，。杨天梅等以珠子参叶片形态结构特征为指标，选取横断山区个珠子参自然居群研究其多样性及生态适应性。结果显示，不同居群珠子参叶片形态变异明显，地理位臵差异经纬度年均气温以及遮阴度等都是影响因素，叶长及背面表皮毛密度最易受环境因子变化的影响。这些变化有利于药用植物遗传学研究中进行原植物品种鉴定，还可以在良种选育研究植物生态适应性以及资源的保护和利用方面提供参考。遮阴对酶基因表达量的影响研究黄文静等通过分析珠子参皂苷合成候选基因，可以作为竹节参皂苷合成过程的有关研究。其他研究对珠子参和羽叶转录组测序同样获得与萜碳环骨架合成相关相关和糖基化转移酶相关的信息。从对竹节参珠子参等的转录组信息研究显示，获得相关基因的越多证明对其研究得越清楚，可以获得此类植物次生物质代谢等的分子生物学信息，在此基础上研究该植物生长发育及内含物次生代谢过程中的相关重要表达基因，可以发现萜皂苷合成方式识别合成通路中多种关键酶基因，为调控珠子参竹节参等珍稀植物主要活性成分提供了理论基础。对皂苷生物合成的影响是合成达玛烷型皂苷首个关键酶。对竹节参皂苷合成过程有重要调控作用。王景思等根据竹节参转录组数据，采取年生栽培种竹节参，利用方法克隆得到基因的全长序列，命名为。通过检测基因的表达量，发现基因在花中表达量最高，而在根状茎中的表达量最低。说明竹节参中皂苷首先在叶和花部位合成，后转移到根状珠子参及其近缘种竹节参的分子生药学研究进展药学综合论文表达谱，发现这个组织中都有几个独特的特征。而叶子的在所有研究的组织中最独特，其转录组注释的结果发现萜生物合成途径中相关的